猫杯状病毒毒株及疫苗组合物制造技术

本发明专利技术提供了一种猫杯状病毒毒株及疫苗组合物。该猫杯状病毒毒株的命名为猫杯状病毒FCVWH

【技术实现步骤摘要】
猫杯状病毒毒株及疫苗组合物


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及动物疫苗，尤其涉及一种猫杯状病毒毒株及疫苗组合物。

技术介绍

[0002]猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是引起猫上呼吸道疾病最主要的病原之一，严重威胁宠物猫以及所有野生猫科动物的生命健康。FCV属于杯状病毒科，水疮性病毒属，是无囊膜的单股正链不分节段的RNA病毒。成熟的FCV病毒粒子为球形，直径约为35
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40nm。FCV的感染通常以猫的上呼吸道和口腔病变为主，舌上频繁出现水疱和溃疡是该病的典型临床特征，还可导致肺炎等症状，而高毒力FCV毒株甚至可导致死亡。FCV属于单股正链RNA病毒，大小约为7.7kb，编码3个开放读码框(ORFs)。其ORF1长约5.3kb，编码1763个氨基酸(aa)的非结构蛋白；ORF2长约2.1kb，编码衣壳蛋白VP1蛋白前体，衣壳蛋白VP1也是FCV最主要的免疫原性蛋白；ORF3位于基因组3
′
末端，长320bp，编码次要衣壳蛋白VP2，VP2也可影响FCV的复制、成熟、蛋白合成及病毒颗粒的形成过程，自然的病毒颗粒需VP1、VP2共同组装。
[0003]FCV复制过程中RNA依赖RNA聚合酶，缺乏校对和低保真度性而具有很强的基因可塑性，这种易于出错的病毒复制机制使病毒在免疫压力下快速做出反应，易于突变逃避机体免疫清除，产生多个基因型FCV。目前已经鉴定并分离出几种FCV菌株，比如LZ
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2016株(保藏在中国典型培养物保藏中心或CCTCC，保藏编号为V202276)、F9菌株(保藏在美国典型培养物保藏中心或ATCC，登录号为VR
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782)，2280菌株(ATCC VR
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2057)，KCD菌株(ATCC VR
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651)和CFI菌株(ATCC VR
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654)。1970年代末开始使用减毒的FCV菌株进行FCV疫苗接种，主要是F9菌株，这些减毒疫苗构成了大多数商业FCV疫苗。该类疫苗能较好地刺激机体产生保护性免疫，但存在毒力返祖问题。有证据表明，活疫苗病毒在某些情况下可能引起临床症状，甚至引起流行感染。接种FCV疫苗仅能保护猫不发病，但是不能抵抗感染，通常免疫过的猫可能会出现亚临床感染或持续感染的状态，可以长期地向外排出病毒成为传染源，因此，改性活疫苗的安全性值得怀疑。
[0004]由于抗原随时间漂移，针对在1960
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70年代分离的疫苗菌株，包括诸如F9、255或2280的菌株产生的抗血清仅中和了在1990年代和2000年代流行的杯状病毒菌株的一些分离株。例如，抗F9血清中和了1990
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1996年间43％的美国分离株，1980
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89年间56％的分离株和1958
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79年间86％的分离株，1990
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1996年间隔离群的10％(Lauritzen，1997)。由于大多数的中和性表位存在于FCV衣壳蛋白的高变区，所以利用单价的FCV疫苗可能不能完全预防病毒的感染。因此，为提高交叉中和反应，多价疫苗成为FCV疫苗新的研究方向。FCV早先分离株的减毒和灭活疫苗不再能提供足够的保护来抵抗最新流行的FCV株，当前的杯状病毒疫苗毒株的选择应更适应当下流行病学现状，并且能够对猫科动物种群中目前鉴定出的分离株提供更好的交叉中和作用。
[0005]有鉴于此，有必要分离出更适应当下流行病学现状的毒株，并将其应用于相应疫
苗的制备，以解决上述问题。

技术实现思路

[0006]针对上述现有技术的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种猫杯状病毒毒株及疫苗组合物，该毒株具有较高的病毒滴度，对健康易感猫有较强的致病性，该毒株的灭活产物能够诱导较高水平的中和抗体，进而阻止FCV的感染，以实现对FCV的有效防控。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供了一种猫杯状病毒毒株，所述毒株命名为猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：V202301。
[0008]作为本专利技术的进一步改进，所述猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株的衣壳蛋白的序列如SEQ ID NO:2所示。
[0009]作为本专利技术的进一步改进，编码所述猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株的衣壳蛋白的核酸的序列如SEQ ID NO:1所示。
[0010]为实现上述目的，本专利技术还提供了一种疫苗组合物，所述疫苗组合物中包含所述猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株或其衍生病毒。
[0011]作为本专利技术的进一步改进，所述疫苗组合物中选用的所述猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株为灭活病毒。
[0012]作为本专利技术的进一步改进，所述疫苗组合物中包含所述猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株的衣壳蛋白或编码所述猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株的衣壳蛋白的核酸。
[0013]作为本专利技术的进一步改进，所述疫苗组合物的制备方法包括如下步骤：
[0014]分离出所述猫杯状病毒FCV WH
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2019株，并进行培养，得到FCV WH
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2019株病毒液；
[0015]对所述FCV WH
‑
2019株病毒液进行灭活处理；
[0016]将灭活彻底后的所述FCV WH
‑
2019株病毒液稀释至预定的病毒滴度。
[0017]作为本专利技术的进一步改进，稀释前，所述FCV WH
‑
2019株病毒液的病毒滴度≥10
9.7
TCID
50
/mL；稀释后的病毒滴度为10
8.5
TCID
50
/mL。
[0018]作为本专利技术的进一步改进，所述疫苗组合物中还包括FCV LZ
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2016、FCV
‑
F9、FCVLLK、FCV
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M8、FCV
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255、FCV
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2280中的至少一种猫杯状病毒毒株。
[0019]作为本专利技术的进一步改进，所述疫苗组合物中还包含药学上能接受的载体或佐剂。
[0020]本专利技术的有益效果是：
[0021]1、本专利技术提供的猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株，病毒滴度能够达到10
9.7
TCID
50
/mL，具有较高的病毒滴度；且该毒株对健康易感猫具有较强的致病性，可引起典型的口腔溃疡和结膜炎等症状。该毒株的灭活制品免疫猫可产生良好的免疫应答，具有良好的免疫原性，可诱导较高水平的中和抗体，进而阻止FCV的感染，具备开发疫苗的基本潜质。将该毒株灭活后应用于疫苗的制备，获本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猫杯状病毒毒株，其特征在于：所述毒株命名为猫杯状病毒FCV WH
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2019株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：V202301。2.根据权利要求1所述的猫杯状病毒毒株，其特征在于：所述猫杯状病毒FCVWH
‑
2019株的衣壳蛋白的序列如SEQ ID NO:2所示。3.根据权利要求2所述的猫杯状病毒毒株，其特征在于：编码所述猫杯状病毒FCVWH
‑
2019株的衣壳蛋白的核酸的序列如SEQ ID NO:1所示。4.一种疫苗组合物，其特征在于：所述疫苗组合物中包含权利要求1
‑
3中任一权利要求所述的猫杯状病毒FCVWH
‑
2019株或其衍生病毒。5.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其特征在于：所述疫苗组合物中选用的所述猫杯状病毒FCVWH
‑
2019株为灭活病毒。6.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其特征在于：所述疫苗组合物中包含所述猫杯状病毒FCV WH
‑
2019株的衣壳蛋白或编码所述猫杯状病毒FCV WH
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2019株的衣壳蛋白的核酸。7.根据权利要求4所述的疫苗组合物，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹胜波，曹龙龙，周登元，李秋燕，陈清秀，韦丽婷，史开拓，李勇璠，王莹，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：