一种二乙氨基乙基天然多糖层析介质的制备方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，公开了一种二乙氨基乙基天然多糖层析介质的制备方法。本发明专利技术独创性地先用多环氧基化合物活化多糖基质以引入多个活性羟基反应位点，再用烯丙基缩水甘油醚修饰多糖基质表面，而后溴化烯丙基，然后经胺化得多糖基阴离子交换层析介质。本发明专利技术制备过程中未采用易使蛋白变性的金属元素；同时将未与羟基发生反应的环氧基充分水解为羟基，可避免环氧基团后续的氨基化，因此不会导致残余的环氧基团与蛋白上的胺基产生非特异性吸附，进而影响纯化效果和介质使用寿命。此外本发明专利技术方法原料易得，烯丙基修饰和胺化效率高，所得二乙氨基乙基天然多糖层析介质的离子交换容量高。换容量高。

【技术实现步骤摘要】
一种二乙氨基乙基天然多糖层析介质的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种二乙氨基乙基天然多糖层析介质的制备方法。

技术介绍

[0002]随着生物医药领域蓬勃发展，市场对稳定高效的蛋白分离材料的需求也十分迫切。天然大分子材料如纤维素、琼脂糖和葡聚糖，作为层析介质在分离和纯化领域中已被广泛应用，主要是因为其来源丰富、生产成本低、易于修饰、无毒性以及较好的生物相容性。例如二乙氨基乙基琼脂糖凝胶是一种弱阴离子交换模式的凝胶填料，已被广泛应用于蛋白的分离纯化，但其常用的制备原料二乙氨基氯乙烷盐酸盐被纳入2018年发布并于2019年1月1日实施的《<中华人民共和国监控化学品管理条例>实施细则》的二类监管品中，因此原料不易得成为其生产的重要难题。
[0003]中国专利申请CN105727911A提出一种用原子转移自由基聚合(ATRP)的方法，用甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝到琼脂糖凝胶介质上，使其挂载活性环氧基团，然后用二乙胺修饰获得二乙氨基乙基琼脂糖层析介质。然而，该专利所公开的方法存在以下缺点：一是在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种二乙氨基乙基天然多糖层析介质的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：先用多环氧基化合物活化多糖基质以引入多个活性羟基反应位点，得到多活性羟基多糖基质，接着用烯丙基缩水甘油醚在多活性羟基多糖基质表面引入惰性基团，制得烯丙基化介质；S2：将S1所得烯丙基化介质表面的不饱和键溴化，得到溴化介质；S3：通过二乙胺胺化S2所得溴化介质，得到二乙氨基乙基天然多糖层析介质。2.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：S1中，所述多环氧基化合物活化多糖基质以引入多个活性羟基反应位点的步骤具体包括：将多糖基质，二甲基亚砜和NaOH溶液于35
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45℃下震荡反应，随后加多环氧基化合物反应，加入NaOH溶液以将未反应的环氧基充分水解，洗去未反应的多环氧基化合物，得到多活性羟基多糖基质。3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于：S1中，所述多环氧基化合物选自三羟甲基丙烷三缩水甘油醚、丙三醇三缩水甘油醚、甘油三丙氧基三缩水甘油醚或季戊四...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱永常，吴海强，何华英，刘兆善，
申请(专利权)人：浙江纽龙合成材料制造有限公司，
类型：发明
国别省市：