钠钾ATP酶的抗体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了钠钾ATP酶的抗体及其应用，具体涉及所述抗体在制备用于预防和/或治疗脂肪肝的药物或保健品中的用途，尤其是非酒精性脂肪性肝病。脂肪性肝病。

【技术实现步骤摘要】
钠钾ATP酶的抗体及其应用


[0001]本专利技术属于抗体免疫疗法的
，特别涉及特异性结合钠钾ATP酶的抗体及其应用。

技术介绍

[0002]钠钾ATP酶(Na
+
/K
+
‑
ATPase,NKA)是在所有细胞中表达的跨膜蛋白，它可以将三个钠离子交换为两个钾离子进入细胞。NKA由α，β和γ三个亚基组成，其中α有四个催化亚基(α1
‑
4)。
[0003]非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝病之一，可以发展成为更严重的非酒精性脂肪性肝病炎(NASH)，肝硬化和肝癌，严重危害人类的生命健康。随着肥胖，糖尿病和代谢综合症的流行继续增长，预计这种负担会增加。实际上，越来越多的学者认为NAFLD是代谢综合症的重要成分。当前治疗NAFLD的主要方法是采用健康宣教、营养支持、药物治疗、中医药治疗和肝移植等，辅助治疗NAFLD的药物主要包括减轻脂质过氧化的药物、胰岛素受体增敏剂、降血脂药、肝细胞保护剂、血管紧张素受体拮抗剂、抗细胞因子抑制剂、肠道微生物调整剂等，但现阶段仍然尚无特效的对症药物。随着肥胖、糖尿病及代谢综合症的发病率持续增长，NAFLD代表着一个日益严重的公共卫生问题，需要作出努力来了解这种流行病并减轻疾病的负担。因此，迫切需要探明NAFLD的发病机制和病情恶化机制，从而寻找有效的治疗方法。

技术实现思路

[0004]为解决上述问题，本专利技术实施例的目的在于提供一种预防和/或治疗脂肪肝，尤其是非酒精性脂肪性肝病的方法。
[0005]第一方面，实施例提供了一种抗体，所述抗体包括重链可变区CDR1、CDR2和CDR3，以及轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3，
[0006]其中所述重链可变区CDR1包括SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列或与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列，或者由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成，或者由与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列组成；
[0007]所述重链可变区CDR2包括SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列或与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列，或者由SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列组成，或者由与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列组成；
[0008]所述重链可变区CDR3包括SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列或与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列，或者由SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列组成，或者由与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列组成；
[0009]所述轻链可变区CDR1包括SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列或与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列，或者由SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列组成，或者由与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列组成；
[0010]所述轻链可变区CDR2包括SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列或与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列；或者由SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列组成，或者由与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列组成；以及
[0011]所述轻链可变区CDR3包括SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列或与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列；或者由SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列组成，或者由与其具有至少99％、98％、97％、96％、95％、90％、80％、70％、60％、或50％同一性的序列组成。
[0012]第二方面，实施例提供了所述抗体在制备用于预防和/或治疗脂肪肝的药物或保健品中的用途，尤其是非酒精性脂肪性肝病。
[0013]第三方面，实施例提供了编码所述抗体、其重链CDR1
‑
3或其轻链CDR1
‑
3的多核苷酸。
[0014]第四方面，实施例提供了含有所述多核苷酸的载体、宿主细胞或表达盒。
[0015]第五方面，实施例提供了钠钾ATP酶的抗体在制备用于预防和/或治疗脂肪肝的药物或保健品中的用途。
附图说明
[0016]所描述的附图仅是示意性的而非限制性的。
[0017]图1A示出了结合DR
‑
Ab的NKAα亚基的细胞外DR区。
[0018]图1B示出了通过ELISA测定DR
‑
Ab的滴度。
[0019]图2A示出了油酸处理的HepG2细胞的NKA活性检测。
[0020]图2B示出了高脂饮食(HFD)诱导的小鼠肝脏的NKA活性检测。
[0021]图2C示出了油酸处理的HepG2细胞的NKAα1、NKAα2和NKAα3蛋白表达的蛋白质印迹结果。
[0022]图2D示出了油酸处理的HepG2细胞的NKAα1、NKAα2和NKAα3蛋白表达水平的定量图。
[0023]图2E示出了油酸处理的HepG2细胞的NKAα1、NKAα2和NKAα3的mRNA水平检测。
[0024]图2F示出了HFD对肝脏的NKAα1、NKAα2和NKAα3蛋白表达的蛋白质印迹结果。
[0025]图2G示出了HFD对肝脏的NKAα1、NKAα2和NKAα3蛋白表达水平的定量图。
[0026]图2H示出了HFD对肝脏的NKAα1、NKAα2和NKAα3的mRNA水平检测。
[0027]图3A示出了在HepG2细胞，多克隆抗体DR
‑
Ab(2μM)预处理逆转了油酸所诱导的质膜NKAα1的蛋白表达水平的减少，而不影响总NKAα1蛋白的蛋白印迹结果(n＝4)。
[0028]图3B示出了在HepG2细胞，多克隆抗体DR
‑
Ab(2μM)预处理对油酸所诱导的质膜NKAα1的蛋白表达水平的减少的影响的定量结果(n＝4)。
[0029]图3C示出了在HepG2细胞，多克隆抗体DR
‑
Ab(2μM)预处理对油酸所诱导的总NKAα1
的蛋白表达水平的减少的影响的定量结果(n＝4)。
[0030]图3D示出了多克隆抗体DR
‑
Ab预处理恢复了油酸所降低的NKA活性(n＝6)。
[0031]图3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
ID NO：10所示的氨基酸组成。8.根据前述权利要求任一项所述的抗体，其特征在于，所述轻链恒定区包括或由SEQ ID NO：11所示的氨基酸组成。9.根据前述权利要求任一项所述的抗体，其特征在于，所述轻链包括或由SEQ ID NO：12所示的氨基酸组成。10.前述权利要求任一项所述的抗体在制备用于预防和/或治疗脂肪肝的药物或保健品中的用途。11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述脂肪肝是非酒精性脂肪性肝病。12.编码权利要求1
‑
9任一项所述抗体、其重链CDR1
‑
3或重链恒定区、其轻链CDR1
‑
3或轻链恒定区、其重链或轻链的多核苷酸，优选编码重链CDR1
‑
3、轻链CDR1
‑
3、重链可变区、重链恒定区、重链、轻链可...

【专利技术属性】
技术研发人员：卞劲松，孙海建，熊四平，聂晓伟，
申请(专利权)人：苏州工业园区新国大研究院，
类型：发明
国别省市：