一种miR-342-5p在制备防治下肢缺血性疾病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种miR

【技术实现步骤摘要】
一种miR
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342
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5p在制备防治下肢缺血性疾病的药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种miR
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5p在制备防治缺血性疾病的药物中的应用。

技术介绍

[0002]外周动脉性疾病(PAD)指的是由于各种原因导致的下肢动脉的狭窄或者闭塞、血流的灌注不足，进而导致供血组织的缺氧坏死，从而导致下肢出现一些间歇性跛行、溃疡或坏疽的疾病，目前基础研究中主要通过下肢缺血模型来模拟这种疾病的形成过程。
[0003]目前对于外周动脉性疾病的发病机制尚不明确，所以外周动脉性疾病主要是通过外科介入和药物治疗，但是手术本身具有创伤及清除不彻底的弊端，导致复发性高，不易治疗，而现有的药物具有起效慢、周期长，导致外周动脉性疾病的治疗停滞不前。
[0004]miRNA是一类内生的，长度约为21
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25个核苷酸的小的非编码RNA，能够参与细胞增殖、分化、凋亡等多种细胞行为，miRNA作为一类非常重要的生命活动调控因子，近年来发现，miRNA以外泌体包裹或者蛋白质结合的形式稳定的存在于血液及组织液中，因此可以作为循环标志物及治疗靶点参与多种缺血性疾病的治疗。但是由于目前技术的有限及对miRNA认识的局限，对于能够治疗缺血性疾病的miRNA如何精准靶向和递送损伤部位仍然是目前技术的壁垒，同时miRNA对缺血性疾病影响的作用机制尚不明确。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种miR
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5p在制备防治下肢缺血性疾病的药物中的应用，miR
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5p通过提高内皮细胞动脉化水平，从而促进血流灌注恢复进而改善下肢缺血，增强下肢肌肉的功能恢复。
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种miR
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5p在制备防治下肢缺血性疾病的药物中的应用。
[0007]优选的，所述的药物是具有减轻下肢缺血及血流灌注损失的药物。
[0008]优选的，所述的药物是具有降低血管密度以及增加内皮细胞动脉标志基因GJA4和α
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SMA水平的药物。
[0009]优选的，所述的药物是降低MYC蛋白的磷酸化水平，停滞细胞周期，促进内皮细胞的动脉化的药物；
[0010]优选的，所述的药物是降低内皮细胞中的EYA3的mRNA水平的药物。
[0011]本专利技术的第二个目的是提供一种miR
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5p作为靶点在制备防治下肢缺血性疾病的药物中的应用。
[0012]优选的，所述的药物是在基因水平和/或蛋白水平以miR
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5p作为药物靶点，调节其表达的药物。
[0013]优选的，所述的药物是协同和/或协助miR
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5p降低血管密度以及增加内皮细胞动脉标志基因GJA4和α
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SMA水平的药物。
[0014]优选的，所述的药物是协同和/或协助miR
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5p降低MYC蛋白的磷酸化水平的药物。
[0015]优选的，所述的药物是协同和/或协助miR
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5p降低内皮细胞中的EYA3的mRNA水平的药物。
[0016]本专利技术与现有技术相比，其有益效果在于：
[0017](1)miR
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5p能够显著改善肌肉组织中内皮细胞的功能，促进内皮细胞动脉化水平，从而促进血流灌注恢复进而改善下肢缺血，增强下肢肌肉的功能恢复，进一步丰富了治疗性血管形成的种类和发病机制，以期为外周动脉性疾病的治疗提供新的思路和靶点；
[0018](2)miR
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5p能够降低EYA3的mRNA及蛋白水平，直接靶向EYA3调控MYC的磷酸化水平，停滞细胞周期，促进内皮细胞的动脉化；
[0019](3)miR
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5p能够降低血管密度，增加内皮细胞动脉标志基因GJA4和α
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SMA水平，从而使得内皮细胞动脉化能力增加。
附图说明
[0020]图1为本专利技术实施例中的下肢缺血模型的构建图；其中：
[0021]图1(a)为小鼠麻醉后结扎右侧下肢股动脉后的实物图；图1(b)为小鼠结扎右侧下肢股动脉后荧光散斑成像仪下血流阻断图；
[0022]图2为小鼠结扎侧股动脉组和对照组股动脉组中miR
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5p表达量的统计结果图；
[0023]图3为小鼠股动脉结扎组与对照组和内皮细胞标志物CD31共定位的miR
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5p的定量结果图；
[0024]图4为构建后肢缺血模型及肌注miR
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5p的时间线图；
[0025]图5为小鼠实验组与对照组在不同时间段下的血流灌注情况图；
[0026]图6为小鼠实验组与对照组在不同区域的肌肉中动脉标志物GJA4的表达量的定量分析图；
[0027]图7为小鼠实验组与对照组在不同区域的肌肉中α
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SMA的表达量的定量分析图；
[0028]图8为qRT
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PCR对miR
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5p的模拟物mimic及空白对照组Ctrl的动脉标志物的检测结果图；
[0029]图9为通过western blotting对miR
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5p的模拟物mimic及空白对照组Ctrl的动脉标志物的检测结果图；
[0030]图10为masson染色后的实验组基质胶和对照组基质胶在共聚焦显微镜下的血管密度的观察图；
[0031]图11为图10的定量分析图；
[0032]图12为免疫荧光染色后的实验组基质胶和对照组基质的内皮细胞动脉化能力检测结果图；
[0033]图13为图12的定量分析图；
[0034]图14为免疫荧光染色后的实验组和对照组的视网膜动脉血管面积在共聚焦显微镜下的观察图；
[0035]图15为图14的定量分析图；
[0036]图16为对miR
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5p的模拟物mimic及空白对照组Ctrl中MYC的mRNA水平的检测结果图；
[0037]图17为对miR
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5p的模拟物mimic及空白对照组Ctrl中MYC的蛋白水平的检测结果图；
[0038]图18为miR
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种miR
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5p在制备防治下肢缺血性疾病的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物是具有减轻下肢缺血及血流灌注损失的药物。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物是具有降低血管密度以及增加内皮细胞动脉标志基因GJA4和α
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SMA水平的药物。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物是降低MYC蛋白的磷酸化水平，停滞细胞周期，促进内皮细胞的动脉化的药物。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物是降低内皮细胞中的EYA3的mRNA水平的药物。6.一种miR
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5p作为靶点在制备防治下肢缺血性疾病的药物中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：晏贤春，张小燕，孙嘉星，韩骅，梁亮，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：