一种多功能型豌豆多肽及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种多功能型豌豆多肽及其制备方法，属于功能多肽技术领域；包括利用超声辅助碱溶酸沉法提取豌豆分离蛋白；利用蒸汽爆破技术辅助酶解法制备豌豆多肽；利用化学法评价豌豆多肽功能活性。由本发明专利技术方法制备获得的豌豆多肽具有抗氧化、降血压、降血糖的功能；本发明专利技术中采用蒸汽爆破处理辅助酶解得到豌豆多肽，提高了豌豆多肽的上述功能，使DPPH自由基清除能力为92％、ABTS自由基清除能力为93％、O2‑

【技术实现步骤摘要】
一种多功能型豌豆多肽及其制备方法


[0001]本专利技术属于功能多肽
，具体涉及一种多功能型豌豆多肽及其制备方法。

技术介绍

[0002]豌豆是重要的植物蛋白来源，因其营养效益高、价格低廉，能实现大量制备，具有广阔的市场空间。此外，随着人们的膳食理念不断提升、替代蛋白相关研究的不断深入以及人们对环境的重视，豌豆分离蛋白市场需求进一步增长。豌豆分离蛋白通过酶解能够获得的生物活性多肽，不仅具有易吸收、安全、无副作用的优势，且已被报道具有多种功能活性，例如抗炎、抗氧化、调节免疫、降血糖等。
[0003]目前，酶解法普遍用于多肽的制备，越来越多的研究利用物理改性技术辅助酶解，来提高蛋白肽的得率及功能活性。例如，授权公告号为CN112626155B的专利公开了一种豌豆肽的制备方法，通过高压蒸汽灭菌的预处理使豌豆蛋白的结构展开，以用来辅助复合酶解，制备出来的豌豆肽粉的蛋白含量≥90％，肽得率达73％，但其通过高压蒸汽仅用来提高后续酶解反应，并未对豌豆多肽的功能特性进行研究。又如申请公布号为CN113197316A的一种双功能型豆源多肽及其制备方法，其通过红外热处理辅助酶解的方法得到同时具有降压活性和抗氧化活性双重功能的豆源多肽，其具有良好的乳化性和乳化稳定性，但其抗氧化性能有待进一步提高。
[0004]因此，亟需一种新的物理辅助酶解方法来制备豌豆多肽，用以进一步提高豌豆蛋白多肽的功能特性，如抗氧化、降血压、降血糖。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是：克服现有技术中存在的不足，提供一种抗氧化豌豆多肽的制备方法，利用蒸汽爆破辅助酶解的制备方法，从而获得更高的肽得率，并同时具有抗氧化、降血压、降血糖的功能特性。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：一种抗氧化豌豆多肽的制备方法，包括以下步骤：
[0007]S1、豌豆分离蛋白提取：豌豆原料粉碎过筛后溶于去离子水中，豌豆粉与水的料液比为1:15～35w/v，利用超声波技术辅助溶解，超声功率为100～500w，超声时间为10～30min，pH为8～10，而后使用碱溶酸沉法提取豆粉中的蛋白质，冻干得到豌豆分离蛋白粉；
[0008]S2、蒸汽爆破处理：将上述步骤S1中得到的豌豆分离蛋白粉加入蒸汽爆破试验台的汽爆缸中进行蒸汽爆破处理，蒸汽爆破时间为20～100s，汽爆压力为0.4～1.2MPa，冻干获得汽爆豌豆分离蛋白粉；
[0009]S3、豌豆多肽制备：将上述步骤S2中获得的汽爆豌豆蛋白粉溶于去离子水配置成底物浓度10％并调节pH，分别加入植物蛋白酶进行酶解反应，反应结束后高温灭酶，超滤分离制得＜3kDa分子量的超滤液，冻干得到豌豆活性多肽粉。
[0010]所述步骤S1中，优选的，豌豆粉与水的料液比为1:29w/v，超声功率为260w，超声时
间为27min，pH值为9.45。
[0011]所述步骤S2中，优选的，蒸汽爆破时间为40s，汽爆压力为1.0MPa。
[0012]所述步骤S1中，豌豆原料为富含蛋白质的中豌9号，豌豆磨粉过40～100目筛。
[0013]所述步骤S1中，所述碱溶酸沉法的具体步骤为：加热超声处理，用1.0mol/L氢氧化钠调节pH至8～10，期间不停搅动样品溶液，离心取上清液再用盐酸将pH调至2.5～5.5，上述步骤重复2～3次，将沉淀用去离子水洗涤至中性。
[0014]根据所述的制备方法制备得到多功能型豌豆多肽。
[0015]所述的多功能型豌豆多肽，对其测定的DPPH自由基清除率、ABTS
+
自由基清除率、O2‑
自由基清除率分别达到92％、93％、98％。
[0016]所述的多功能型豌豆多肽，对其测定的血管紧张素转移酶ACE抑制率达到68％。
[0017]所述的多功能型豌豆多肽，对其测定的α
‑
葡萄糖苷酶、α
‑
淀粉酶活性的抑制率分别为75％、71％。
[0018]本专利技术的有益效果是：
[0019]1)本专利技术中采用蒸汽爆破处理辅助酶解得到豌豆蛋白多肽，提高了豌豆多肽的抗氧化活性功能，使其达到DPPH自由基清除能力为92％、ABTS自由基清除能力为93％、O2‑
自由基清除能力为98％；血管紧张素转移酶ACE抑制率达到68％；α
‑
葡萄糖苷酶、α
‑
淀粉酶活性的抑制率分别为75％、71％；为豌豆多肽广泛应用于功能性食品或特殊膳食品中奠定基础。
[0020]2)目前蒸汽爆破技术在食品领域更多的应用于膳食纤维、食源多糖、植物多酚等的改性及功能活性的提高，而对于豌豆蛋白及多肽的改性及效果仍未有进一步研究，因此，利用蒸汽爆破技术辅助酶解制备豌豆蛋白肽，开创了蒸汽爆破技术的新应用，对于豌豆蛋白的深加工和综合利用奠定了理论基础。
[0021]3)本专利技术的制备方法中采用蒸汽爆破处理对蛋白质进行柔性热加工，破坏蛋白质分子间作用力，使其伸展，有助于疏水基团暴露，提高其酶解效率、便于生物活性物质的释放，对于预防和控制慢性非传染性疾病具有积极作用，具有应用于孕妇、老年人等慢病患者群体的潜力；可广泛应用于功能性食品或特殊膳食品中。
[0022]4)本专利技术方法的整体工艺可归纳为蛋白提取和蛋白酶解，操作过程简单易行，整个工艺流程绿色安全，对环境不产生污染；成本较低，可实现工业化规模生产，为开发植物基食品配料奠定基础。
附图说明
[0023]图1为本专利技术单因素实验中料液比、pH值、超声时间和超声功率对豌豆分离蛋白提取率影响的结果图；
[0024]图2为本专利技术响应面优化实验中四个因素对响应值的影响结果图；
[0025]图3为本专利技术单因素实验中汽爆压力和汽爆时间对豌豆多肽得率影响的结果图；
[0026]图4为正交优化实验中两个因素对蛋白多肽得率的影响结果图；
[0027]图5为本专利技术汽爆豌豆多肽对DPPH、ABTS
+
、O2‑
自由基清除率测定的结果图；
[0028]图6为本专利技术汽爆豌豆蛋白多肽对血管紧张素转移酶ACE、α
‑
葡萄糖苷酶、α
‑
淀粉酶活性抑制率测定的结果图。
具体实施方式
[0029]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步的解释说明。
[0030]以下实验中所采用的生物材料包括：碱性蛋白酶(CAS号：9014
‑
01
‑
1)和中性蛋白酶(CAS号：9068
‑
59
‑
1)购于索莱宝公司，酶活为2
×
105U/g。
[0031]豌豆分离蛋白提取：将200g豌豆放入粉碎机中，粉碎15～20s，使粉碎后的豌豆通过60目筛；将豌豆粉与去离子水充分混匀，再用1.0mol/L NaOH调节溶液至pH＝9，超声后分装在50mL离心管内，于4℃以8000
×
g离心20min；轻本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多功能型豌豆多肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、豌豆分离蛋白提取：豌豆原料粉碎过筛后溶于去离子水中，豌豆粉与水的料液比为1:15~35w/v，利用超声波技术辅助溶解，超声功率为100~500w，超声时间为10~30min，pH为8~10，而后使用碱溶酸沉法提取豆粉中的蛋白质，冻干得到豌豆分离蛋白粉；S2、蒸汽爆破处理：将上述步骤S1中得到的豌豆分离蛋白粉加入蒸汽爆破试验台的汽爆缸中进行蒸汽爆破处理，蒸汽爆破时间为20~100s，汽爆压力为0.4~1.2MPa，冻干获得汽爆豌豆分离蛋白粉；S3、豌豆多肽制备：将上述步骤S2中获得的汽爆豌豆蛋白粉溶于去离子水配置成底物浓度10%并调节pH，分别加入植物蛋白酶进行酶解反应，反应结束后高温灭酶，超滤分离制得＜3kDa分子量的超滤液，冻干得到豌豆活性多肽粉。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中，优选的，豌豆粉与水的料液比为1:29w/v，超声功率为260w，超声时间为27min，pH值为9.45。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，优选的，蒸汽爆破时间为40s，汽爆...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋莲军，李天歌，黄现青，张昱航，王田林，乔明武，赵秋艳，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：