长非编码RNADHRS4-AS1作为肝癌肿瘤标志物及治疗靶点制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及长非编码RNA DHRS4

【技术实现步骤摘要】
长非编码RNA DHRS4
‑
AS1作为肝癌肿瘤标志物及治疗靶点


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及长非编码RNA DHRS4
‑
AS1作为肝癌肿瘤标志物及治疗靶点。

技术介绍

[0002]肝细胞癌(HCC)是一种归因于脂肪性肝炎或病毒性肝炎的典型炎症相关癌症，约占原发性肝癌的90％，是东亚癌症相关死亡的第二大原因。据统计，HCC的5年生存率不到20％。HCC死亡率高的原因是因为HCC经常在晚期才被诊断出来，这时候已经丧失了手术切除和移植的机会。因此，寻找作为HCC早期诊断的标志物对于HCC患者获得早期诊断从而提高存活率具有显著意义。此外，HCC具有快速增殖的特点，这也是很多患者预后差的原因。因此，抑制HCC的快速增殖对于提高患者预后具有重要的意义。
[0003]长链非编码RNA(lncRNA)是长度超过200个核苷酸的缺乏编码蛋白质能力的RNA，最初被认为是无用的“暗物质”或“转录噪声”。然而，随着全基因组转录组学分析的发展，lncRNA被证明参与多种生物学活动，如细胞周期，细胞凋亡和细胞分化等。转移是影响HCC患者长期生存的主要因素。最近，越来越多的研究表明，lncRNA与HCC转移之间存在密切联系，lncRNA可以通过转录和转录后水平影响与HCC转移相关的分子。从这个意义上说，lncRNA可以为HCC患者提供潜在的诊断指标和治疗靶点。

技术实现思路

[0004]鉴于
技术介绍
存在的不足，本专利技术提供一种长非编码RNA DHRS4
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AS1作为肝癌肿瘤标志物及治疗靶点，用于解决IncRNA在HCC治疗方面空白的问题。
[0005]本专利技术涉及为一种肝细胞癌生物标记物，lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因，或，lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因。
[0006]本专利技术还提供一种上述的肝细胞癌生物标记物在制备肝细胞癌早期筛查或辅助诊断试剂中的应用。
[0007]本专利技术还提供了一种肝细胞癌早期筛查或辅助诊断试剂，包括：
[0008]特异性识别lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因的寡核苷酸探针；
[0009]或，特异性扩增lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因的引物；
[0010]或，特异性结合lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因的引物的表达产物的抗体或配体。
[0011]本专利技术还提供一种肝细胞癌早期筛查或辅助诊断试剂盒，其特征在于，含有如上述的肝细胞癌早期筛查或辅助诊断试剂。
[0012]本专利技术还提供了如上述的肝细胞生物标记物在制备肝细胞癌预后预测试剂中的应用。
[0013]本专利技术还提供一种肝细胞癌化疗敏感性增强试剂，包括lncRNA DHRS4
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AS1表达促进剂，或者，miR
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224
‑
3p抑制剂或沉默剂。
[0014]本专利技术还提供一种治疗肿瘤的药物，包括lncRNA DHRS4
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AS1表达促进剂，或者，miR
‑
224
‑
3p抑制剂或沉默剂。
[0015]进一步的，还包括促进lncRNA DHRS4
‑
AS1表达的试剂或载体，或者，抑制miR
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224
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3p表达的试剂或载体。
[0016]本专利技术还提供了长非编码RNA DHRS4
‑
AS1作为肝癌肿瘤的治疗靶点的应用。
[0017]本专利技术还提供了lncRNA DHRS4
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AS1和miR
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224
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3p的联合使用在制备或筛选治疗肿瘤药物中的应用。
[0018]本专利技术的主要有益效果：
[0019]本专利技术提供了长非编码RNA DHRS4
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AS1以及靶miRNA miR
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224
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3p作为肝癌诊断及治疗靶点的依据，具体来说，DHRS4
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AS1在肝癌患者中低表达，miR
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224
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3p在肝癌患者中高表达，DHRS4
‑
AS1过表达抑制了肝癌细胞增殖，促进了肝癌细胞的凋亡，因此可能成为肝癌基因治疗的重要靶点。
附图说明
[0020]图1：LncRNA DHRS4
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AS1在肝癌组织和细胞系中的表达；
[0021]图2：DHRS4
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AS1过表达质粒的转染效率和DHRS4
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AS1过表达对肝癌细胞活力的影响；
[0022]图3：DHRS4
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AS1过表达对肝癌细胞克隆形成和凋亡的影响；
[0023]图4：DHRS4
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AS1与miR
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224
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3p的靶向关系；
[0024]图5：MiR
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224
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3p在肝癌组织中的表达。
具体实施方式
[0025]以下将结合本专利技术的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述和讨论，显然，这里所描述的仅仅是本专利技术的一部分实例，并不是全部的实例，基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术的保护范围。
[0026]为了便于对本专利技术实施例的理解，下面将结合附图以具体实施例为例作进一步的解释说明，且各个实施例不构成对本专利技术实施例的限定。
[0027]本专利技术的实施例1，关于LncRNA DHRS4
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AS1在肝癌中的表达，具体实验步骤如下：
[0028](1)、DHRS4
‑
AS1在肝癌患者中低表达：
[0029]用匀浆器研磨组织，然后使用Trizol试剂从组织中提取总RNA。使用商用的反转录试剂盒合成cDNA，然后通过SYBR
TM
Green Master Mix进行实时定量PCR。条件如下：95℃预变性2分钟，然后是95℃ 15秒和60℃ 1分钟，共40个循环。引物序列见表1。GAPDH为内源对照，数据采用2
‑
ΔΔCT
法定量。
[0030]结果如图1A所示，DHRS4
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AS1在肝癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织中的表达水平。
[0031](2)、DHRS4
‑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝细胞癌生物标记物，其特征在于，为lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因，或，lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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3p基因。2.如权利要求1所述的肝细胞癌生物标记物在制备肝细胞癌早期筛查或辅助诊断试剂中的应用。3.一种肝细胞癌早期筛查或辅助诊断试剂，其特征在于，包括：特异性识别lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因的寡核苷酸探针；或，特异性扩增lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因的引物；或，特异性结合lncRNA DHRS4
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AS1或miR
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224
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3p基因的引物的表达产物的抗体或配体。4.一种肝细胞癌早期筛查或辅助诊断试剂盒，其特征在于，含有如权利要求3所述的肝细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴晓凤，游凡，孙慧，
申请(专利权)人：浙江百越生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：