特异性识别肿瘤的核酸适体及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种特异性识别肿瘤的核酸适体及其用途，属于生物技术领域，该核酸适体包括如SEQ ID NO.21、23、25、26、28、30、35和38所示序列中的至少一种。本发明专利技术核酸适体利用体外指数富集的配体系统进化技术经过多轮筛选得到，亲和性良好，能够准确识别肿瘤。并且本发明专利技术核酸适体具备免疫原性低、易于修饰标记、性质稳定且重现性好、相较于抗体，稳定性良好，合成成本低的特点。同时本发明专利技术核酸适体可作为高效且穿透力强的分子探针工具用于肿瘤的早期诊断，也可结合药物进行肿瘤靶向治疗。也可结合药物进行肿瘤靶向治疗。也可结合药物进行肿瘤靶向治疗。

【技术实现步骤摘要】
特异性识别肿瘤的核酸适体及其用途


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及特异性识别肿瘤的核酸适体及其用途。

技术介绍

[0002]结直肠癌（Colorectal Cancer，CRC）是世界范围内第二大癌症，同时也是癌症死亡的主要原因之一。CRC的基础治疗包括手术治疗、辅助放化疗，靶向治疗。虽然治疗方式多种，但是CRC的耐药是患者死亡的主要原因。有研究报道，CRC的肿瘤辅助化疗耐药是造成IV期CRC患者生存率不足10%的重要原因之一。CRC患者的预后与病理分期、部位、组织类型、以及治疗方案均关系密切。个体精准化治疗、降低治疗成本、提高生存质量将成为改善CRC患者预后亟待解决的重要问题。
[0003]在所有恶性肿瘤中，胃癌（Gastric Cancer，GC）发病率和死亡率均居消化系统恶性肿瘤的首位，目前临床诊断中多为症状性筛选，即出现腹部不适、嗳气或消瘦、黑便等症状后进行内镜、胃钡餐等检查，最终检出的胃癌绝大部分为进展期胃癌。胃癌的治疗同样困难重重。
[0004]核酸适体（Aptamer）是一种可以特异性地与靶标结合的单链核苷酸（DNA或RNA分子），分子量小，易设计合成，可折叠形成特定构象特异性结合生物靶标，也因此被美誉为“化学抗体”。通过以活细胞为靶标的体外指数富集的配体系统进化技术（Cell
‑
SELEX）能够有效从大量随机文库中筛选得到特异性识别靶标的核酸适体。核酸适体具备合成简单、易修饰、化学性质稳定、免疫原性低、成本低廉等优点，可作为良好的发新型高效稳定的分子探针，在肿瘤的早期诊断和精准靶向治疗、药物治疗以及生物化学传感等领域极具前景。
[0005]利用CELL
‑
SELEX的优势，发现CRC以及GC中新的标志物及特异性的核酸适体，可结合临床样本（组织、血液）对肿瘤的不同特征进行分析，对开发CRC诊断和治疗的方案具有重要意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种能够特异性识别肿瘤的核酸适体，尤其是能够特异性识别结直肠癌或胃癌的核酸适体。
[0007]为达到上述专利技术目的，采用如下技术方案。
[0008]一种能够特异性识别肿瘤的核酸适体，核酸适体序列如包括如SEQ ID NO.21、23、25、26、28、30、35和38所示的至少一个序列：SEQ ID NO.21：TGTACGGCTTACTCTGATTGTTGAGTGAGTAGCTATGCCACCGGGA；SEQ ID NO.23：TCAGTATACCCGGGATTGGGGTGAAGCGTTTATGGACTTCCTAGGTTGCTCTAGAGTACTGA；SEQ ID NO.25：TAGGGGACAGCTGCGCCGTCGGGGCCCTTGCGGTTGTACGATCCC；
SEQ ID NO.26：TCGGCGACAGCTGCGCCGCCGGGAGTTTTAAAAGGTACGGTCACCAT；SEQ ID NO.28：TCATATTGGGGACGGTGTAGTCCATAACTAAAGCAGTCTGGTGGACATTTTAGAGTATGA；SEQ ID NO.30：TCTCGACTGCTGCGCCGCCGGGATCAATAAGTGTACGGTCAGAGTAGTGAGTCGAG；SEQ ID NO.35：TGACTCTTACGGGGGATATGGGGGCCCT；SEQ ID NO.36：AGTCAGTATGTGGTGTAACATACTGCTCAAGCAGACGAATTCGTCATTTGAGCT。
[0009]优选地，上述肿瘤包括前列腺癌、胆囊癌、肝内胆道癌、胆道癌、口腔癌、咽癌、喉癌、舌癌、十二指肠癌、眼部肿瘤、纵隔癌、鼻窦癌、肾盂癌、心脏癌、胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、肝癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、乳腺癌、肺癌、皮肤或眼内恶性黑色素瘤、肾癌、子宫癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、肛门区癌、结直肠癌、胃癌、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、儿童期癌症、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统癌、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱癌、脑干胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性髓细胞性淋巴瘤、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、免疫大细胞淋巴瘤、祖代B淋巴母细胞性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、急性淋巴母细胞性淋巴瘤、蕈样肉芽肿、间变性大细胞淋巴瘤、急性髓细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、肝母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、腹膜癌、脑瘤、胸腺癌、T细胞淋巴瘤或前体T淋巴母细胞性淋巴瘤。更优选地，上述肿瘤包括结直肠癌或胃癌。
[0010]优选地，上述核酸适体由下列核酸适体经过截短或突变得到：SEQ ID NO.1：AGACCGAGCTGAGTCAGTATTGGGGACGGTGTAGTCCATAACTAAAGCAGTCTGGTGGACATTTTAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO.2：AGACCGAGCTGAGTCAGTATCTCGACTGCTGCGCCGCCGGGATCAATAAGTGTACGGTCAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO.3：AGACCGAGCTGAGTCAGTATGACTCTTACGGGGGATATGGGGGCCCTGTTCGGTTCAAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO.4：AGACCGAGCTGAGTCAGTATTGTACGGCTTACTCTGATTGTTGAGTGAGTAGCTATGCCACCGGGAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO.5：AGACCGAGCTGAGTCAGTATGTGGTGTAACATACTGCTCAAGCAGACGAATTCGTCATTTGAGCTAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；
SEQ ID NO.6：AGACCGAGCTGAGTCAGTATTCATCGACCGCGAAGTGTGAAGGACCGTCCCTCTTGTAGATCACTAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO.7：AGACCGAGCTGAGTCAGTATGATCTGTGACACGGTGTTCACCCAGGCCGACAGCGAGGGATGTAAAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO.8：AGACCGAGCTGAGTCAGTATTGTACGACTTCCTCATGTCCCACGGGAAGCAGCCGTGCCATCGGGAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO.9：AGACCGAGCTGAGTCAGTATACCCGGGATTGGGGTGAAGCGTTTATGGACTTCCTAGGTTGCTCTAGAGTAGTGAGTGCGAGAAC；SEQ ID NO本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性识别肿瘤的核酸适体，其特征在于，所述核酸适体包括如SEQ ID NO. 21、23、25、26、28、30、35和38所示序列中的至少一种。2.如权利要求1所述的核酸适体，其特征在于，所述核酸适体还包括以下至少一种：（1）对所述的核酸适体进行修饰得到的序列；（2）对所述的核酸适体进行偶联改造得到的序列；（3）将所述的核酸适体删除或增加一个或几个核苷酸，得到与所述的核酸适体具有相同功能的序列。3.如权利要求2所述的核酸适体，其特征在于，所述修饰包括以下修饰方法的至少一种：（1）磷酸化；（2）甲基化；（3）氨基化；（4）巯基化；（5）同位素化；（6）氟化；（7）用硫取代氧；（8）用硒取代氧。4.如权利要求2所述的核酸适体，其特征在于，所述偶联改造包括以下改造方法的至少一种：（1）在核酸适体上连接荧光标记物；（2）在核酸适体上连接放射性物质；（3）在核酸适体上连接治疗性物质；（4）在核酸适体上连接生物素；（5）在核酸适体上连接生物酶；（6）在核酸适体上连接纳米材料；（7）在核酸适体上连接小肽；（8）在核酸适体上连接siRNA；（9）在核酸适体上连接微米材料；（10）在核酸适体上连接细胞和/或囊泡。5.一种特异性识别肿瘤的核酸适体衍生物，其特征在于，所述衍生物包括以下至少一种：（1）由权利要求1所述的核酸适体骨架衍生出的硫代磷酸酯骨架序列；（2）由权利要求1所述的核酸适体修饰成的肽核酸序列。6.权利要求1或2所述核酸适体或权利要求5所述的核酸适体的衍生物的用途，包括以下至少一种：（1）在制备特异性识别肿瘤的试剂中的用途；（2）在制备特异性识别肿瘤血浆中外泌体的试剂中的用途（3）在制备定性或定量检测肿瘤的试剂中的用途；（4）在制备定性或定量肿瘤血浆中外泌体的试剂中的用途；（5）在制备肿瘤细胞拮抗剂中的用途；（6）在制备肿瘤血浆中外泌体拮抗剂中的用途；（7）在制备肿瘤细胞成像剂中的用途；（8）在制备肿瘤血浆中外泌体成像剂中的用途；（9）在制备抑制或逆转肿瘤耐药的药物中的用途；（10）作为药物载体的用途。
7.一种药物成...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭蔚泓，王贵玉，邴涛，吴宏宇，王猛，
申请(专利权)人：中国科学院基础医学与肿瘤研究所筹，
类型：发明
国别省市：