一种代谢工程改造大肠杆菌及其在发酵制备酪醇中的应用制造技术

本发明专利技术以大肠杆菌W3110为底盘细胞，通过代谢改造，得到L

【技术实现步骤摘要】
一种代谢工程改造大肠杆菌及其在发酵制备酪醇中的应用


[0001]本专利技术涉及一种代谢工程改造大肠杆菌发酵制备酪醇的方法，属于生物


技术介绍

[0002]酪醇(4
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羟基苯乙醇，Tyrosol，C8H
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O2)是一种天然多酚，是苯乙醇的一种衍生物。主要存在于女贞和橄榄油中，具有抗氧化、抗癌、抗抑郁、抗骨质疏松、抗炎、心脏保护和神经保护等多种药理作用。其需求量与日俱增。目前主要有三种不同的方法已被用于生产酪醇，包括直接从植物或细胞组织培养物中提取、化学合成法、微生物合成法。植物来源中酪醇的丰度低，提取过程复杂，导致产能相对较低，成本较高。另一方面，化学方法需要相对极端的反应条件，可能会造成严重的环境污染。微生物法合成酪醇因具有周期短和易调控等特点更有优势。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种通过代谢改造得到无质粒高产L
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酪氨酸菌株，并以此为基础通过重组外源基因，获得能够生产酪醇的基因工程菌。该基因工程菌能够高产量生产酪醇。<br/>[0004]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基因工程菌WTY8，其特征在于：所述基因工程菌WTY8是对大肠杆菌W3110进行如下改造获得的：敲除tyrR基因、pykF基因、trpD基因和pheA基因；将galP基因的启动子、glk基因的启动子、ppsA基因的启动子和tyrA基因的启动子分别替换为trc启动子；将编码如SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的tyrA基因突变为编码如SEQ ID NO:4所示氨基酸序列的tyrA
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基因。2.如权利要求1所述的基因工程菌WTY8，其特征在于所述改造利用CRISPR/Cas9技术进行。3.如权利要求1所述的基因工程菌WTY8在生产酪氨酸中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述应用为：将所述基因工程菌WTY8接种于LB液体培养基，37℃、180rpm培养12h，得到种子液；所述种子液按1％的体积接种量接入到新鲜LB液体培养基，37℃、180rpm培养，当OD600＝0.8时，加入终浓度为0.1mM IPTG，20℃、180rpm条件下，诱导培养14h；将所得诱导后菌液离心，所得湿菌体转入发酵培养基中，30℃，180rpm培养48h，得到L
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酪氨酸。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于：所述新鲜LB液体培养基与所述发酵培养基的体积比为1:1
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2。6.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳志强，姜梦超，赵嫚，金黎媛，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：