一种老年痴呆症小鼠模型的构建方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种老年痴呆症小鼠模型的构建方法，包括：S1.采用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的方式，在Rosa26基因位点插入CAG

【技术实现步骤摘要】
一种老年痴呆症小鼠模型的构建方法及其应用


[0001]本专利技术属于动物模型构建
，尤其涉及一种老年痴呆症小鼠模型的构建方法及其应用。

技术介绍

[0002]人巨细胞病毒(HCMV)属于疱疹病毒β亚科，为线状双链DNA病毒，在人群中感染率高达100％，具有潜伏感染的生物学特性。即刻早期蛋白2(IE2，又称UL122)是HCMV感染后最先表达的基因之一，作为转录因子，能够转录和激活其他病毒相关基因的表达。研究发现，IE2蛋白通过神经干细胞维持失调和迁移神经元的极化来干扰大脑发育。
[0003]由于中枢神经系统对HCMV普遍易感，感染后的中枢神经系统对HCMV感染的促炎反应可能是慢性神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)的一个促进因素。
[0004]阿尔茨海默病(AD)是一种隐匿的进行性神经退行性疾病，其特征是进行性记忆丧失和认知障碍(学习和记忆功能受损)，淀粉样蛋白β(Aβ)斑块沉积，神经元内形成神经原纤维缠结和神经炎症。
[0005]我国现有1000多万阿尔茨海默患者，是患者数量最多的国家。据2020年发布的《中国阿尔茨本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种老年痴呆症小鼠模型的构建方法，其中，所述小鼠模型具有IE2蛋白表达的大脑组织特异性，所述构建方法包括：S1.构建条件性IE2过表达的转基因小鼠：采用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的方式，在Rosa26基因位点插入CAG
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LSL
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IE2
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WPRE
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pA表达框，构建IE2转基因的F1代小鼠；S2.构建大脑组织特异性表达IE2蛋白的小鼠：将所述F1代小鼠与CamkII
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cre小鼠交配获得F2代小鼠，并对所述F2代小鼠进行表型筛选，获得大脑组织特异性表达IE2蛋白的小鼠，即所述老年痴呆症小鼠模型。2.根据权利要求1所述的老年痴呆症小鼠模型的构建方法，其中，所述小鼠模型的海马与大脑皮层中Aβ和P
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tau蛋白表达水平升高。3.根据权利要求1所述的老年痴呆症小鼠模型的构建方法，其中，所述步骤S1包括以下步骤：S1
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1.通过体外转录的方式，获得Cas9 mRNA和gRNA，其中，所述gRNA的基因序列如SEQ ID NO：1所示；S1
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2.通过In
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Fusion cloning的方法构建同源重组载体donor vector；S1
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3.将...

【专利技术属性】
技术研发人员：王斌，王志飞，张现娟，王韵阳，刘俸君，南福龙，于猛，
申请(专利权)人：青岛万明赛伯药业有限公司，
类型：发明
国别省市：