用于检测Aβ聚集体的荧光探针及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种用于检测Aβ聚集体的荧光探针及其制备方法和应用。具体地，所述探针的结构如式I所示。本发明专利技术提供的Aβ聚集体探针具有多种用途，可用于体外、生物组织切片的Aβ聚集体的识别检测，用于生物组织中β

【技术实现步骤摘要】
用于检测A
β
聚集体的荧光探针及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一类用于检测Aβ聚集体的荧光探针及其制备方法和应用，具体来说，涉及在检测Aβ聚集体的生物用途，尤其是作为一种阿尔茨海默病病理标志物的检测工具分子方面的应用。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)，占痴呆症患者总数的70％左右，是一种年龄高度相关的、以进行性认知功能障碍和记忆力损害为主的中枢神经系统退行性疾病。AD目前公认的病理特征为神经细胞外错误折叠的β
‑
淀粉样蛋白斑块和细胞内tau蛋白纠结。近年来全球各大生物医药公司投入大量人力物力研发抗AD新药，由于AD致病机制复杂，抗AD药物的研发均以失败告终。尽管针对AD的基础研究开展迅速，但是临床上尚无针对AD的特效药，现有的治疗方案主要针对AD主要表现的认知和记忆障碍，以缓解患者症状为主。迄今为止，AD仍是一种临床未满足的重大疾病，迫切需要研发新的治疗药物与诊断方法。
[0003]针对AD机制假说理论有很多，到目前为止可以确认的是，β
‑
淀粉样蛋白聚集体(Amyloidβ，Aβ)的过度产生、异常聚集形成的老年斑是阿尔茨海默病最主要的病理标志物，是AD病理的中心环节以及多种因素导致AD发生发展的共同通路。而在目前针对AD的疾病与药物研究中，Aβ病理变化是AD患者早期诊断以及用于临床药物药效评估的重要生物标志物。AD患者确诊多为晚期，因此提高AD的检测诊断水平对于AD的早期诊断治疗和对其发病机制的研究都具有重要意义。
[0004]荧光探针相较于老牌放射性探针等技术相比，具有快速、廉价、高灵敏度、无侵入性、创新可视化和较高空间分辨率等显著优点，是新时代生物医学研究和临床研究中针对特定分子靶标的可视化与量化评估的创新型有利途径。目前AD上的荧光探针通常用于检测Aβ和tau蛋白，已报道的探针分子众多，但依旧缺乏灵敏度高，结合力强，发射波长较长，理化性质优良的探针分子。
[0005]因此，研发具有特异性高亲和力的Aβ荧光探针分子十分引人关注。结合Aβ荧光探针和分子成像，生物组织成像，活体荧光成像等技术后，可实现实时，无创伤的Aβ斑块造影，追踪和检测。进而方便AD的临床前和临床领域的疾病以及药物研究的开展。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一类靶向Aβ聚集体的荧光探针、其制备方法，以及其在AD相关的研究中针对Aβ这一病理标志物的检测、成像等用途。
[0007]本专利技术第一方面，提供了一种荧光探针，所述荧光探针为式I化合物：
[0008][0009]其中，
[0010]X选自O或NH；且
[0011]R选自CN或C1‑
C6烷基OC(＝O)
‑
。
[0012]在另一优选例中，X选自O或NH。
[0013]在另一优选例中，R选自CN或C1‑
C3烷基OC(＝O)
‑
。
[0014]在另一优选例中，R选自CN或CH3CH2OC(＝O)
‑
。
[0015]在另一优选例中，所述式I化合物选自下组：
[0016][0017]本专利技术第二方面，提供了如本专利技术第一方面所述的荧光探针在制备检测Aβ聚集体的荧光探针试剂中的应用。
[0018]在另一优选例中，所述荧光探针试剂可用于抗AD药物研发和/或病理机制揭示。
[0019]在另一优选例中，所述检测为Aβ聚集体荧光成像。
[0020]本专利技术第三方面，提供了一种Aβ聚集体荧光检测试剂盒，其包括如本专利技术第一方面所述的荧光探针，和任选的说明书。
[0021]本专利技术第四方面，提供了如本专利技术第一方面所述的荧光探针在制备阿尔茨海默病诊断试剂中的应用。
[0022]在另一优选例中，所述诊断试剂用于诊断早期阿尔茨海默病。
[0023]本专利技术第五方面，提供了一种阿尔茨海默病诊断试剂盒，其特征在于，其包括本专利技术第一方面所述的荧光探针，和任选的说明书。
[0024]本专利技术第六方面，提供了一种Aβ聚集体体外荧光检测的方法，包括步骤：
[0025](1)将待测样品与本专利技术第一方面所述荧光探针的溶液接触，使样品染色；和
[0026](2)将染色后的样品用于荧光检测。
[0027]在另一优选例中，所述待测样品为生物组织切片或体液样品，如脑组织切片。
[0028]在另一优选例中，所述荧光检测为生物组织切片的荧光成像。
[0029]在另一优选例中，所述待测样品来自哺乳动物，如人、大鼠或小鼠。
[0030]在另一优选例中，步骤(2)中，所述荧光检测的激发波长为405nm
±
10nm(如
±
5nm或
±
2nm)，550
–
650nm范围检测荧光。
[0031]本专利技术第六方面，提供了一种阿尔茨海默病的诊断方法，包括步骤：
[0032](1)将来自一检测对象的待测样品与本专利技术第一方面所述荧光探针的溶液接触，使样品染色；和
[0033](2)将染色后的样品用于荧光检测。
[0034]在另一优选例中，所述待测样品为生物组织切片或体液样品，如脑组织切片。
[0035]在另一优选例中，所述荧光检测为生物组织切片的荧光成像。
[0036]在另一优选例中，所述检测对象为哺乳动物，如人、大鼠或小鼠。
[0037]在另一优选例中，步骤(2)中，所述荧光检测的激发波长为405nm
±
10nm(如
±
5nm或
±
2nm)，550
–
650nm范围检测荧光。
[0038]在另一优选例中，所述方法还包括步骤：将步骤(2)的检测结果与阳性对照或阴性对照样品的检测结果进行比较，从而判断所述检测对象是否患有阿尔茨海默病。
[0039]应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
[0040]图1是本专利技术优选探针KAD0202、KAD0240和KAD0242的紫外吸收与荧光发射光谱图；
[0041]图2是是本专利技术优选探针KAD0202、KAD0240和KAD0242的Aβ聚集体蛋白亲和力测定曲线；
[0042]图3是本专利技术优选探针的单、双光子共聚焦脑片成像结果。
具体实施方式
[0043]本专利技术人经过广泛而深入的研究，通过大量筛选和测试，提供了一类Aβ聚集体荧光探针。本专利技术提供的Aβ聚集体探针具有多种用途，可用于体外、生物组织切片的Aβ聚集体的识别检测，其识别Aβ后激发波长位于红光范围(550
‑
650nm)接近近红外，探针本身具有双光子特性，可用近红外光激发。该荧光探针可用于生物组织中β本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种荧光探针，其特征在于，所述荧光探针为式I化合物：其中，X选自O或NH；且R选自CN或C1‑
C6烷基OC(＝O)
‑
。2.如权利要求1所述的荧光探针，其特征在于，X选自O或NH。3.如权利要求1所述的荧光探针，其特征在于，R选自CN或C1‑
C3烷基OC(＝O)
‑
。4.如权利要求1所述的荧光探针，其特征在于，所述式I化合物选自下组：5.如权利要求1所述的荧光探针在制备检测Aβ聚集体的荧光探针试剂中的应用。6.一种Aβ聚集...

【专利技术属性】
技术研发人员：李剑，李晓康，游浩澜，潘诗祺，邱晓宇，董志文，朱怡萱，毛斐，徐以香，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：