一种心肌肌钙蛋白I保存液制造技术

本申请公开了一种心肌肌钙蛋白I保存液，以水为溶剂，包括以下组分：缓冲盐；蛋白质；表面活性剂；无机盐；防腐剂；保护剂；其中，保护剂为三(2

【技术实现步骤摘要】
一种心肌肌钙蛋白I保存液


[0001]本申请涉及生物试剂
，特别是涉及一种心肌肌钙蛋白I保存液。

技术介绍

[0002]在化学发光试剂盒开发过程中，企业参考品是成品检验、出厂检验、过程检验中试剂性能评估必不可少的部分。企业参考品的稳定性直接决定试剂性能评估的可信度。另外发光试剂盒的检测需要与其校准品和质控品配套使用，校准品和质控品的稳定性直接决定测试结果的真实性和准确性。在整个产品中有着重要的地位。
[0003]心肌肌钙蛋白(cardiac troponin，cTn)是心肌肌肉收缩的调节蛋白。cTn是由三种不同基因的亚基组成：心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)。
[0004]目前，心肌肌钙蛋白I(cTnI)常用的企业参考品、校准品和质控品的保存液包括人源和动物源血清基质，往往存在一定的生物风险，且不同批次的人源和动物源血清基质存在批间差不可控的情况，给试剂盒开发过程带来了诸多不便。

技术实现思路

[0005]为解决上述技术问题，本专利技术的目的为提供一种心肌肌钙蛋白I保存液；本申请提供的心肌肌钙蛋白I保存液，对心肌肌钙蛋白I(cTnI)抗原有较好的稳定作用，并且具有组分简单、过程易控制、单独放置稳定性良好、成本低廉、不涉及生物风险等优点。
[0006]本专利技术提供的技术方案如下：
[0007]一种心肌肌钙蛋白I保存液，以水为溶剂，包括以下组分：
[0008]缓冲盐；
[0009]蛋白质；
[0010]表面活性剂；
[0011]无机盐；
[0012]防腐剂；
[0013]保护剂；其中，保护剂为三(2
‑
氯乙基)磷酸酯。
[0014]优选地，包括以下组分：
[0015]缓冲盐20
‑
100mmol/L；
[0016]蛋白质10
‑
60g/L；
[0017]表面活性剂0.5
‑
5g/L；
[0018]无机盐0.1
‑
0.5mol/L；
[0019]防腐剂0.5
‑
5g/L；
[0020]保护剂0.1％
‑
5％；
[0021]保存液的pH为6.0
‑
8.0。
[0022]优选地，缓冲盐为Tris、MES、MOPS、HEPES中的任意一种；
[0023]缓冲盐浓度为50
‑
60mmol/L。
[0024]优选地，当缓冲盐使用MES时，保存液pH为6.0
‑
6.5；
[0025]当缓冲盐选择Tris、MOPS或HEPES时，保存液pH为7.0
‑
7.5。
[0026]优选地，蛋白质为牛血清白蛋白、酪蛋白、明胶蛋白任意一种。
[0027]优选地，蛋白质使用牛血清白蛋白，浓度为50
‑
60g/L。
[0028]优选地，表面活性剂为曲拉通x
‑
100、Brij
‑
35、吐温20、吐温80任意一种；
[0029]表面活性剂的浓度优选为1
‑
2g/L。
[0030]优选地，无机盐为氯化钠或氯化钾中的任意一种；
[0031]无机盐的浓度为0.15
‑
0.25mol/L。
[0032]优选地，防腐剂为叠氮钠、PC300、氯霉素、庆大霉素中的任意一种或多种。
[0033]优选地，防腐剂为叠氮钠和PC300的组合，叠氮钠、PC300的浓度分别为1
‑
1.2g/L。
[0034]本申请提供一种心肌肌钙蛋白I保存液，使用三(2
‑
氯乙基)磷酸酯作为保护剂，能够显著提升心肌肌钙蛋白I(cTnI)抗原在保存液中的稳定性，无需添加糖、醇、酯类等保护剂，无需使用人源或动物源的血清基质，降低生物风险；同时该保存液配方组分简单、廉价易得，批间差易控制、便于大批量生产。
[0035]本申请所用的三(2
‑
氯乙基)磷酸酯，或者称为磷酸三氯乙酯，CAS No.：115
‑
96
‑
8；英文全称为：Tris(2
‑
chloroethyl)phosphate(TCEP)，常见的用途主要用于聚氨酯泡沫阻燃以及聚氯乙烯阻燃增塑，暂未见其用于稳定cTnI的报道。本申请创造性的使用三(2
‑
氯乙基)磷酸酯作为稳定剂，替代常规的糖、醇、酯类等保护剂，并且无需使用人源或动物源的血清基质。
[0036]本申请提供的配方中，保护剂用量0.1％
‑
5％，是指保护剂的质量百分比为0.1％
‑
5％。
[0037]本申请提供的心肌肌钙蛋白I保存液制备方法，在水中加入缓冲盐并调整pH后，对于其他原料的加入顺序没有特殊要求，可以一起加入也可以分别加入。
具体实施方式
[0038]为了使本领域的技术人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
[0039]实施例1
[0040]一种心肌肌钙蛋白I保存液，以纯水为溶剂，包括以下组分：
[0041]缓冲盐MES 20mmol/L；
[0042]蛋白质BSA 10g/L；
[0043]表面活性剂吐温20 0.5g/L；
[0044]无机盐NaCl 0.1mol/L；
[0045]防腐剂PC300 0.5g/L；
[0046]保护剂三(2
‑
氯乙基)磷酸酯0.1％。
[0047]制备方法如下：
[0048]将上述缓冲盐加入到水中，并调节pH至6.0；
[0049]向水中加入上述无机盐，混匀；
[0050]向水中加入上述蛋白质，混匀；
[0051]向水中加入上述表面活性剂，混匀；
[0052]向水中加入上述保护剂，混匀；
[0053]定容过滤。
[0054]实施例2
[0055]一种心肌肌钙蛋白I保存液，以纯水为溶剂，包括以下组分：
[0056]缓冲盐MES 100mmol/L；
[0057]蛋白质BSA 60g/L；
[0058]表面活性剂吐温20 5g/L；
[0059]无机盐NaCl 0.5mol/L；
[0060]防腐剂PC300 5g/L；
[0061]保护剂三(2
‑
氯乙基)磷酸酯5％。
[0062]制备方法与实施例1相同，只是将上述缓冲盐加入到水中后，调节本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种心肌肌钙蛋白I保存液，以水为溶剂，其特征在于，包括以下组分：缓冲盐；蛋白质；表面活性剂；无机盐；防腐剂；保护剂；其中，保护剂为三(2
‑
氯乙基)磷酸酯。2.根据权利要求1所述的心肌肌钙蛋白I保存液，其特征在于，包括以下组分：缓冲盐20
‑
100mmol/L；蛋白质10
‑
60g/L；表面活性剂0.5
‑
5g/L；无机盐0.1
‑
0.5mol/L；防腐剂0.5
‑
5g/L；保护剂0.1％
‑
5％；保存液的pH为6.0
‑
8.0。3.根据权利要求1
‑
2中任一项所述的心肌肌钙蛋白I保存液，其特征在于，缓冲盐为Tris、MES、MOPS、HEPES中的任意一种；缓冲盐浓度为50
‑
60mmol/L。4.根据权利要求3所述的心肌肌钙蛋白I保存液，其特征在于，当缓冲盐使用MES时，保存液pH为6.0
‑
6.5；当缓冲盐选择Tris、MOPS...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛善检，徐明，
申请(专利权)人：三诺生物传感股份有限公司，
类型：发明
国别省市：