【技术实现步骤摘要】
表达IBRV
‑
gD和BVDV
‑
E2的重组杆状病毒表达系统、构建方法及应用
[0001]本专利技术属于生物领域,特别涉及一种牛传染性鼻气管炎gD和牛病毒性腹泻E2蛋白二联亚单位疫苗及其在杆状病毒表达系统中高效表达方法。
技术介绍
[0002]牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)引起的牛的接触性传染病。IBRV主要侵害牛的呼吸系统、生殖系统和神经系统,具体表现为高热、流鼻液、公牛龟头包皮炎、孕畜流产和幼牛脑膜炎等。IBRV可感染不同年龄阶段的牛,感染IBRV后的牛多转为隐性感染,病毒潜伏感染于腰荐神经节或三叉神经节,机体应激后又重新向外界排毒,造成新一轮的病毒传播,给IBR的防控和净化带来极大的困难。IBRV感染后也可引起机体免疫抑制,导致牛继发性感染多杀性巴氏杆菌、牛支原体等其它病原体,最终引起牛死亡,造成经济损失。 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种重组杆状病毒表达系统的构建方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一、以IBRV
‑
gD和BVDV
‑
E2基因序列为模板,设计并扩增核苷酸序列分别如SEQ IDNO:01~04所示的重组基因gD、rgD、E2和E2BT;步骤二、将重组基因gD、rgD、E2和E2BT分别与pFastBac Dual载体连接,鉴定正确后,获得重组转移质粒pFBD
‑
gD、pFBD
‑
rgD、pFBD
‑
E2和pFBD
‑
E2BT;步骤三、将步骤二所得重组转移质粒分别转化感受态细胞,提取质粒,将鉴定,获得重组杆状病毒质粒rBac
‑
gD、rBac
‑
rgD、rBac
‑
E2和rBac
‑
E2BT;步骤四、将步骤三所得重组杆状病毒质粒分别转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒Ac
‑
gD、Ac
‑
rgD、Ac
‑
E2和...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈金顶,李冰珂,赵明秋,李芳芳,李照耀,吴珂珂,何垠滔,
申请(专利权)人:华南农业大学,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。