表达IBRV-gD和BVDV-E2的重组杆状病毒表达系统、构建方法及应用技术方案

技术编号:37778328 阅读:31 留言:0更新日期:2023-06-09 09:08
本发明专利技术涉及表达IBRV

【技术实现步骤摘要】
表达IBRV

gD和BVDV

E2的重组杆状病毒表达系统、构建方法及应用


[0001]本专利技术属于生物领域,特别涉及一种牛传染性鼻气管炎gD和牛病毒性腹泻E2蛋白二联亚单位疫苗及其在杆状病毒表达系统中高效表达方法。

技术介绍

[0002]牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)引起的牛的接触性传染病。IBRV主要侵害牛的呼吸系统、生殖系统和神经系统,具体表现为高热、流鼻液、公牛龟头包皮炎、孕畜流产和幼牛脑膜炎等。IBRV可感染不同年龄阶段的牛,感染IBRV后的牛多转为隐性感染,病毒潜伏感染于腰荐神经节或三叉神经节,机体应激后又重新向外界排毒,造成新一轮的病毒传播,给IBR的防控和净化带来极大的困难。IBRV感染后也可引起机体免疫抑制,导致牛继发性感染多杀性巴氏杆菌、牛支原体等其它病原体,最终引起牛死亡,造成经济损失。
[0003本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组杆状病毒表达系统的构建方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一、以IBRV

gD和BVDV

E2基因序列为模板,设计并扩增核苷酸序列分别如SEQ IDNO:01~04所示的重组基因gD、rgD、E2和E2BT;步骤二、将重组基因gD、rgD、E2和E2BT分别与pFastBac Dual载体连接,鉴定正确后,获得重组转移质粒pFBD

gD、pFBD

rgD、pFBD

E2和pFBD

E2BT;步骤三、将步骤二所得重组转移质粒分别转化感受态细胞,提取质粒,将鉴定,获得重组杆状病毒质粒rBac

gD、rBac

rgD、rBac

E2和rBac

E2BT;步骤四、将步骤三所得重组杆状病毒质粒分别转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒Ac

gD、Ac

rgD、Ac

E2和...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈金顶李冰珂赵明秋李芳芳李照耀吴珂珂何垠滔
申请(专利权)人:华南农业大学
类型:发明
国别省市:

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