一株绿针假单胞菌PCK02及其获取方法与应用技术

本发明专利技术公开了一株绿针假单胞菌PCK02及其获取方法与应用，其命名为绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)PCK02菌株，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.20524。菌株PCK02可在浓度高达10g/L的几丁质为唯一碳源的培养基中正常生长；其接种于甘油酪素培养基发酵48小时，与载体混合后可制备10

【技术实现步骤摘要】
一株绿针假单胞菌PCK02及其获取方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物基因工程，特别涉及一株绿针假单胞菌PCK02及其获取方法与应用。

技术介绍

[0002]本专利技术中的绿针假单胞菌能利用几丁质唯一碳源生长，产生一种降解几丁质的水解酶即几丁质酶。在植物抗病原真菌和重寄生微生物抑真菌过程中，该酶起着重要的作用。线虫卵壳中含有厚约1μm的几丁质层，人们推测几丁质对线虫卵的存活和发育可能产生一定的影响。绿针假单胞菌是一种重要的生防菌种，由该菌产生的几丁质酶能显著增加根结线虫卵的孵化率，并引起孵出幼虫死亡。利用微生物技术筛选高效产几丁质酶的绿针假单胞菌PCK02为有效成分进行根结线虫防治，在植物寄生线虫防治应用上，具有杀虫活性高，作用时间长，使用安全等优点。本专利技术推进农业病虫害绿色防控，促进生态环境可持续发展具有重要意义。

技术实现思路

[0003][0004]针对上述问题，本专利技术的目的，是提供一株绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)PCK02及其获取方法与应用，菌种PCK02可产较高几丁质酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)菌株，命名为PCK02，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其保藏编号为CGMCC No.20524。2.根据权利要求1所述的绿针假单胞菌PCK02，其特征在于，所述绿针假单胞菌的16S rDNA片段的序列如SEQ ID NO.1所示。3.根据权利要求1所述的绿针假单胞菌PCK02的获取方法，其特征在于，包括以下步骤：A、采集感染根结线虫病害的黄瓜、西红柿根，抖落收集根部土壤于无菌袋中作为分离样源；B、以几丁质为单一碳源，制备含有5.0g/L几丁质无机盐培养基A用稀盐酸调pH值至7.2
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7.4，500mL三角瓶分装100mL，121℃灭菌32min备用；C、待培养基灭菌后温度降低到30
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40℃左右时，在超净台下按照5％的质量比加入混合病根土，三角瓶置于35℃、200rpm的恒温摇床中进行富集培养48h；D、之后重复5％接种培养5次代后，取样在固体几丁质培养基A平板上反复划线分离出单菌株，挑起透明圈较大的菌株接种入上述液体几丁质无机培养基内驯化，再将上述操作重复多次，划线接入固体几丁质无机培养基培养,挑选产桔红色菌落之后纯化得到绿针假单胞菌菌株，命名为PCK02。4.根据权利要求3所述的绿针假单胞菌PCK02的获取方法，其特征在于：所述几丁质无机盐培养基的配方(g/...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晓宇，门欣，赵玲侠，瞿佳，陈锐，
申请(专利权)人：陕西省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：