【技术实现步骤摘要】
一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法
[0001]本专利技术属于干细胞外泌体的制备领域,尤其是涉及一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法
技术介绍
[0002]间充质干细胞具有强大的增殖分化能力,目前已被广泛应用于创伤修复和组织再生等研究中,且被证实具有良好的皮肤损伤修复功能。研究表明,干细胞发挥作用的主要机制是依赖旁分泌改变局部微环境。外泌体是干细胞旁分泌的重要组分,属于细胞外囊泡的一种,其直径约为30~150nm,它由细胞内的多泡小体反向起泡产生,与细胞膜融合后释放到细胞外,从而进入循坏系统或多种生物体液,并将携带的多种生物信息传递给靶细胞,参与组织再生过程,与干细胞相比具有免疫原性低、稳定性高、活性高、不易致瘤等优势,近年来引起广泛关注,被应用到多种形式皮肤损伤的治疗研究中。
[0003]脂肪间充质干细胞是一种从脂肪组织中获取的间充质干细胞,主要来源于脂肪组织的基质血管部分。脂肪间充质干细胞可以通过分泌细胞因子、脂肪因子、生长因子、血管生成因子和神经营养因子来促进功能恢复或减少损伤,具有提取浓度高,获得途径多,制 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:包含以下步骤:1)选取生长状态良好的P2
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P4代次大鼠的脂肪间充质干细胞,调整细胞浓度为4~7
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105,接种于无外泌体培养基中,在混合气体为90%N2、5%的CO2和5%的O2条件下,36℃~37℃恒温培养48h;2)当细胞贴壁融合达60%~70%后,收集培养液,进行差异超速离心;3)在离心后获取的沉淀中加入PBS缓冲液,将收获的细胞沉淀重悬;4)置于
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80℃冰箱中保存。2.根据权利要求1所述的脂肪间充质干细胞外泌体的制备及保存方法,其特征在于:步骤1)中所述无...
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