一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法及应用技术

本申请涉及生物发酵技术领域领域，具体公开了一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法及应用。其包括EM菌液体菌种制备工艺和EM菌菌肥的制备工艺；其中EM菌菌肥的制备工艺包括：S201、食用菌菌包废料脱毒处理；S202、制备中国被毛孢菌发酵营养物；S203、EM菌培养液制备；S204、EM菌肥料制备，其具有合理利用食用菌菌包废料，减少资源的浪费和对环境的污染的优点。本申请的肥料可用于马铃薯、菊芋和小麦等农作物，其具有提高农作物产量的优点。其具有提高农作物产量的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法及应用


[0001]本申请涉及生物发酵
，更具体地说，它涉及一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法及应用。

技术介绍

[0002]EM是英文(Effective Microorganisms)的缩写语，中文译为“有效微生物群”。它是由光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群、丝状菌群等5科10属80余种微生物组成的。各类微生物利用其他微生物产生的物质，形成一种共生共荣体系，从而保证EM益生菌多效活性液状态稳定、功能齐全。所以这种复合微生物菌剂在种植、养殖、环境保护等方面能发挥多种功能，促进动植物生长发育，抑制病害发生。
[0003]食用菌菌包废料是指食用菌出菇结束以后剩下的菌包废料。目前，我国已成为世界上食用菌生产第一大国。食用菌栽培已发展成与种植业、养殖业并重的农村三大产业，成为我国农村经济中最具活力的新兴的朝阳产业。随着我国食用菌生产规模的逐年扩大，产生的废弃物也越来越多。据不完全统计，全国每年菌包废料达到400万t以上。由于没有有效的回收利用方法，目前食用菌菌包废料变成了固体垃圾，常常被倾倒在河沟、路边，污染水和土地，影响环境，如此处理菌包废料不仅导致资源的浪费，还导致霉菌有害孢子和害虫的滋生，对环境造成极大污染。因此要发展食用菌生产，特别是规模化生产，就必须研发食用菌菌渣的综合利用技术。

技术实现思路

[0004]为了合理利用食用菌菌包废料，减少资源的浪费和对环境的污染，本申请提供一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法及应用。
[0005]第一方面，本申请提供的一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法采用如下的技术方案：
[0006]一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法，包括EM菌液体菌种制备工艺和EM菌菌肥的制备工艺；
[0007]所述EM菌液体菌种制备工艺包括以下步骤：
[0008]S101、从EM菌液中分离得到光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群和丝状菌群；
[0009]S102、斜面培养：将S101分离得到的光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群和丝状菌群在35℃条件下分别接种于PDA固体培养基，培养14天，活化菌种；
[0010]S103、一级种子培养：将步骤S102活化的菌种在35℃条件下分别接种于液体培养基，120rpm摇床培养14天，用血球计数板计数，每种菌株浓度达到1.0
×
108cfu/ml以上；
[0011]S104、混合发酵培养：将步骤S103一级种子混合接种于液体培养基中，接种量为液体培养基的体积的1％，进行复合菌剂摇床培养，混合搅拌培养条件：温度35℃，120rpm，培养14天得到复合微生物EM菌剂；
[0012]S105、EM菌群筛选：按照步骤S104进行发酵培养，其他条件不变，仅调节液体培养
基pH，按照不同的pH值梯度进行发酵培养，筛选偏酸性条件下稳定繁育的组成，用血球计数板计数，测算光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群和丝状菌群的菌株浓度；
[0013]S106、EM菌群液体菌种的制备：按照步骤S104进行摇床发酵培养，发酵液pH调整为5.5，培养14天，即得到复合微生物EM菌液体菌种。
[0014]所述EM菌菌肥的制备工艺包括：
[0015]S201、食用菌菌包废料脱毒处理
[0016]收集食用菌菌包废料，粉碎至8目以下颗粒性物料，按照1：10的料水比加入水混合，用碱液调节pH值为13左右，浸泡15～30h，调节pH值至中性，即得到食用菌菌包废料脱毒液；
[0017]S202、制备中国被毛孢菌发酵营养物
[0018]将采集的野生冬虫夏草经过分离、纯化、传代培养获得冬虫夏草唯一无性型菌种中国被毛孢作为菌种，将菌种依次进行斜面培养、摇瓶培养、种子扩大培养和深层发酵培养，收集发酵终点的发酵液固液分离，收集固液分离滤液，浓缩至浓缩液浓度12～20％，调节pH值至4.5，反应温度55℃，加入纤维素酶450ml/吨发酵液，同时加入葡萄糖转苷酶12IU，反应时间24h，灭酶，浓缩至浓度35％以上，喷雾干燥获得粉末状物料，即为中国被毛孢菌发酵营养物；
[0019]S203、EM菌培养液制备
[0020]以步骤S201制备的食用菌菌包废料脱毒液为主要营养液，添加步骤S202制备的中国被毛孢菌发酵营养物，补充少量玉米粉，白砂糖，硫酸镁0.02％，磷酸氢二钾0.02％，调节pH为5.5，121℃灭菌30min，得到EM菌培养液；
[0021]S204、EM菌肥料制备
[0022]将步骤S106制备的EM菌液体菌种接种于上述步骤S203中的EM菌培养液中，进行发酵培养，温度35℃，通气量1:0.5～1:2V/V，培养时间5～15天；
[0023]收集发酵终点的发酵液，固液分离，分别收集滤液和固体残渣，滤液浓缩至固形物含量15％以上后灌装获得EM菌培养液体肥料A；固体残渣经过干燥、粉碎后获得EM菌培养固体肥料B。
[0024]优选的，步骤S103和步骤S104中液体培养基(重量组分计算)组成：牛肉膏1.2％，蛋白胨2.5％，白砂糖3.0％，玉米粉2.0％，琼脂1.5％，硫酸镁0.06％，磷酸氢二钾0.06％，pH5.5～6.5，121℃灭菌30min。
[0025]优选的，步骤S102EM菌种中光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群和丝状菌群混合接种的比例按照2：3.5：2.5：3：5菌株浓度配比混合。
[0026]优选的，步骤S201中所述食用菌菌包废料的主要成分是秸秆、杂木屑和棉籽壳。
[0027]优选的，步骤S201所述碱液中的碱有氢氧化钠、碳酸钠、石灰水和氢氧化钙。
[0028]优选的，步骤S203中EM菌培养液的成分判断方法为：还原糖含量≥15g/L，氨氮含量≥0.5g/L。
[0029]优选的，步骤S202和步骤S204所述发酵终点的判断方法均为：检测发酵液还原糖含量≤100mg/L，氨氮含量≤200mg/L。
[0030]第二方面，本申请提供一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的应用，采用如下的技术方案：
[0031]一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的应用，权利要求1所制得的EM菌培养液体肥料A和EM菌培养固体肥料B用于马铃薯、菊芋和小麦等农作物。
[0032]综上所述，本申请具有以下有益效果：
[0033]1、由于本申请采用上述技术方案，通常食用菌菌包废料直接固态堆肥，施用效果差，本专利技术经过处理后，食用菌菌包废料可以再次作为EM菌发酵的原料，提升了食用菌包废料的利用率和价值；冬虫夏草菌发酵滤液中富含氨基酸、虫草多糖、甘露醇、腺苷等很多有效成分以及大量微量元素，通过本方法可以全部回收冬虫夏草菌发酵滤液中的有效成分，作为EM菌发酵的营养，也可以利用其含有的纤维素酶诱导物诱导EM菌产生纤维素酶，提高食用菌包废料的利用率，同时做到了冬虫夏草菌发酵滤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用EM菌发酵食用菌菌包废料制备肥料的方法，其特征在于，包括EM菌液体菌种制备工艺和EM菌菌肥的制备工艺；所述EM菌液体菌种制备工艺包括以下步骤：S101、从EM菌液中分离得到光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群和丝状菌群；S102、斜面培养：将S101分离得到的光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群和丝状菌群在35℃条件下分别接种于PDA固体培养基，培养14天，活化菌种；S103、一级种子培养：将步骤S102活化的菌种在35℃条件下分别接种于液体培养基，120rpm摇床培养14天，用血球计数板计数，每种菌株浓度达到1.0
×
108cfu/ml以上；S104、混合发酵培养：将步骤S103一级种子混合接种于液体培养基中，接种量为液体培养基的体积的1％，进行复合菌剂摇床培养，混合搅拌培养条件：温度35℃，120rpm，培养14天得到复合微生物EM菌剂；S105、EM菌群筛选：按照步骤S104进行发酵培养，其他条件不变，仅调节液体培养基pH，按照不同的pH值梯度进行发酵培养，筛选偏酸性条件下稳定繁育的组成，用血球计数板计数，测算光合菌群、乳酸菌群、酵母菌群、放线菌群和丝状菌群的菌株浓度；S106、EM菌群液体菌种的制备：按照步骤S104进行摇床发酵培养，发酵液pH调整为5.5，培养14天，即得到复合微生物EM菌液体菌种；所述EM菌菌肥的制备工艺包括：S201、食用菌菌包废料脱毒处理：收集食用菌菌包废料，粉碎至8目以下颗粒性物料，按照1：10的料水比加入水混合，用碱液调节pH值为13左右，浸泡15～30h，调节pH值至中性，即得到食用菌菌包废料脱毒液；S202、制备中国被毛孢菌发酵营养物：将采集的野生冬虫夏草经过分离、纯化、传代培养获得冬虫夏草唯一无性型菌种中国被毛孢作为菌种，将菌种依次进行斜面培养、摇瓶培养、种子扩大培养和深层发酵培养，收集发酵终点的发酵液固液分离，收集固液分离滤液，浓缩至浓缩液浓度12～20％，调节pH值至4.5，反应温度55℃，加入纤维素酶450ml/吨发酵液，同时加入葡萄糖转苷酶12IU，反应时间24h，灭酶，浓缩至浓度35％以上，喷雾干燥获得粉末状物料，即为中国被毛孢菌发酵营养物；S203、EM菌培养液制备：以步骤S201制备的食用菌菌包...

【专利技术属性】
技术研发人员：李俊林，王玉华，董笑菲，李永芬，马永珍，刘惠艳，李洪梅，杨成香，
申请(专利权)人：青海珠峰冬虫夏草原料有限公司，
类型：发明
国别省市：