一种防治柑橘根腐黄化病的微生物菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种防治柑橘根腐黄化病的微生物菌剂及其制备方法和应用，所述微生物菌剂包括阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌，所述阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的有效活菌数均≥2.0

【技术实现步骤摘要】
一种防治柑橘根腐黄化病的微生物菌剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及柑橘黄化病防治
，特别是涉及一种防治柑橘根腐黄化病的微生物菌剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]柑橘生长过程中叶片出现失绿发黄，严重时造成死树，群众称此为“黄化病”。柑橘黄化现象在许多柑橘园区都有不同程度的发生。由于叶片光合作用受阻，导致果实产量低，品质差，是柑橘生产上的一个急需解决的重大问题。引起柑橘黄化问题的原因很多，主要集中在以下几方面：1. 营养元素缺乏。缺少氮、钾、镁、钙、硫、铁、锌、锰、硼、铜等大中微量元素引起的黄化。2. 施肥过量或不当造成黄化。化肥使用不当导致氯、硼、铜、硫等元素过量，或者施用了未经发酵腐熟的有机肥后，造成有机肥在植物根部再次高温发酵，对植物根部造成伤害，阻碍水分和营养的及时供应，地上与地下部分营养失调出现黄叶。3. 环境气候条件造成叶片黄化。土壤质地黏重，土壤板结，水分过多或过低，冻害或树势衰弱等造成叶片黄化。4.病虫害造成柑橘黄化。植物病原菌引起的根腐病，根茎疫病等，红蜘蛛、蚜虫等导致叶片枯黄脱落，甚至整株果树死亡。
[0003]目前，柑橘黄化问题的解决主要是针对问题查找原因，进行科学施肥，合理灌溉，喷施化学农药等措施进行病虫害的防治。化肥或农药的使用会造成环境污染，农化残留，农产品品质下降，不利于农业的绿色可持续性发展。
[0004]近年来，微生物菌剂的开发和应用日益增多，受到人民的偏爱。菌剂中的微生物有抑制植物病害的作用，可减少化肥农药的使用，增加和改良根际周围有益微生物菌群结构。经本公司技术人员检索，目前未见有阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)、贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）防治柑橘病理性根腐黄化病的报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是针对现有技术中存在的环境污染，农化残留，农产品品质下降，不利于农业的绿色可持续性发展的技术缺陷，而提供一种防治柑橘根腐黄化病的微生物菌剂及其制备方法和应用。
[0006]为实现本专利技术的目的所采用的技术方案是：一种防治柑橘根腐黄化病的微生物菌剂，所述微生物菌剂包括阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis），所述阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的有效活菌数均≥2.0
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[0007]阿氏芽孢杆菌 MES85801分类命名为阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai），已于2023年01月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其保藏编号为 CGMCC No.26404。贝莱斯芽孢杆菌MES861分类命名为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis），已于2018年12月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰
西路1号院3号，其保藏编号为CGMCC No.16857。
[0008]在上述技术方案中，所述阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的质量比为1:1。
[0009]本专利技术的另一方面，提供一种所述的微生物菌剂的制备方法，包括阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的发酵液的制备、发酵液与稳定剂制备液体制剂和喷雾干燥，优选的，所述稳定剂为黄原胶。
[0010]在上述技术方案中，所述阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的发酵液均通过以下方法制备：步骤1，一级种子培养：将经试管斜面活化的菌株,进行培养得到一级种子，培养基为一级种子培养基；步骤2，发酵:在扩发酵罐中装有液体发酵培养基，对液体发酵培养基进行灭菌后，将步骤1得到的一级种子接种液体发酵培养基中发酵培养；步骤3，至芽孢形成比例大于等于90%时，结束发酵，放罐，得到发酵液。
[0011]在上述技术方案中，所述一级种子培养基包括8
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13质量份数的蛋白胨、2
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5质量份数的牛肉膏、3
‑
5质量份数的氯化钠、19.5质量份数的琼脂和1000质量份数的水，所述一级种子培养基的pH值为7.0
‑
7.5；所述液体发酵培养基包括葡萄糖2
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4%、酵母浸粉0.5
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1%和氯化钾0.5
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0.75%，所述液体发酵培养基的pH值为7.0
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7.5。
[0012]在上述技术方案中，所述步骤2中发酵培养的条件为，控制扩发酵罐的压力在0.02Mpa
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0.07 Mpa，在35℃培养26h。
[0013]本专利技术的另一方面，提供一种所述的微生物菌剂在防治柑橘根腐黄化病中的应用，将所述微生物菌剂加水稀释后，均匀浇在植株根部或挖沟施用有机肥后在植物根部浇适量水。
[0014]在上述技术方案中，所述加水稀释的倍数为400
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800倍。
[0015]在上述技术方案中，所述微生物菌剂对柑橘黄化病的防效不低于85%。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术的微生物菌剂对引起柑橘黄化病菌的镰刀菌（Fusarium）拮抗效果明显，阿氏芽孢杆菌还有分解土壤中的镉等重金属污染、解磷、解钾、解硅、分泌植物生长激素促进植物生长的作用。经过田间大量试验，本专利技术的微生物菌剂能防止或减轻柑橘黄化现象的发生，促进柑橘稳产、增收，改善和提高柑橘的产量和品质。
附图说明
[0017]图1所示为本专利技术的微生物菌剂对柑橘黄化根腐病的拮抗效果图。
[0018]图2所示为本专利技术微生物菌剂对柑橘黄化根腐病的防效图，其中，a为施加微生物菌剂前，b为施加微生物菌剂防治后。
[0019]阿氏芽孢杆菌 MES85801分类命名为阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai），已于2023年01月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其保藏编号为 CGMCC No.26404。贝莱斯芽孢杆菌MES861分类命名为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis），已于2018年12月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰
西路1号院3号，其保藏编号为CGMCC No.16857。
具体实施方式
[0020]以下结合具体实施例对本专利技术作进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0021]阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai），是我司研发人员从天津武清区土壤中分离获得，保藏日期：2023年01月06日，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.26404。阿氏芽孢杆菌为芽孢杆菌属，属于革兰氏阳性菌、芽孢杆菌属本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种防治柑橘根腐黄化病的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂包括阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis），所述阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的有效活菌数均≥2.0
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个/g。2.如权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于，所述阿氏芽孢杆菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CGMCC No.26404，保藏日期：2023年01月06日；所述贝莱斯芽孢杆菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CGMCC No.16857，保藏日期：2018年12月03日。3.如权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于，所述阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的质量比为1:1。4.一种如权利要求1
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3任意一项所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的发酵液的制备、发酵液与稳定剂制备液体制剂和喷雾干燥。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述阿氏芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌的发酵液均通过以下方法制备：步骤1，一级种子培养：将经试管斜面活化的菌株,进行培养得到一级种子，培养基为一级种子培养基；步骤2，发酵:在扩发酵罐中装有液体发酵培养基，对液体发酵培养基进行灭菌后，将步骤1得到的一级种子接种液体发酵培养基中发酵培养；步骤3，...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晓琛，肖培英，赵钢勇，唐广辉，李立培，
申请(专利权)人：天津坤禾生物科技集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：