鉴别诊断猪繁殖与呼吸障碍综合征各变异株的多重荧光定量引物和探针组合及其应用制造技术

本发明专利技术提供鉴别诊断猪繁殖与呼吸障碍综合征各变异株的多重荧光定量引物和探针组合及其应用，包括分别针对PRRSV、NADC30及NADC34的三组引物和探针；进一步还包括针对18S rRNA序列作为检测中内标的引物和探针。进一步提供一种用于鉴别诊断由不同类型PRRSV毒株引起猪的典型或非典型呼吸与繁殖障碍综合征的多重荧光定量RT

【技术实现步骤摘要】
鉴别诊断猪繁殖与呼吸障碍综合征各变异株的多重荧光定量引物和探针组合及其应用


[0001]本专利技术属于分子生物学和兽医学领域，尤其涉及诊断猪繁殖与呼吸综合征变异株的的多重荧光定量引物和探针组合及其应用。

技术介绍

[0002]猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)，俗称的猪“蓝耳病”病毒，该病毒引起的猪繁殖与呼吸系统综合征是严重危害全球猪业发展的重要传染病之一。怀孕母猪感染主要症状为发热、精神沉郁、嗜睡，妊娠后期流产、死胎和木乃伊胎，发情期推迟，受胎率低；仔猪高热、呼吸困难、部分耳朵发蓝或潮红、死亡率很高等。PRRSV具有免疫抑制作用，易继发感染其他疾病，导致病情复杂。传统的活疫苗已逐渐不能有效控制该疫病，疾病防控难度较大。因此，要想有效的防控该疫病，需要配备一套高灵敏度、高精准的检测系统，精准的切断猪蓝耳病的感染源与传播途径。
[0003]PRRSV属于尼多病毒目(Nidovirales)、动脉炎病毒科(Arteriviridae)、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鉴别诊断PRRSV/NADC30/NADC34中至少一种的引物对与探针组合，包括：(1)针对PRRSV N基因的引物对和探针，引物对如序列1和序列2所示，探针序列如序列3所示；(2)针对NADC30 Nsp2基因的引物对和探针，引物对如序列4和序列5所示，探针序列如序列6所示；(3)针对NADC34 Nsp2基因的引物对和探针，引物对如序列7和序列8所示，探针序列如序列9所示。2.如权利要求1所述的鉴别诊断PRRSV/NADC30/NADC34中至少一种的引物对与探针组合，其特征在于，用荧光标记对探针的两端进行修饰，其中，序列3的5
’
端用FAM修饰，3
’
端用BHQ1修饰；序列6的5
’
端用HEX修饰，3
’
端用BHQ1修饰；序列9的5
’
端用CY5修饰，3
’
端用BHQ3修饰。3.如权利要求1所述的鉴别诊断PRRSV/NADC30/NADC34中至少一种的引物对与探针组合，其特征在于，还包括18S rRNA序列的引物探针组合，作为鉴别PRRSV、NADC30、NADC34的内标，内标引物对序列分别如序列10和序列11所示，探针序列为序列12所示。4.如权利要求1所述的鉴别诊断PRRSV/NADC30/NADC34中至少一种的引物对与探针组合，其特征在于，对内标探针两端进行荧光标记修饰，其中5
’
端用ROX修饰，3
’
端用BHQ2修饰。5.鉴别诊断PRRSV/NADC30/NADC34中至少一种的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈蕾，周茜，王永强，
申请(专利权)人：泰州蕾灵百奥生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：