检测猴痘病毒的方法及试剂盒技术

本发明专利技术属于核酸检测领域，公开了检测猴痘病毒的方法及试剂盒。一种猴痘病毒的检测方法包括：将待检样品与RPA引物对接触，对待检样品中的靶DNA进行RPA扩增，得扩增产物；将扩增产物与

【技术实现步骤摘要】
检测猴痘病毒的方法及试剂盒


[0001]本专利技术属于核酸检测领域，具体涉及检测猴痘病毒的方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]猴痘是一种由猴痘病毒(Monkeypox Virus，MPXV)引起的人畜共患疾病。猴痘病毒是一种大型双链DNA病毒(约197kb)，属于正痘病毒属(Orthopoxvirus)，其中还包括天花病毒和牛痘病毒。该病毒主要在非洲中部和西部被报道。传播方式包括接触体液、皮肤损伤、呼吸道飞沫和物媒传播。及时诊断MPXV感染对防止病毒的传播至关重要。
[0003]MPXV常用的检测方法包括血清学试验、核酸检测(PCR和等温扩增)、测序及基于培养的微生物鉴别诊断(culture
‑
based differential diagnosis)。然而，这些方法存在一定缺陷，如整个病毒颗粒的鉴别诊断(病毒的分离和培养、电子显微镜检查等)通常需要3～6天，实施这些方法存在着生物安全问题；常规定量PCR诊断方法存在仪器成本高等问题。
[0004]基于此，提供一种快速、简便、低成本检测猴痘病毒的方法具有重要意本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猴痘病毒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将待检样品与RPA引物对接触，对所述待检样品中的靶DNA进行RPA扩增，得扩增产物；所述RPA引物对的核酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，或者如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；S2：将步骤S1所述扩增产物与
Ⅴ
型CRISPR/Cas蛋白、crRNA、单链核酸探针接触；所述crRNA的核酸序列如SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6所示；S3：检测所述
Ⅴ
型CRISPR/Cas蛋白切割所述单链核酸探针产生的信号，从而检测所述猴痘病毒。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述
Ⅴ
型CRISPR/Cas蛋白为Cas12a或Cas12b蛋白。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述crRNA包括与所述
Ⅴ
型CRISPR/Cas蛋白结合的序列和与所述扩增产物杂交的序列。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述单链核酸探针包括单链DNA、单链RNA或单链DNA
‑
RNA复合体中的至少一种；优选地，所述单链核酸探针不与所述crRNA互补。5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述单链核酸探针的5
’
端和3
’
端分别设置不...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊嘉格尔，陈群，李幸宇，雷正扬，刘畅悦，秦培武，
申请(专利权)人：清华大学深圳国际研究生院，
类型：发明
国别省市：