一种增强型单体StayGold蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种增强型单体StayGold蛋白及其应用，涉及重组蛋白技术领域，该增强型单体StayGold蛋白序列为野生型二体StayGold蛋白的突变序列，且所述突变序列中的突变为N137、Q140、Y187中至少一个氨基酸进行突变成任意氨基酸。本发明专利技术首次提供了一种新的单体的StayGold蛋白，mStayGold，该绿色荧光蛋白具有很强的热稳定性和荧光强度，其Tm约为95℃，比市场上常用的EGFP的Tm值高出15℃，与二体的StayGold的热稳定相当，产量也高出2.5倍；其荧光强度也比常用EGFP的荧光强度高5倍。其单体的性质解决了其野生型二体蛋白在与目标蛋白融合进行追踪和定位目标蛋白时因自身聚集状态影响标记和定位的功能，在指导蛋白表达、细胞定位等应用中具有更好的应用场景。胞定位等应用中具有更好的应用场景。胞定位等应用中具有更好的应用场景。

【技术实现步骤摘要】
一种增强型单体StayGold蛋白及其应用


[0001]本专利技术涉及重组蛋白
，具体涉及一种增强型单体StayGold蛋白及其应用。

技术介绍

[0002]如今，荧光蛋白(FPs)作为标记蛋白和报告蛋白被广泛应用于生命科学研究的诸多领域，以研究生命系统的组织和功能。其中绿色荧光蛋白(green fluorescentprotein，GFP)是一类存在于水母、水媳等肠腔生物的应用最早的荧光蛋白。GFP广泛应用后，一系列相关的荧光蛋白产品已经被开发。虽然已经开发了大量明亮的绿色发射FPs，但大多数都不如增强型的光稳定绿色荧光蛋白(EGFP)，主要的原因在于当前很多FPs的光稳定性不好，限制了其应用，因此发现和设计出应该强度和光稳定性产品对于荧光蛋白的应用非常重要。
[0003]Hirano，Masahiko等人在2022年从Cytaeis uchidae水母中发现了一种新的绿色荧光蛋白StayGold，该荧光蛋白的光稳定性比目前常用的荧光蛋白都高出一个数量级，已经很好地应用于观察内质网的动态成像[1.Hirano，Masahiko 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种增强型单体StayGold蛋白，其特征在于，该增强型单体StayGold蛋白序列为野生型二体StayGold蛋白的突变序列，且所述突变序列中的突变为N137、Q140、Y187中至少一个氨基酸进行突变成任意氨基酸。2.根据权利要求1所述的增强型单体StayGold蛋白，其特征在于，所述N137突变包括N137A、N137R、N137G、N137H、N137I、N137L、N137P和N137S。3.根据权利要求1所述的增强型单体StayGold蛋白，其特征在于，所述Q140突变包括Q140S、Q140A、Q140G、Q140H、Q140I、Q140L、Q140P和Q140Y。4.根据权利要求1所述的增强型单体StayGold蛋白，其特征在于，所述Y187突变包括Y187F、Y187A、Y187N、Y187D、Y187I、Y187L、Y187P、Y187S和Y187V。5.根据权利要求1所述的增强型单体StayGold蛋白，其特征在于，所述突变序列中的突变为以下四种情形之一：(1)N137和Q140两个突变组合；(2)N137和Y187两个突变组合；(3)Q140和Y187两个突变组合；(4)N137、Q140和Y187三个突变组合。6.根据权利要求1所述的增强型单体StayGold蛋白，其特征在于，所述增强型单体StayGold蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。7.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码如权利要求1
‑
6任一所述的增强型单体StayGold蛋白。8.根据权利要求7所述的一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的序列如SEQ ID NO.2所示。9.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒为含有如权利要求7
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8任一所述的多核苷酸且能够翻译表达出如权利要求1
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6任一所述增强型单体StayGold蛋白的表达载体。10.根据权利要求9...

【专利技术属性】
技术研发人员：王峰，吴家权，陈倩，杨益虎，桂文君，
申请(专利权)人：无锡佰翱得生物科学有限公司，
类型：发明
国别省市：