一种植物牛磺酸及其提取和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种植物牛磺酸及其提取和检测方法，涉及天然产物的提取技术领域，所述牛磺酸的提取和检测方法，以蔬菜类植物为原料，将原料进行粉碎匀浆后，加入甲醇

【技术实现步骤摘要】
一种植物牛磺酸及其提取和检测方法


[0001]本专利技术涉及天然产物的提取
，特别涉及一种基于超高效液相色谱
‑
串联质谱技术从植物中提取的植物牛磺酸及其提取和检测方法。

技术介绍

[0002]牛磺酸(taurine)是一种含硫的β
‑
氨基酸，化学名称为2－氨基乙磺酸。广泛分布于水生动物及海洋藻类植物组织中，其中海洋鱼贝类器官组织中牛磺酸含量较为丰富。
[0003]牛磺酸是一种非蛋白类氨基酸，在人体中含量极高。人体中牛磺酸被认为是一种半必需氨基酸，人体可在维生素B6存在的情况下利用甲硫氨酸或半胱氨酸自行合成牛磺酸，但是合成量不能满足身体代谢需求，所以需要补充外源牛磺酸。由于其独特的化学结构，牛磺酸参与机体多种生物生理功能，发挥重要的保健作用。大量研究表明牛磺酸具有保护细胞膜、抗氧化、维持人体钙平衡、増强免疫等多种生物医药功能。
[0004]目前国内外报道的对植物中牛磺酸的提取分析方法不多，牛磺酸的主要来源为海洋生物、藻类以及动物组织。在植物中提取牛磺酸需要考虑到植物中含有的糖类、纤维、氨基酸、无机盐、脂质等复杂成分，提取牛磺酸时要考虑的提取的选择性和灵敏性。因此寻找一种提取方法从植物中对牛磺酸进行提取就显得尤为重要，如何对植物中牛磺酸进行提取进化是当前要解决的问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的主要目的在于提供一种基于超高效液相色谱
‑
串联质谱技术从植物中提取的牛磺酸及其提取和检测方法，可以有效解决
技术介绍
中的问题。<br/>[0006]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：
[0007]一种牛磺酸的提取方法，以蔬菜类植物为原料，将原料进行粉碎匀浆后，加入甲醇
‑
水溶液作为提取试剂，采用超声波辅助提取法进行提取，取超声后的样品进行离心处理，离心后的样品上清液过微孔滤膜，获得牛磺酸提取液。
[0008]作为本专利技术的进一步优化方案，所述蔬菜类植物为辣椒、土豆或甜玉米。
[0009]作为本专利技术的进一步优化方案，所述甲醇
‑
水溶液中的甲醇的体积百分比为50％。
[0010]作为本专利技术的进一步优化方案，获得提取液的方法为：每5mL原料粉碎匀浆后，加入5mL的甲醇
‑
水溶液进行提取。
[0011]作为本专利技术的进一步优化方案，超声波辅助提取法的超声提取时间为20min，超声波功率180W；离心处理为在离心机中4℃，12000rpm条件下离心10min；微孔滤膜孔径为0.22μm。
[0012]一种植物牛磺酸，利用上述方法提取获得，所述牛磺酸为植物来源的牛磺酸，所述植物为蔬菜类植物。
[0013]一种植物牛磺酸的检测方法，采用上述方法提取植物中的牛磺酸，以体积百分比为50％甲醇
‑
水作为流动相，采用超高效液相色谱
‑
三重四级杆串联质谱仪检测牛磺酸，其
中，所述水为含有0.1％体积百分比的甲酸水。
[0014]作为本专利技术的进一步优化方案，高效液相色谱
‑
三重四级杆串联质谱仪色谱条件为：
[0015]色谱柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18 Column(1.7μm,2.1mm X 75mm,1/pk)；柱温：35℃；样品室温度：10℃；进样体积：2μL；流动相A：0.1％体积百分比的甲酸水，流动相B：甲醇；流速：0.2ml/min，等度洗脱；
[0016]高效液相色谱
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三重四级杆串联质谱仪质谱条件为：
[0017]电喷雾电离正离子模式，ESI
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；RADAR，同时进行全扫描(MS)和MRM(MS/MS)数据，设定牛磺酸的ESI
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MS/MS条件参数；牛磺酸的ESI
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MS/MS条件参数具体包括：毛细管电压：2KV；离子源温度:50℃；脱溶剂气温度:500℃；锥孔反吹氮气流量:800L/h；脱溶剂气流量:7L/min。
[0018]作为本专利技术的进一步优化方案，牛磺酸的ESI
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MS/MS条件参数还包括保留时间：0.83min；定性离子对：125.15/88.00m/z；定量离子对：125.15/80.00m/z；滞留时间：0.1s；锥孔电压：50V；碰撞能量：16eV。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术采用Waters三重四级杆超高效液相色谱系统以及Waters ACQUITY UPLC BEH C18超高压色谱柱，同时对超高效液相色谱
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质谱检测参数(如流动相、定性离子对、定量离子对)进行优化，提高了对牛磺酸的分辨率，缩短了样品的分析周期(目标峰保留时间0.83min，单个样品检测时间5min)，该方法变量稳定，方便大批量操作，适合大批量样品的提取检测。
附图说明
[0020]图1为牛磺酸解离示意图；
[0021]图2为牛磺酸一级质谱图；
[0022]图3为牛磺酸子离子检测质谱图；
[0023]图4为牛磺酸标准曲线图；
[0024]图5为不同比例的甲醇
‑
水对牛磺酸标样进行分离的峰图；
[0025]图6为苹果中牛磺酸标准结果图；
[0026]图7为菠菜中牛磺酸标准结果图；
[0027]图8为豆角中牛磺酸标准结果图；
[0028]图9为豇豆中牛磺酸标准结果图；
[0029]图10为橘子中牛磺酸标准结果图；
[0030]图11为辣椒中牛磺酸标准结果图；
[0031]图12为毛豆中牛磺酸标准结果图；
[0032]图13为藕中牛磺酸标准结果图；
[0033]图14为梨中牛磺酸标准结果图；
[0034]图15为土豆中牛磺酸标准结果图；
[0035]图16为青菜中牛磺酸标准结果图；
[0036]图17为甜玉米中牛磺酸标准结果图；
[0037]图18为香菜中牛磺酸标准结果图。
具体实施方式
[0038]下面结合附图对本申请作进一步详细描述，有必要在此指出的是，以下具体实施方式只用于对本申请进行进一步的说明，不能理解为对本申请保护范围的限制，该领域的技术人员可以根据上述申请内容对本申请作出一些非本质的改进和调整。
[0039]1、材料与试剂
[0040]1.1植物样品的获取
[0041]实验中所检测的植物样品均随机采买于市场
[0042]1.2Waters XEVO TQ
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S三重四级杆液相色谱质谱联用仪。
[0043]Waters ACQUITY UPLC I
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Class PLUS液相色谱系统配备有ACQUITY UPLC CH
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A色谱柱加热器、ACQUITY UPLC FTN流通针式样品管理器、ACQ本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种牛磺酸的提取方法，其特征在于，以蔬菜类植物为原料，将原料进行粉碎匀浆后，加入甲醇
‑
水溶液作为提取试剂，采用超声波辅助提取法进行提取，取超声后的样品进行离心处理，离心后的样品上清液过微孔滤膜，获得牛磺酸提取液。2.根据权利要求1所述的一种牛磺酸的提取方法，其特征在于，所述蔬菜类植物为辣椒、土豆或甜玉米。3.根据权利要求1所述的一种牛磺酸的提取方法，其特征在于，所述甲醇
‑
水溶液中的甲醇的体积百分比为50％。4.根据权利要求1所述的一种牛磺酸的提取方法，其特征在于，获得提取液的方法为：每5mL原料粉碎匀浆后，加入5mL的甲醇
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水溶液进行提取。5.根据权利要求1所述的一种牛磺酸的提取获得方法，其特征在于，超声波辅助提取法的超声提取时间为20min，超声波功率180W；离心处理为在离心机中4℃，12000rpm条件下离心10min；微孔滤膜孔径为0.22μm。6.一种植物牛磺酸，其特征在于，利用如权利要求1
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5任一方法提取获得，所述牛磺酸为植物来源的牛磺酸，所述植物为蔬菜类植物。7.一种植物牛磺酸的检测方法，其特征在于，采用如权利要求1
‑
5任一方法提取植物中的牛磺酸，以体积百分比为50％甲醇
‑
水作为流动相，采用超高效液相色谱
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三重四级杆串联质谱仪检测牛磺酸，其中...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨俊，赵凯，王乐毅，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：