一种扩张性/肥厚型心肌病基因突变猪成纤维细胞系的构建方法技术

本发明专利技术属于基因工程技术及生物技术领域，涉及一种扩张性/肥厚型心肌病基因突变猪成纤维细胞系的构建方法。本发明专利技术先设计一种敲除CSRP3基因的sgRNA，将所述sgRNA构建至载体px459后，将表达载体px459

【技术实现步骤摘要】
一种扩张性/肥厚型心肌病基因突变猪成纤维细胞系的构建方法


[0001]本专利技术属于基因工程技术及生物
，涉及一种扩张性/肥厚型心肌病基因突变猪成纤维细胞系的构建方法，具体涉及靶向敲除CSRP3基因的sgRNA及敲除CSRP3基因的猪胚胎成纤维细胞的生产方法。

技术介绍

[0002]扩张性心肌病(Dilated Cardiomyopathy，DCM)是一种常见的心肌疾病，其特征是左心室或双心室扩张和收缩功能障碍，每250人中就会有1人患病。DCM的病因可分为遗传性和非遗传性两种，由编码细胞骨架、肌节或核包膜蛋白的的突变基因引起的遗传性DCM约占所有DCM病例的35％。
[0003]肥厚型心肌病(Hypertrophic Cardiomyopathy，HCM)是一种常见的心血管疾病，其特征是心室壁增厚。HCM可能导致左心室(LV)流出道梗阻、心肌缺血或二尖瓣异常。HCM患者可能出现呼吸困难、胸痛、心悸、晕厥甚至心源性猝死(SCD)。
[0004]CSRP3是半胱氨酸和富含甘氨酸的蛋白质3基因(Cysteine and Gly本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.靶向敲除CSRP3基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2。2.编码权利要求1所述sgRNA的DNA分子。3.含有权利要求2所述DNA的载体。4.根据权利要求3所述的载体，其特征在于，所述载体为px459。5.一种敲除了CSRP3基因的细胞的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：利用CRISPR
‑
Cas9系统敲除所述细胞的CSRP3基因，所述CRISPR
‑
Cas9系统使用的sgRNA的核苷酸序列为SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄乐南，巩倩，刘艳，金佳敏，贺津，王华南，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：