一种提高泰乐菌素发酵单位的培养基及发酵方法技术

本发明专利技术涉及一种提高泰乐菌素发酵单位的培养基及发酵方法，是以弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其中一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基均包含棕榈油和石油酵母粉，并且发酵培养基中含有氧载体和正十二烷。本方法采用新配方，较传统工艺可大幅缩短发酵周期大约18h以上，减少能源消耗及节约原辅料生产成本；棕榈油和玉米淀粉乳的使用，总成本可减少约25％；在泰乐菌素发酵罐中使用石油酵母粉及氧载体与正十二烷合理配比，可以让棕榈油消耗速率提高的基础上加快产素速度，使发酵单位大幅增加。使发酵单位大幅增加。

【技术实现步骤摘要】
一种提高泰乐菌素发酵单位的培养基及发酵方法


[0001]本专利技术属于医药发酵
，具体涉及一种提高泰乐菌素发酵单位的培养基及发酵方 法。

技术介绍

[0002]泰乐菌素是弗氏链霉菌产生的一类十六元大环内酯类化合物，为畜禽专用抗生素。泰乐 菌素主要由四种具有生物活性的组分成分，分别为泰乐菌素A、B、C、D，其中A组分的含 量最高，在动物体内的活性也最强，我国药典(兽药)及国外药典规定，泰乐菌素成品中A 组分含量≥80﹪、A+B+C+D＞95﹪。
[0003]目前，国内采用以弗氏链霉菌作为菌种，以鱼粉、玉米蛋白粉、玉米粉、豆油等作为主 要原材料利用三级培养基发酵生产泰乐菌素，存在的主要问题有：1、由于传统的培养基原料 豆油、鱼粉价格占总成本比例最高，成为了制约泰乐菌素发酵成本的首要难题；2、菌体合成 代谢过程中需要消耗大量的氧使供养能耗上升，到了泰乐菌素发酵的后期，由于菌体逐步衰 亡、代谢减慢，合成泰乐菌素速度也逐步减缓，培养基后劲不足，使得泰乐菌素组分C转化 为组分A的速度也逐步下降；3、常规培养基配方中培养周期相对较长，发酵单位也难以突 破现有国内平均水平，且与国外平均水平还有差距。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供了一种新的提高泰乐菌素发酵单位的培养基及发酵方法，优化了 培养基的配方，达到了可大幅缩短发酵周期，减少能源消耗及节约生产成本，有效提高了泰 乐菌素供组分A含量，提高泰乐菌素发酵单位。
[0005]本专利技术第一方面涉及一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基：
[0006]包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于所述于一级种子培养 基、二级种子培养基和发酵培养基均含有棕榈油和石油酵母粉，其中发酵培养基中含有 Aid
‑
Plus ML
‑
50D和正十二烷。
[0007]进一步地，所述发酵培养基氧载体Aid
‑
Plus ML
‑
50D：正十二烷体积比为(0.1:1)(v:v)。
[0008]本专利技术第一方面的一些实施方式中，所述一级种子培养基组成为：棕榈油3.6
‑
4.3％，石 油酵母粉1.2
‑
1.9％，玉米淀粉乳6.5
‑
7.4％，磷酸三镁0.002
‑
0.005％，碳酸钙2.7
‑
3.5％，其余 为饮用水。
[0009]本专利技术第一方面的一些实施方式中，所述二级种子培养基组成为：棕榈油3.8
‑
4.7％，石 油酵母粉5.1
‑
6.5％，玉米淀粉乳6.9
‑
7.8％，氯化钠0.1
‑
0.2％，碳酸钙0.3
‑
0.5％，其余为饮用 水。
[0010]本专利技术第一方面的一些实施方式中，所述发酵培养基组成为：棕榈油3.8
‑
4.5％，石油酵 母粉2.0
‑
2.8％，玉米淀粉乳3.7
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4.3％.，氯化钠0.10
‑
0.14％，磷酸三镁0.12
‑
0.15％，碳酸钙 0.19
‑
0.23％，氧载体：正十二烷(0.1:1)(v:v)0.03
‑
0.05％，甜菜碱0.6
‑
0.8％，硫酸镍 0.00034
‑
0.00051％，其余为饮用水。
[0011]本专利技术第二方面涉及一种发酵生产泰乐菌素的发酵方法，包含以下步骤：
[0012]步骤(1)：将弗氏链霉菌种子液接入一级种子培养基中培养得一级种子培养液，所述一级 种子培养基组成为：棕榈油3.6
‑
4.3％，石油酵母粉1.2
‑
1.9％，玉米淀粉乳6.5
‑
7.4％，磷酸三 镁0.002
‑
0.005％，碳酸钙2.7
‑
3.5％，其余为饮用水；
[0013]步骤(2)：将所述一级种子培养液接种于二级种子培养基中培养得二级种子培养液，所述 二级种子培养基组成为：棕榈油3.8
‑
4.7％，石油酵母粉5.1
‑
6.5％，玉米淀粉乳6.9
‑
7.8％，氯 化钠0.1
‑
0.2％，碳酸钙0.3
‑
0.5％，其余为饮用水；
[0014]步骤(3)：将所述二级种子培养液接种于发酵培养基中发酵培养得发酵液，所述发酵培养 基组成为：棕榈油3.8
‑
4.5％，石油酵母粉2.0
‑
2.8％，玉米淀粉乳3.7
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4.3％.，氯化钠0.10
‑
0.14％， 磷酸三镁0.12
‑
0.15％，碳酸钙0.19
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0.23％，氧载体：正十二烷(0.1:1)(v:v)0.03
‑
0.05％， 甜菜碱0.6
‑
0.8％，硫酸镍0.00034
‑
0.00051％，其余为饮用水；
[0015]步骤(4)：从所述发酵液中提取泰乐菌素。
[0016]本专利技术第二方面的一些更具体的实施方式中涉及一种提高泰乐菌素发酵单位培养基的发 酵方法，其工艺步骤包括：
[0017]1)一级种子培养基灭菌，利用压差法将培养好的弗氏链霉菌种子液转移到一级种子罐中 培养，pH值为6.80
‑
8.50，菌浓达15％以上且无杂菌时移种；
[0018]2)二级种子培养基灭菌，利用压差法将一级种子液转移到二级种子罐中培养，pH值为 6.80
‑
8.50，菌浓达25
‑
50％且无杂菌时转种；
[0019]3)发酵培养基灭菌，利用压差法将二级种子液转移到发酵罐中培养，利用变温培养发酵 液，控制温度和空气流量，达到发酵要求终止培养。
[0020]一级种子培养条件为：罐温全程控制在28.0
‑
33.0℃，空气流量0
‑
15h：30
‑
85m3/h，15h
‑ꢀ
移种：160
‑
200m3/h；罐压保持在0.030
‑
0.040MPa，当pH值为6.80
‑
8.50，菌浓达15％以上且 无杂菌时方可移入二级种子罐培养，培养周期为35
‑
50h。
[0021]二级种子培养条件为：罐温全程控制在28.0
‑
33.0℃，空气流量0
‑
15h：50
‑
100m3/h，15h
‑ꢀ
移种：100
‑
200m3/h；罐压保持在0.030
‑
0.100MPa，当pH值为6.80
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种弗氏链霉菌发酵生产泰乐菌素的培养基，包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基，其特征在于所述一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基均含有棕榈油和石油酵母粉，其中发酵培养基中含有Aid
‑
Plus ML
‑
50D和正十二烷。2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于所述发酵培养基中氧载体Aid
‑
Plus ML
‑
50D：正十二烷体积比为0.1:1。3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于所述一级种子培养基组成为：棕榈油3.6
‑
4.3％，石油酵母粉1.2
‑
1.9％，玉米淀粉乳6.5
‑
7.4％，磷酸三镁0.002
‑
0.005％，碳酸钙2.7
‑
3.5％，其余为饮用水。4.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于所述二级种子培养基组成为：棕榈油3.8
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4.7％，石油酵母粉5.1
‑
6.5％，玉米淀粉乳6.9
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7.8％，氯化钠0.1
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0.2％，碳酸钙0.3
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0.5％，其余为饮用水。5.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于所述发酵培养基组成为：棕榈油3.8
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4.5％，石油酵母粉2.0
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2.8％，玉米淀粉乳3.7
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4.3％.，氯化钠0.10
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0.14％，磷酸三镁0.12
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0.15％，碳酸钙0.19
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0.23％，氧载体：正十二烷(0.1:1)(v:v)0.03
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0.05％，甜菜碱0.6
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0.8％，硫酸镍0.00034
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0.00051％，其余为饮用水。6.一种权利要求1
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5任一项所述培养基发酵生产泰乐菌素的发酵方法，其特征在于包含以下步骤：步骤(1)：将弗氏链霉菌种子液接入一级种子培养基中培养得一级种子培养液，所述一级种子培养基组成为：棕榈油3.6
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【专利技术属性】
技术研发人员：孙超，张江飞，何康乐，
申请(专利权)人：黑龙江联顺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：