一种大观霉素的提取纯化方法技术

本发明专利技术涉及了一种大观霉素的提取纯化方法，包括发酵液预处理、大孔树脂吸附解析、解析液后处理及喷雾干燥步骤，该方法由于采用大孔树脂替换离子交换树脂和喷雾干燥法替联用，并省去丙酮重结晶步骤，达到了收率高且降低了成本和环保压力，适合工业化生产。适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种大观霉素的提取纯化方法


[0001]本专利技术属于生物制药
，具体涉及一种大观霉素的提取纯化方法。

技术介绍

[0002]大观霉素(Spectinomycin)又称奇美霉素或壮观霉素，一种碱性水溶性抗生素。这是一族由氨基环醇为主体和氨基糖术类以忒键结合而成的抗生素。可以用于对于庆大霉素和妥布霉素耐药的患者，对于四环素以及青霉素耐药的病人，使用大观霉素具有很强的敏感性。对于青霉素以及头孢菌素类过敏的病人，可以使用大观霉素进行治疗。目前离子交换法是大观霉素大生产的通用方法，工艺为：发酵液酸化、过滤、离子交换、解析、活性炭脱色、浓缩、丙酮结晶、重结晶、真空干燥。
[0003]但本专利技术在实现本申请实施例中专利技术技术方案的过程中，发现上述技术至少存在如下技术问题：离子交换树脂需要高浓度酸溶液解析，树脂再生不仅需要丙酮，还需要使用酸和碱处理，结晶及重结晶工艺步骤也需要大量丙酮，在提取大观霉素方法树脂吸附量较低，成本相对较高，溶媒、酸、碱消耗高，成品收率低，对环境不友好等。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种大观霉素的提取纯化方法，通过大孔树脂分离方法与喷雾干燥联用的技术，解决了大观霉素提取纯化方法中离子交换树脂用盐酸、液碱的使用和排放问题，和重结晶步骤使用高成本丙酮的技术问题，优化了大观霉素提纯工艺，达到了收率高且降低了成本和环保压力。
[0005]为了达到上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0006]一种大观霉素的提取纯化方法，包括以下步骤：r/>[0007](1)发酵液预处理步骤：将大观霉素发酵液酸化处理固液分离得到大观霉素发酵滤液；
[0008](2)大孔树脂吸附解析步骤：将大观霉素发酵滤液经大孔树脂吸附解析步骤得到大观霉素解析液；
[0009](3)解析液后处理步骤：将大观霉素解析液经后处理步骤得到大观霉素富集液；
[0010](4)喷雾干燥步骤：将盐酸大观霉素富集液经喷雾干燥步骤得到大观霉素成品。
[0011]本专利技术在一些实施方式中，步骤(1)所述固液分离是采用板框压滤。
[0012]本专利技术在一些实施方式中，步骤(1)所述酸化pH值为2.0～4.0；
[0013]优选地，所述酸化试剂为草酸。
[0014]本专利技术在一些实施方式中，所述发酵液预处理步骤还包括pH值回调至5.0～7.0；
[0015]优选地，所述pH值回调试剂为氢氧化钠。
[0016]本专利技术在一些实施方式中，步骤(2)所述大孔树脂吸附解析步骤中吸附方式为两大孔树脂柱串联。
[0017]本专利技术在一些实施方式中，步骤(2)所述大孔树脂吸附解析步骤中解析剂为pH值
为4.0～6.0酸溶液。
[0018]优选地，所述酸溶液为盐酸溶液。
[0019]本专利技术在一些实施方式中，所述大孔树脂解析步骤中解析液用磷钨酸点样沉淀开始收集至废液效价低于220U/ml为终点。
[0020]本专利技术在一些实施方式中，步骤(3)所述解析液后处理步骤包括解析液活性炭脱色步骤和超滤步骤。
[0021]本专利技术在一些实施方式中，解析液后处理步骤还包括纳滤步骤。
[0022]本专利技术更具体实施方式如下：
[0023]一种大观霉素的提取纯化方法，包括以下步骤：
[0024]1、酸化
[0025]接发酵液降温到10～20℃，在搅拌情况下缓慢加入草酸酸化至pH值2.0～4.0，搅拌30～40分钟。
[0026]2、过滤
[0027]酸化液用板框进行过滤，进料完毕加入20％的顶洗水将残留在滤饼内剩余效价顶出。
[0028]3、回调复滤
[0029]滤液用氢氧化钠溶液在滤液池中调至pH值5.0～7.0后用陶瓷膜进行复滤，加20％的水对陶瓷膜浓浆透析，合并透过滤液和顶洗液得复滤液。
[0030]4、大孔树脂吸附
[0031]复滤液降温至10～15℃采用正吸附的方式使滤液自上而下通过DM
‑
18型大孔树脂柱，控制流速0.5～1bv/h；采用两柱串联方式吸附，当磷乌酸检测有白色沉淀后，转入下一柱吸附，第一个树脂柱作为饱和树脂断开，以此类推。
[0032]5、洗水
[0033]吸附饱和的树脂，用10～15℃去离子水正洗2～3倍树脂体积，然后用去少量离子水反洗，反洗至流出洗液澄清透明为止，水洗流速1bv/h。洗水转入下一树脂或专门的洗水树脂，以防止效价流失。
[0034]6、解析
[0035]加盐酸调pH4.0～6.0作为解析剂，正进料，流速0.2～0.5bv/h，解析液收集前的料头套入不饱和的吸附树脂，大孔树脂解析步骤中解析液用磷钨酸点样沉淀开始收集解析液至废液效价低于220U/ml为终点。解析液需骤降至20℃以下保存。
[0036]7、树脂再生
[0037]由于树脂吸附的选择性好，在滤液吸附过程中，吸附的杂质、蛋白、色素量很少的优点，同时由于大孔树脂，基本不吸附无机盐离子，因此解析后的树脂，可以直接用于下批滤液的吸附。同时为防止解析过程中影响吸附效果，需要先自然降温或冷水串联降温后再吸附下一批滤液。
[0038]8、脱色
[0039]按10～30kg/m3解析液加入活性炭，搅拌30～60分钟，钛棒或板框过滤，料液过滤完毕，顶水用20～40％纯化水或去离子水，脱色液和顶洗水进入脱色液储罐。
[0040]由于大孔树脂良好的选择性，解析液颜色比离子交换工艺浅很多，基本和原工艺
的脱色液的颜色相似，所以，本工艺脱色主要目的是除热源，活性炭加量只有原工艺加量的15～30％。
[0041]9、超滤除蛋白和内毒素
[0042]脱色液用截留分子量为3000的超滤膜进行超滤，超滤截留液约加入20％的去离子水顶洗，料液温度控制在20℃以下。
[0043]10、浓缩
[0044]脱色液用截留分子量为200的纳滤膜进行纳滤浓缩，约浓缩到4～8万U/ml停止浓缩，浓缩过程注意降温，料液温度控制在20℃以下，然后减压浓缩至10～15万U/ml停止浓缩。
[0045]11、喷干
[0046]浓缩液无菌过滤后进入喷雾干燥塔喷干，控制进风温度110～140度，出风温度45～55℃，得到盐酸大观霉素无菌粉；喷干收粉系统需装除湿降温装置，以便于把喷干粉很快降温，防止成品高温下分解。大观霉素成品按照中国药典2020版检测：水分16.0～20.0％；大观霉素含量78～85％；灰分0.2～0.7％，pH值3.9～5.6，符合《中国药典》：16.0～20.0％；灰分不得过1.0％；大观霉素含量不得少于77.9％；pH值3.8～5.6的质量标准。产品按照EPX标准检测，折干后(4R)～二盐酸二氢大观霉素及二盐酸大观霉素之和含量达到97～99％，符合EPX要求的96～102％标准。
[0047]本专利技术的技术方案具有以下有益的技术效果：
[0048]1、本专利技术用大孔吸附树脂代替离本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种盐酸大观霉素的提取纯化方法，包括以下步骤：(1)发酵液预处理步骤：将大观霉素发酵液酸化处理固液分离得到大观霉素发酵滤液；(2)大孔树脂吸附解析步骤：将大观霉素发酵滤液经大孔树脂吸附解析步骤得到大观霉素解析液；(3)解析液后处理步骤：将大观霉素解析液经后处理步骤得到大观霉素富集液；(4)喷雾干燥步骤：将大观霉素富集液经喷雾干燥步骤得到大观霉素成品。2.按照权利要求1所述大观霉素的提取纯化方法，其特征在于步骤(1)所述固液分离是采用板框压滤。3.按照权利要求1所述大观霉素的提取纯化方法，其特征在于步骤(1)所述酸化pH值为2.0～4.0。4.按照权利要求3所述大观霉素的提取纯化方法，其特征在于所述酸化试剂为草酸。5.按照权利要求1所述大观霉素的提取纯化方法，其特征在于发酵...

【专利技术属性】
技术研发人员：张江飞，孙超，
申请(专利权)人：黑龙江联顺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：