同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其包括：采用石油醚提取烟草醚提物，并测定石油醚提取物的含量；利用乙醇溶液溶解腺毛分泌成分并除去高分子脂溶性杂质；烟草腺毛分泌成分中二萜类致香成分含量的测定：定量移取腺毛分泌成分溶解液，用流动相稀释，利用液相色谱法同时测定西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺

【技术实现步骤摘要】
同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法


[0001]本专利技术涉及烟叶特征香气成分检测
，尤其涉及一种同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法。

技术介绍

[0002]烟草石油醚提取物，简称醚提物，是烟叶样品用石油醚作溶剂萃取后得到的混合物，其成分主要包括树脂、蜡质、类脂物、甾醇、油脂、挥发油、脂肪酸、色素等。这些物质大部分与烟草的香气、油分等密切相关，醚提物含量高的烟叶，其色度饱满，光泽强，油分多，弹性好，香气丰满。
[0003]烟草叶片、茎杆、花均密被腺毛，烟草腺毛分泌成分是烟草特征次生代谢产物，主要为西柏烷二萜、赖百当二萜、蔗糖酯类化合物。目前发现的烟草西柏烷二萜达125种，烟草中含量最丰富的西柏烷二萜为西柏三烯二醇(α
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CBT
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diol、β
‑
CBT
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diol)及西柏三烯一醇(CBT
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ol)，达90％以上；顺
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冷杉醇是烟草最主要的赖百当类化合物，一般存在于香料烟中，一般栽培烤烟不含顺
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冷杉醇；栽培烤烟蔗糖酯类化合物根据分子量(622,636,650,664,678,692)的不同，一般被被分为6种类型(SE
Ⅰ‑
SE
Ⅵ
)。
[0004]在卷烟燃烧过程中，西柏烷二萜大部分发生热解，生成茄酮、降茄二酮等香味成分，茄酮、氧化茄酮赋予烟气一种酮味；烟草赖百当类降解产物降龙涎香醚、龙涎香内酯等具有强烈的龙涎香(柏木香气)香气的物质，被认为是导致香料烟特征香气的主要化合物；糖酯在烟草燃吸过程中可以热解释放出对烟气吸味有积极作用的低级羧酸，赋予烟气吸味芳香特征，能使烟气变得细腻、醇和。烟草腺毛分泌成分不仅是卷烟香气的重要前体物，西柏烷二萜还具有较好的抑菌、抗肿瘤、抗虫等活性，在植物源农药、医药方向具有较好开发价值。
[0005]烟草醚提物、腺毛分泌成分对卷烟香气品质均有重要影响，是烟叶香气品质评价的重要指标。系统测定烟草香气成分，明确不同品种、不同部位或不同生态、栽培条件对主要香气成分含量的影响，是烟叶质量评价的重要内容。
[0006]目前，醚提物测定一般参照行业标准《烟草及烟草制品石油醚提取物的测定(YC/T 176
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2003)》。GC
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MS法是目前烟草西柏三烯二醇检测的行业推荐标准方法，该方法需经过复杂的衍生化后反应，衍生化试剂成本较高，且容易造成色谱柱污染；近年来，利用液相色谱法测定西柏三烯二醇(α
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CBT
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diol、β
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CBT
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diol)含量的方法被提出，该方法操作简单、溶剂用量少，检测周期短，精密度和准确度均较高。目前有关西柏三烯一醇(CBT
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ol)含量测定报道较少。液相色谱法测定顺
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冷杉醇的方法(ZL 201710047317.4)被提出，目前有关烟草西柏三烯二醇、西柏三烯一醇与顺
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冷杉醇同时提取并测定的研究还未见报道。另外，蔗糖酯含量分析方法也被提出，该方法建立了一种以蔗糖八乙酸酯为内标，二氯甲烷超声提取N,O
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双(三甲基硅基)三氟乙酰胺衍生化，气相色谱/质谱法测定香料烟中的蔗糖酯(SE)含量的方法。综上所述，目前实验技术条件下，分别完成烟草醚提物及腺毛分泌主要成分(西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
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冷杉醇、蔗糖酯类)的测定，需要的工作量较大，工作周期长，
且存在较大的试剂浪费现象。
[0007]因此，亟需一种同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的是提供一种同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，以解决上述现有技术中的问题，能够同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌主要成分(西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
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冷杉醇、蔗糖酯类)，操作简单，检测效率高，减少溶剂浪费。
[0009]本专利技术提供了一种同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其中，包括：
[0010]采用石油醚提取烟草醚提物，并测定烟草石油醚提取物的含量；
[0011]利用乙醇溶液溶解烟草石油醚提取物中的腺毛分泌成分并除去高分子脂溶性杂质，得到腺毛分泌成分溶解液；
[0012]烟草腺毛分泌成分中二萜类致香成分含量的测定：定量移取所述腺毛分泌成分溶解液，用流动相稀释，利用液相色谱法同时测定烟草腺毛分泌成分中的西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
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冷杉醇的含量；
[0013]烟草腺毛分泌成分中蔗糖酯含量的测定：将剩余的腺毛分泌成分溶解液氮吹至干，衍生化后气质联用仪测定烟草腺毛分泌成分中的蔗糖酯含量。
[0014]如上所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其中，优选的是，所述采用石油醚提取烟草醚提物，并测定烟草石油醚提取物的含量，具体包括：
[0015]参照行业标准YC/T 176
‑
2003采用30℃
‑
60℃的石油醚提取烟草醚提物；
[0016]提取完成后，在35℃
‑
45℃条件下进行减压旋蒸，以除去溶剂；
[0017]擦干旋蒸瓶外部的水分，放入干燥器中干燥至恒重，称重，并计算烟草石油醚提取物的含量。
[0018]如上所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其中，优选的是，所述利用乙醇溶液溶解烟草石油醚提取物中的腺毛分泌成分并除去高分子脂溶性杂质，得到腺毛分泌成分溶解液，具体包括：
[0019]完成烟草石油醚提取物的称重及含量测定后，加入体积浓度为80％
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85％的乙醇溶液；
[0020]在常温条件下，通过超声溶解烟草石油醚提取物；
[0021]将石油醚提取物的溶解液转入容量瓶中，连续溶解2
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4次，定容，待测。
[0022]如上所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其中，优选的是，在烟草腺毛分泌成分中二萜类致香成分含量的测定中，所述定量移取所述腺毛分泌成分溶解液，用流动相稀释，利用液相色谱法同时测定烟草腺毛分泌成分中的西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
‑
冷杉醇的含量，具体包括：
[0023]定量移取所述腺毛分泌成分溶解液，用体积浓度为80％
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85％的乙腈溶液进行稀释；
[0024]在液相色谱梯度洗脱条件下利用DAD检测器检测烟草腺毛分泌成分中的西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
‑
冷杉醇的含量。
[0025]如上所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其中，优选的是，
在所述液相色谱梯度洗脱条件下，液相色谱条件为：超高效液相色谱仪，分析柱为ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱，规格为2.1mm...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其特征在于，包括：采用石油醚提取烟草醚提物，并测定烟草石油醚提取物的含量；利用乙醇溶液溶解烟草石油醚提取物中的腺毛分泌成分并除去高分子脂溶性杂质，得到腺毛分泌成分溶解液；烟草腺毛分泌成分中二萜类致香成分含量的测定：定量移取所述腺毛分泌成分溶解液，用流动相稀释，利用液相色谱法同时测定烟草腺毛分泌成分中的西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
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冷杉醇的含量；烟草腺毛分泌成分中蔗糖酯含量的测定：将剩余的腺毛分泌成分溶解液氮吹至干，衍生化后气质联用仪测定烟草腺毛分泌成分中的蔗糖酯含量。2.根据权利要求1所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其特征在于，所述采用石油醚提取烟草醚提物，并测定烟草石油醚提取物的含量，具体包括：参照行业标准YC/T 176
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2003采用30℃
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60℃的石油醚提取烟草醚提物；提取完成后，在35℃
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45℃条件下进行减压旋蒸，以除去溶剂；擦干旋蒸瓶外部的水分，放入干燥器中干燥至恒重，称重，并计算烟草石油醚提取物的含量。3.根据权利要求2所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其特征在于，所述利用乙醇溶液溶解烟草石油醚提取物中的腺毛分泌成分并除去高分子脂溶性杂质，得到腺毛分泌成分溶解液，具体包括：完成烟草石油醚提取物的称重及含量测定后，加入体积浓度为80％
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85％的乙醇溶液；在常温条件下，通过超声溶解烟草石油醚提取物；将石油醚提取物的溶解液转入容量瓶中，连续溶解2
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4次，定容，待测。4.根据权利要求1所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺毛分泌成分的方法，其特征在于，在烟草腺毛分泌成分中二萜类致香成分含量的测定中，所述定量移取所述腺毛分泌成分溶解液，用流动相稀释，利用液相色谱法同时测定烟草腺毛分泌成分中的西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
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冷杉醇的含量，具体包括：定量移取所述腺毛分泌成分溶解液，用体积浓度为80％
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85％的乙腈溶液进行稀释；在液相色谱梯度洗脱条件下利用DAD检测器检测烟草腺毛分泌成分中的西柏三烯二醇、西柏三烯一醇、顺
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冷杉醇的含量。5.根据权利要求4所述的同时提取并测定烟草醚提物、腺...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝贤伟，毕一鸣，李奇，王辉，任志广，杨修峰，田雨农，杜咏梅，戴路，廖付，徐志强，慕继瑞，何文苗，李石头，李永生，钟永健，
申请(专利权)人：浙江中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：