用于胚胎干细胞扩增的组合物和方法技术

本文提供了使用包括微载体的可悬浮的扩增复合物扩增人胚胎干的方法和组合物。增复合物扩增人胚胎干的方法和组合物。增复合物扩增人胚胎干的方法和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于胚胎干细胞扩增的组合物和方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年8月10日提交的美国临时申请号63/063,942的权益，出于所有目的将其全部内容通过引用并入本文。
[0003]背景
[0004]人胚胎干细胞(hESC)具有自我更新的基本特性，这使它们成为无限的细胞来源，并使工业规模的细胞治疗计划成为可能。它们的多能发育潜力使它们成为大多数细胞治疗产品的细胞来源。
[0005]hESC临床应用的一个关键要求是提供大量hESC衍生的治疗性细胞。这些治疗性细胞的生产从在符合现行良好生产规范(cGMP)的情况下解冻合格细胞库(例如主细胞库(MCB)或工作细胞库(WCB))的细胞开始。细胞库的质量在hESC生物加工中起着重要作用，因为它影响解冻后hESC扩增、后续谱系特异性分化的效率和加工可重复性。
[0006]制造这样的细胞库是劳动密集型的，通常需要手动细胞操作，并且由于几种关键原材料例如饲养细胞、非重组基质、血清和其他的成分未完全确定的材料的使用，存在批次间变异。
[0007]概述
[0008本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于扩增和维持处于未分化、多能状态的人胚胎干细胞(hESC)的方法，所述方法包括以下步骤：(a)在生长培养基中同时组合人胚胎干细胞、细胞外基质成分(ECM)和微载体以形成可悬浮的扩增复合物，和(b)将可悬浮的扩增复合物培养一段时间。2.权利要求1的方法，其中所述微载体包括聚苯乙烯、交联葡聚糖、磁性颗粒、微芯片、纤维素、羟基化甲基丙烯酸酯、胶原蛋白、明胶、聚苯乙烯、塑料、玻璃、陶瓷、硅酮或其组合中的一种或多种。3.权利要求1或2的方法，其中所述微载体是球形的、光滑的、大孔的、棒状的或其组合。4.权利要求1至3中任一项的方法，其中所述ECM包括基质胶、层粘连蛋白、玻连蛋白、胶原蛋白、它们的衍生物或其组合。5.权利要求1的方法，其中所述ECM是人层粘连蛋白。6.权利要求5的方法，其中所述人层粘连蛋白是人层粘连蛋白511E8片段。7.权利要求1至3中任一项的方法，其中所述微载体是未经包被的。8.权利要求1至7中任一项的方法，其中所述微载体与鱼精蛋白或聚赖氨酸偶联。9.权利要求1至7中任一项的方法，其中所述微载体是中性的或带负电的。10.权利要求9的方法，其中所述微载体是中性的。11.权利要求9的方法，其中所述微载体是带负电的。12.权利要求1至11中任一项的方法，其中所述微载体是亲水的。13.权利要求1至12中任一项的方法，其中将所述可悬浮的扩增复合物培养至少约一天。14.权利要求13的方法，其中将所述可悬浮的扩增复合物培养约一天至约十四天。15.权利要求1的方法，其中收获可悬浮的扩增复合物的培养细胞并通过重复步骤(a)和(b)进一步扩增。16.权利要求1的方法，其中收获可悬浮的扩增复合物的培养细胞并进一步分化。17.权利要求16的方法，其中通过改变生长培养基进一步分化可悬浮的扩增复合物的培养细胞。18.权利要求1的方法，其中所述可悬浮的扩增复合物的培养细胞保持未分化和多能性。19.权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：里拉驰，
申请(专利权)人：里拉驰，
类型：发明
国别省市：