一株乳杆菌及其在果酒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种瑞士乳杆菌菌株LactobacillushelveticusHSCY2050，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM20221830，保藏日期为2022年11月28日。将LactobacillushelveticusHSCY2050以1

【技术实现步骤摘要】
一株乳杆菌及其在果酒中的应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一株可耐受果酒且能够在果酒中长时间存活的瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus HSCY2050)。

技术介绍

[0002]果酒不仅保留了果实的风味及营养，而且具有缓解疲劳、舒筋活血、强身健体、提神驱寒、降胆固醇、抗衰老、降低心脑血管疾病发病率等功效，发展前景十分广阔。随着社会的发展和人们生活水平的提高，现代的人们越来越注重生活品质，人们开始关注养生保健的问题。因此，在保证果酒风味品质的前提下，若能提高果酒的益生性能，将会大大地提升产品的市场竞争力。
[0003]近几年，我国微生物研究发展迅速，有效发挥了益生菌在促进人类疾病预防和维持身体健康等方面的功效。人们也越来越重视益生菌的作用，因此研究和探讨益生菌在食品中的应用具有非常重要的现实意义。现阶段，乳酸菌是被人们发现并广泛使用的一种益生菌，因其能够将碳水化合物发酵成乳酸而得名。大量研究表明，乳酸菌具有促进人体的消化吸收、调节肠道菌群平衡、改善肠道健康、调节免疫等功能。因此，制备一种富含活性乳酸菌的果酒对增强果酒的益生性能十分有帮助。
[0004]但是，果酒中富含乙醇、乙酸和高级醇等抑制乳酸菌菌体存活或生长的物质，这使得乳酸菌很难在果酒中长时间存活。因此，急需找到一株可耐受果酒且能够在果酒中长时间存活的乳酸菌，使得富含活性乳酸菌的果酒的制备成为可能。

技术实现思路

[0005]为解决上述技术问题，本法明提供一株可耐受果酒且能够在果酒中长时间存活的乳酸菌，使得富含活性乳酸菌的果酒的制备成为可能，从而增强果酒的益生性能。
[0006]具体地，本专利技术第一方面提供了一株瑞士乳杆菌HSCY2050，所述菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 20221830，保藏日期为2022年11月28日。
[0007]本专利技术第二方面提供了一种微生物菌剂，所述微生物菌剂包含本专利技术第一方面1所述的瑞士乳杆菌HSCY2050。
[0008]本专利技术第三方面提供了本专利技术第一方面所述的瑞士乳杆菌HSCY2050、本专利技术第二方面所述的微生物菌剂在制酒中的应用。
[0009]在某些实施方式中，所述酒为果酒。
[0010]本专利技术第四方面提供了一种酒，所述酒含有本专利技术第一方面所述的瑞士乳杆菌HSCY2050。
[0011]在某些实施方式中，所述酒中HSCY2050的活菌含量不低于7
×
106CFU/mL。
[0012]在某些实施方式中，所述酒为果酒。
[0013]本专利技术第五方面提供了一种果酒的制备方法，所述方法包括将本专利技术第一方面所述的瑞士乳杆菌HSCY2050、本专利技术第二方面所述的微生物菌剂添加至酒中。
[0014]在某些实施方式中，所述酒为果酒。
[0015]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0016]本专利技术提供了一株可耐受果酒的瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus HSCY2050，将此瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus HSCY2050以1
×
109CFU/mL的浓度添加至果酒中于4℃下保存30d后，果酒中Lactobacillus helveticus HSCY2050的活菌数仍可高达7.43
×
106CFU/mL，因此，本专利技术的瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus HSCY2050在制备富含活性乳酸菌的果酒中具备极高的应用前景。
附图说明
[0017]通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本专利技术的其它特征、目的和优点将会变得更显著：
[0018]图1为本专利技术的瑞士乳杆菌HSCY2050的平板培养菌落形态；
[0019]图2为本专利技术的瑞士乳杆菌HSCY2050的结晶紫染色的菌体形态。
具体实施方式
[0020]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例的附图，对本专利技术实施例的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于所描述的本专利技术的实施例，本领域普通技术人员在无需创造性劳动的前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0021]除非另作定义，此处使用的技术术语或者科学术语应当为本专利技术所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。本专利技术专利申请说明书以及权利要求书中使用的“第一”、“第二”以及类似的词语并不表示任何顺序、数量或者重要性，而只是用来区分不同的组成部分。同样，“一个”或者“一”等类似词语也不表示数量限制，而是表示存在至少一个。
[0022]实施例1瑞士乳杆菌HSCY2050的分离、纯化及鉴定
[0023](1)菌株的分离与纯化
[0024]称取镇江香醋醋醅样品10g，置于90mL已灭菌的MRS液体培养基中，温度37℃、转速200r/min，振荡培养20min后，对样品进行10倍梯度稀释，选取稀释梯度为10
‑3、10
‑4、10
‑5和10
‑6的稀释液，各梯度稀释液各吸取100μL涂布MRS培养基平板，37℃倒置培养48h。挑取MRS培养基平板上产透明圈较大的菌落，将单个菌落平板划线分离3次获得纯培养物，4℃冰箱保存以供试用。其中，MRS液体培养基：胰蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母膏5.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，葡萄糖20.0g，吐温80 1.0mL，乙酸钠5.0g，磷酸氢二钾2.0g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，碳酸钙20.0g，蒸馏水1000mL，pH 6.2～6.6，115℃灭菌20min。MRS固体培养基附加琼脂18.0g/L。
[0025](2)菌株的酒精耐受性试验
[0026]将活化好的菌液按5％的比例接种于灭菌后的酒精浓度分别为0，3％，6％，9％，12％，15％的MRS培养基中，静止培养发酵5d。在分光光度计波长600nm处测定菌液的OD值。在酒精浓度为15％的MRS培养基中菌株仍能生长，OD
600
＝0.428。
[0027](3)菌株形态学鉴定
[0028]图1为本专利技术的瑞士乳杆菌HSCY2050的平板培养菌落形态。菌株HSCY2050在37℃
培养48h后，平板上的菌落形态为乳白色、圆形、凸起、光滑、不透明、湿润、易挑取。图2为本专利技术的瑞士乳杆菌HSCY2050的结晶紫染色的菌体形态。在显微镜下观察菌体形态为长杆状，单独、成对或短链排列，从菌落形态和菌体形态上初步判断为一种乳杆菌。
[0029](4)菌株分子生物学鉴定
[0030]纯化筛选得到的细菌，取指数生长期的新鲜菌液，离心收集菌体，采用基因组抽提试剂盒提取基因组DNA。采用细菌通用引物P0
‑
P6(中国硕士学位论文全文数据库，朱其瀚，“镇江香醋发酵过本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株瑞士乳杆菌HSCY2050，其特征在于，所述瑞士乳杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 20221830，保藏日期为2022年11月28日。2.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂包含权利要求1所述的瑞士乳杆菌HSCY2050。3.权利要求1所述的瑞士乳杆菌HSCY2050、权利要求2所述的微生物菌剂在制酒中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述酒为果酒。5.一种酒，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：张俊红，李信，吴玲玲，陆荣松，朱杰，张豹，李文婷，乔昕，刘洋，
申请(专利权)人：江苏恒顺集团有限公司，
类型：发明
国别省市：