抗FCRH5抗体制造技术

本发明专利技术提供了抗FcRH5抗体和免疫缀合物以及使用它们的方法。及使用它们的方法。

【技术实现步骤摘要】
抗FCRH5抗体
[0001]本申请是基于申请日为2014年6月24日，优先权日为2013年6月24日，申请号为201480045475.0，专利技术名称为“抗FCRH5抗体”的专利申请的分案申请。
[0002]相关申请
[0003]本申请根据35 U.S.C.
§
119要求2013年6月24日提交的美国临时专利申请第61/838,534号的权益，该申请的公开内容在此以引用方式整体并入。
[0004]序列表
[0005]本申请包含序列表，该序列表呈ASCII格式并在此以引用的方式整体并入。ASCII文本文件创建于2014年6月9日，命名为GNE
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0413WO_SL.txt且大小为67,909个字节。
专利

[0006]本文提供了抗FcRH5抗体(例如双特异性抗体)和免疫缀合物和使用它们的方法。
[0007]背景
[0008]Fc受体样5(FcRL5，也称为FcRH5和IRTA2)属于免疫球蛋白超家族(IgSF)的最近鉴定的6个基因的家族。该基因家族与具有保守基因组结构、细胞外Ig结构域组成以及ITIM样和ITAM样信号传导基序的Fc受体紧密相关(Davis RS等人，Eur J Immunol(2005)35:674
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80)。这个家族的成员还被称为IFGP(来自Ig超家族，FcR，gp42)和SPAP(含SH2结构域的磷酸酶锚定蛋白)。已经描述了FcRH/IRTA受体家族的六个成员：FcRH1/IRTA5、FcRH2/IRTA4、FcRH3/IRTA3、FcRH4/IRTA1、FcRH5/IRTA2和FcRH6(Polson AG等人，Int.Immunol.(2006)18(9):1363
‑
1373)。所有FcRH/IRTA都含有基于典型的免疫受体酪氨酸抑制基序和
‘
基于免疫受体酪氨酸的活化基序样
’
信号传导基序的一些组合。FcRH cDNA编码I型跨膜糖蛋白，其具有多个Ig样细胞外结构域和含有基于共有免疫受体酪氨酸的活化和/或抑制信号传导基序的细胞质结构域。FcRH基因是结构相关的，且它们的蛋白质产物彼此共有28
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60％的细胞外同一性。它们还与其最亲密的FcR相关物共有15
‑
31％的同一性。在不同的FcRH之间存在高度同源性。
[0009]FcRH5的配体是未知的，但FcRH5已在抗原致敏B细胞的发展期间参与增强的增殖和下游同种型表达(Dement
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Brown J.等人J Leukoc Biol(2012)91:59
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67)。FcRH5基因座具有三个主要的mRNA同种型(FcRH5a、FcRH5b和FcRH5c)。由这些转录物编码的主要FcRH5蛋白质同种型共有直至残基560的共同氨基酸序列，特征是常见信号肽和六个细胞外Ig样结构域。FcRH5a表示759个氨基酸的分泌糖蛋白，其具有八个Ig样结构域，随后是位于其C端的13个独特的主要为极性的氨基酸。FcRH5b在氨基酸残基560处相异于FcRH5a并且延伸一小段的32个额外残基，其疏水性与其经由GPI锚停靠至质膜是相容的。FcRH5c是最长的同种型，其序列在氨基酸746处相异于FcRH5a。FcRH5c编码977个氨基酸的I型跨膜糖蛋白，其具有九个细胞外Ig型结构域(拥有八个潜在的N
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连接型糖基化位点)、23个氨基酸的跨膜及的104个氨基酸的细胞质结构域(与ITIM共有序列具有三个共有SH2结合基序)。
[0010]FcRH基因一起聚簇在1号染色体的1q21
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23区域中的经典FcR基因(FcγRI、FcγRII、FcγRIII和FcεRI)的中部。该区域含有与造血性肿瘤尤其是多发性骨髓瘤中的恶性表
型相关的最常见的二级染色体异常之一(Hatzivassiliou G.等人Immunity(2001)14:277
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89)。FcRH5只在B细胞谱系中表达，最早始于前B细胞，但直至成熟B细胞阶段才实现完全表达。与最常见的其它B细胞特异性表面蛋白质(例如CD20、CD19和CD22)不同，FcRH5继续在浆细胞中表达，而其它B细胞特异性标记物被下调(Polson AG等人，Int Immunol(2006)18:1363
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73)。另外，FcRH5 mRNA在多发性骨髓瘤细胞系中过度表达，且通过寡核苷酸阵列检测到1q21异常(Inoue J.,Am J Pathol(2004)165:71
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81)。该表达模式表明FcRH5可以成为用于治疗多发性骨髓瘤的基于抗体疗法的标靶。多发性骨髓瘤是浆细胞的恶性肿瘤，其特征为骨骼病变、肾衰竭、贫血和高钙血症。它基本上无法通过当前疗法治愈。多发性骨髓瘤的当前药物治疗包括蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Velcade)、免疫调节剂来那度胺(Revlimid)和类固醇地塞米松(dexamethasone)的组合。
[0011]基于FcRH5c特异性抗体的疗法和检测方法可以是特别有效的，因为它们特异性识别靶细胞、膜相关的FcRH5，而不是识别FcRH5的可溶性和膜同种型二者的抗体。然而，只有FcRH5的最后一个Ig样结构域(Ig样结构域9)是FcRH5的三个主要同种型之间有区别的独特细胞外区域，且在FcRH5内的Ig样结构域之间有显著的同源性。另外，最后一个Ig样结构域在FcRH1、FcRH2、FcRH3和FcRH5之间是高度保守的。特异性靶向FcRH5的任何基于抗体的疗法将必须与其它FcRH具有最低的交叉反应性，以避免不利的脱靶效应(例如FcRH3在正常NK细胞上表达)。在本领域中需要有助于诊断和治疗癌症例如FcRH5相关的癌症的药剂。
[0012]概要
[0013]本文提供了抗FcRH5抗体(包括双特异性抗体)、免疫缀合物和使用它们的方法。本文提供了经分离的抗FcRH5抗体，其结合FcRH5c的细胞外结构域的同种型c特异性区。在一些实施方案中，该同种型c特异性区包含Ig样结构域9。在一些实施方案中，该同种型c特异性区包含SEQ ID NO:1的氨基酸743
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850。
[0014]在一些实施方案中，所述抗体包含：a)重链，其包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的HVR
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H1、含有SEQ ID NO:62的氨基酸序列的HVR
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H2和含有SEQ ID NO:86的氨基酸序列的HVR
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H3；和/或b)轻链，其包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的HVR
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L1、含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的HVR
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L2和含有SEQ ID NO:26的氨基酸序列的HVR
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L3。在一些实施方案中，所述重链包含含有SEQ ID NO:50的氨基酸序列的HVR
‑<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的抗FcRH5抗体，其结合FcRH5c的细胞外结构域的同种型c特异性区。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述同种型c特异性区包含Ig样结构域9。3.根据权利要求1
‑
2中任一项所述的抗体，其中所述同种型c特异性区包含SEQ ID NO:1的氨基酸743
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850。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含：a)重链，其包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的HVR
‑
H1、含有SEQ ID NO:62的氨基酸序列的HVR
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H2和含有SEQ ID NO:86的氨基酸序列的HVR
‑
H3；和/或b)轻链，其包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的HVR
‑
L1、含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的HVR
‑
L2和含有SEQ ID NO:26的氨基酸序列的HVR
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L3。5.根据权利要求4所述的抗体，其中所述重链包含含有SEQ ID NO:50的氨基酸序列的HVR
‑
H1、含有SEQ ID NO:74的氨基酸序列的HVR
‑
H2和含有SEQ ID NO:98的氨基酸序列的HVR
‑
H3。6.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含：a)重链，其包含含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的HVR
‑
H1、含有SEQ ID NO:63的氨基酸序列的HVR
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H2和含有SEQ ID NO:87的氨基酸序列的HVR
‑
H3；和/或b)轻链，其包含含有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的HVR
‑
L1、含有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的HVR
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L2和含有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的HVR
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：小艾伦J埃本斯，MC黑曾，JA杭戈，JW约翰斯顿，TT琼蒂拉，J李，AG波尔森，
申请(专利权)人：基因泰克公司，
类型：发明
国别省市：