用于基于缀合物进行细胞染色的明亮且可释放标记制造技术

本发明专利技术涉及一种具有通式(I)Yn

【技术实现步骤摘要】
用于基于缀合物进行细胞染色的明亮且可释放标记


[0001]本专利技术公开了一种用于通过用具有检测部分和抗原识别部分的缀合物标记靶细胞来进行细胞检测的方法，所述检测部分和所述抗原识别部分经由两个不同的可酶促降解的间隔子进行连接。

技术介绍

[0002]在研究应用和临床应用中，细胞分析技术和细胞分离技术(如荧光显微镜术、流式细胞术和细胞分选)是用于从生物标本详细分析和特异性分离靶细胞的关键技术。这依赖于通过荧光缀合物对表位进行荧光标记。
[0003]关于使用常规的荧光缀合物进行细胞标记，存在若干个技术局限性，其中包括：
‑
获得缀合物的高荧光亮度，以便能够检测很少表达的表位。
‑
从表位释放标记，以便能够进行下游应用，如顺序成像或细胞分选等。
[0004]特别是对于利用高多路复用潜力来绘制例如蛋白质网络的基于标记
‑
检测
‑
消除顺序周期的技术，消除荧光信号是必不可少的。
[0005]在过去几年中，开发了可释放标记的若干种方法。例如，EP3037821A1公开本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有通式(I)Y
n
‑
P1(P2
‑
X
m
)
o
的缀合物，其中X是检测部分，P1是第一可酶促降解的间隔子，P2是第二可酶促降解的间隔子，Y是抗原识别部分，并且n、m、o是1到100之间的整数，条件是第一间隔子P1和第二间隔子P2不可被同一种酶降解。2.根据权利要求1所述的缀合物，其特征在于，第一间隔子P1和第二间隔子P2选自由以下组成的组：多糖、蛋白质、肽、缩肽、聚酯、核酸，条件是第一间隔子P1和第二间隔子P2不选自所述组的同一成员。3.根据权利要求1或2所述的缀合物，其特征在于，所述抗原识别部分Y是抗体、片段化的抗体、片段化的抗体衍生物、靶向TCR分子的肽/MHC配合物、细胞粘附受体分子、共刺激分子的受体、或人工工程化的结合分子。4.根据权利要求1至3中任一项所述的缀合物，其特征在于，所述检测部分选自由以下组成的组：发色团部分、荧光部分、磷光部分、发光部分、吸光部分、放射性部分、过渡金属和同位素质量标签部分。5.一种用于检测生物标本样品中的靶标部分的方法，其特征在于：a)提供具有通式(I)Y
n
‑
P1(P2
‑
X
m
)
o
的至少一种缀合物，其中X是检测部分，P1是第一可酶促降解的间隔子，P2是第二可酶促降解的间隔子，Y是抗原识别部分，并且n、m、o是1到100之间的整数；b)使所述生物标本样品与至少一种缀合物接触，由此标记通过所述抗原识别部分Y识别的所述靶标部分；c)用所述检测部分X检测标记有所述缀合物的所述靶标部分；以及d)通过提供能够降解第一间隔子P1的第一酶和/或能够降解第二间隔子酶P2的第二酶来酶促降解第一间隔子P1和/或第二P2，由此从所述缀合物裂解所述检测部分X，其中所述第一酶不能够降解第二间隔子P2，并且所述第二酶不能够降解第一间隔子P1。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，通过酶促降解第一间隔子P1和第二间隔子P2，从所述靶...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：美天施生物科技有限两合公司，
类型：发明
国别省市：