用于确定与荧光团偶联的分子结合剂的动力学结合参数的方法。对抗原的重复染色和发射辐射的检测生成滴定系列。该滴定系列内发射辐射的拟合允许确定动力学结合参数。使用相机检测该发射辐射，并且使用全局分析的单像素拟合，允许区分每个像素中特异性结合信号与非特异性背景。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种用于测量分子结合剂与其靶表位的动力学结合参数且用于区分特异性结合与背景的方法。
技术介绍
1、用于测量分子结合剂与其靶表位的动力学结合参数的最先进的方法是基于该靶表位的纯化，以在体外分离相互作用。通常，分子与其靶表位的结合是通过将该靶表位固定在玻璃基板上以无标记物的方式监测的，经由在该玻璃基板的表面等离振子共振(spr)的变化，测量该分子结合剂的结合速率常数和解离速率常数(例如，bakhtiar,j chem ed 90,203,2012)。具体地，将空白缓冲剂(empty buffer)施加于样品，然后，用含有特定浓度的分子结合剂的缓冲剂快速置换，以确定结合速率常数kon，根据质量作用将其定义为，将与该分子结合剂结合的表位浓度b的变化速率与未结合的分子结合剂的浓度a和未结合靶表位的浓度e的积联系起来的比例常数：然后，通常允许样品达到平衡结合，以确定解离常数。然后，用空缓冲剂快速置换该缓冲剂，允许独立地确定解离速率常数，该解离速率常数被定义为，将结合的表位的浓度变化速率与结合的表位的浓度联系起来的比例常数：
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【技术保护点】
1.一种用于确定包含荧光检测部分和抗原结合部分的偶联物的特异性结合的结合速率常数的方法，所述偶联物施加于表达相应抗原的固定的生物样品，其特征在于以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，确定所述固定的生物样品的所述图像的每个对齐的像素中特异性结合和背景结合对所述发射辐射的贡献。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征进一步在于，在步骤d之前，进行以下步骤：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征进一步在于，在步骤f中：
6.根据权利要求1至4中任一项...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于确定包含荧光检测部分和抗原结合部分的偶联物的特异性结合的结合速率常数的方法，所述偶联物施加于表达相应抗原的固定的生物样品，其特征在于以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，确定所述固定的生物样品的所述图像的每个对齐的像素中特异性结合和背景结合对所述发射辐射的贡献。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：
4.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·金哈布瓦拉，
申请(专利权)人：美天施生物科技有限两合公司，
类型：发明
国别省市：
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