解淀粉芽孢杆菌来源的pH诱导型启动子及其应用制造技术

本发明专利技术公开了解淀粉芽孢杆菌内源pH诱导型启动子，属于合成生物学领域。本发明专利技术运用基因工程手段，从解淀粉芽孢杆菌基因组中筛选获得了10个不同表达强度的内源启动子，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～10所示。并通过电击转化的方式使带有启动子的报告基因成功在解淀粉芽孢杆菌中表达。通过进一步筛选最终筛选获得了4种受碱性环境(pH 8.0)诱导的本源启动子。最终筛选的本源启动子响应范围在2

【技术实现步骤摘要】
解淀粉芽孢杆菌来源的pH诱导型启动子及其应用


[0001]本专利技术涉及解淀粉芽孢杆菌来源的pH诱导型启动子及其应用，属于生物


技术介绍

[0002]解淀粉芽孢杆菌作为芽孢杆菌属模式生物，由于其快速的生长速率被广泛应用于基础研究。又因其具有强大的蛋白分泌能力和是食品安全微生物的特点，解淀粉芽孢杆菌在酶制剂、代谢工程、抗体和饲料用菌制剂的生产领域也具有重要的应用。但是，随着合成生物学的发展，这些现有的工具已经不能满足研究者的需求。因此，为了更加快捷的对解淀粉芽孢杆菌进行基因改造，研究者开发了许多实用的基因调控表达工具。为扩展解淀粉芽孢杆菌遗传操作工具和拓展其应用范围，以往研究者对IPTG、木糖、四环素、蔗糖等化学物质响应的诱导型启动子进行了深入研究，并将其应用于严谨诱导表达系统的构建。考虑到简化操作的步骤和避免诱导剂的添加，一些响应于特殊环境条件，如高pH、低溶氧、高温和高渗透压的新型启动子也开始应用于表达系统的构建。大多数的解淀粉芽孢杆菌发酵过程并不适合严苛的环境条件，构建自诱导表达系统具有更好的应用前景。因此，在解淀粉芽孢杆菌中构建本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.pH诱导型启动子，其特征在于，具有如SEQ ID NO.1～10任一所示的核苷酸序列。2.含有权利要求1所述pH诱导型启动子的重组表达载体。3.含有权利要求2所述重组表达载体的微生物细胞。4.根据权利要求3所述的微生物细胞，其特征在于，所述微生物细胞为细菌细胞或真菌细胞。5.根据权利要求4所述的微生物细胞，其特征在于，所述细菌包括但不限于：大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)或解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。6.一种调控目的蛋白表达量的方法，其特征在于，将编码目的蛋白的基因连接至权利要求1所述的pH诱导型启动子的下游，将含有所述基因的微生物在培养基中培养，并在pH5.0～8.0的环境下诱导所述pH诱导型启动子启动目的基因的转...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗正山，徐虹，严一凡，朱逸凡，杜姗姗，李莎，王瑞，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：