一种肌钙蛋白I的检测方法及试剂盒制备方法技术

本发明专利技术的目的在于提供一种肌钙蛋白I的检测方法及试剂盒制备方法，其灵敏度高且能快速给出检测结果，用于心肌损伤等相关疾病的快速准确诊断，满足临床对于结果和检测时间的要求，其特征在于：所述检测方法包括以下步骤：步骤1、进行加样：加入50μL被测样本和60μL的cTnI检测抗体试剂到微孔中；步骤2、进行孵育：在37℃的温度下，将被测样本和cTnI检测抗体试剂一起孵育10min；步骤3、进行清洗：将350μL清洗液加入到微孔中，清洗四次，将未结合在固相上的抗体和被测样本被清除；步骤4、进行读数：加入化学发光底物A、化学发光底物B，酶催化底物发光，通过光电倍增器测量发光强度。通过光电倍增器测量发光强度。通过光电倍增器测量发光强度。

【技术实现步骤摘要】
一种肌钙蛋白I的检测方法及试剂盒制备方法


[0001]本专利技术属于肌钙蛋白I检测相关
，具体涉及一种肌钙蛋白I的检测方法及试剂盒制备方法。

技术介绍

[0002]心肌肌钙蛋白(cardiac troponin，cTn)是一种调节心肌收缩的蛋白质分子，心肌细胞损伤时，肌钙蛋白就很快被释放入血液，血液中的浓度会持续升高，有非常好的心脏损伤特异性，是诊断急性心肌梗死(AMI)以及对心脏疾病进行危险分层的良好标志物。高敏感心肌肌钙蛋白(hs—cTn)是指用高敏感方法测定cTn。心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌纤维上专有的收缩蛋白，分子量为24,000Da，它是肌钙蛋白三个亚单位之一(I，T，C)，它和原肌球蛋白一起通过肌原纤维的肌丝与肌动蛋白结合。cTnI有两种形式，一种为游离的肌钙蛋白I，一种为与肌钙蛋白C、T或同时与C、T结合而成的二联或三联复合物。
[0003]cTnI目前虽然是心肌损伤诊断的金标准，因其于AMI后5
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8h血清水平才开始升高，因此该指标不能对AMI进行更早期的诊断。hs/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肌钙蛋白I的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括以下步骤：步骤1、进行加样：加入测样本和cTnI检测抗体试剂到微孔中；所述cTnI检测抗体试剂具体为含6.05g/L Tris、10g/L牛血清白蛋白、1g/L Procolin 300、1g/L Tween20、0.4g/L ANS、10mg/L铁氰化钾，pH7.5的水溶液与终浓度为0.5mg/L辣根过氧化物酶标记的cTnI抗体相混合；步骤2、进行孵育：将被测样本和cTnI检测抗体试剂一起孵育；步骤3、进行清洗：将清洗液加入到微孔中，将未结合在固相上的抗体和被测样本清除；步骤4、进行读数：加入化学发光底物A、化学发光底物B，酶催化底物发光，通过光电倍增器测量发光强度；步骤5、利用已知浓度的定标品绘制发光强度标准曲线，根据步骤4得到的发光强度对照所述发光强度标准曲线，计算得出待测样本中的肌钙蛋白I含量。2.根据权利要求1所述的一种肌钙蛋白I的检测方法，其特征在于：所述微孔为生物素化cTnI捕获抗体偶联的链霉亲和素包被微孔。3.根据权利要求1所述的一种肌钙蛋白I的检测方法，其特征在于：所述化学发光底物A为含有0.4％鲁米诺，pH9.0的水溶液；所述化学发光底物B为含有0.06％四硼酸钠，pH5.0的水溶液。4.根据权利要求1所述的一种肌钙蛋白I的检测方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭超林，刘萌，任和，白仲虎，
申请(专利权)人：江苏拜明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：