载药的人血白蛋白联合单克隆抗体在制备药物组合物中的用途制造技术

本发明专利技术涉及载药的人血白蛋白联合单克隆抗体在制备药物组合物中的用途。本发明专利技术针对endoglin制备了特异性的单克隆抗体，该单克隆抗体能够有效的抑制大肠癌细胞的增殖以及能够通过抑制endoglin的活性来直接调节其下游的TGF

【技术实现步骤摘要】
载药的人血白蛋白联合单克隆抗体在制备药物组合物中的用途


[0001]本申请涉及生物领域，更具体的涉及一种载药的人血白蛋白联合单克隆抗体在制备药物组合物中的用途。

技术介绍

[0002]大肠癌是常见的恶性肿瘤，包括结肠癌和直肠癌。大肠癌的发病率从高到低依次为直肠、乙状结肠、盲肠、升结肠、降结肠以及横结肠，近年有向近端(右半结肠)发展的趋势。其发病与生活方式、遗传、大肠腺瘤等关系密切。发病年龄趋老年化，男女之比为1.65：1。目前我国每年新发癌症病例约为312万例，平均每天确诊8550人，每分钟就有6人被诊断为癌症，有5人死于癌症。每年因癌症死亡病例达270万例。
[0003]在中国五大发病最高的肿瘤里面，消化道肿瘤占到四个，那么这四个消化道肿瘤里面，实际上胃癌，食管癌，肝癌的发病是趋于平稳。但是结直肠癌的发病率还是有明显的上升趋势。结直肠癌发病率上升迅速，白领人群尤其明显、且有年轻化趋势。结肠癌和直肠癌被统称为结直肠癌或者大肠癌。专家表示，结直肠癌发病率上升迅速，在北上广等大城市的白领人群中发病上升尤其明显，而且出现年轻化趋势，有科学家预测说，不久的将来结直肠癌的发病率可能超过肺癌及胃癌，成为癌症榜首。结直肠癌的年轻化，除了遗传因素外，城市化加剧和人群饮食结构改变也是重要原因，处在高强度工作压力下的都市白领尤其值得关注。
[0004]大肠癌发病机制的研究一般认为，大肠癌的发病机制比较复杂，遗传物质异常、基因异常、生活饮食习惯不健康等是导致大肠癌发生的主要原因。从遗传学的角度来看，大肠癌的发病主要表现为家族性腺瘤样息肉和遗传性非息肉大肠癌。腺瘤样息肉瘤基因具有抑制癌基因的功用，它的功能的丧失则会使p一钙连蛋白的水平上升，而β
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钙连蛋白水平的上升则直接诱导肿瘤的发生。遗传性非息肉大肠癌的发生则与配错修复系统缺陷有关。遗传性非息肉大肠癌是肿瘤的易感瘟候群，从目前的研究来看，配错修复相关基因的改变对肿瘤的形成有着很大的影响。Hmshl、Hmsh2、Hpsml、Hpsm2、GTBP基因的变化是诱发肿瘤的主要原因。除此之外，高脂肪低纤维素饮食、长期吸烟等也是大肠癌的病因。目前在市场上比较常见的结直肠癌化疗药物有5
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FU、卡倍他滨、奥沙利铂、伊立替康、西妥昔单抗、贝伐珠单抗、帕尼单抗等。其中主要的单抗类药物有西妥昔单抗、贝伐珠单抗、帕尼单抗。但是药物种类还不够丰富。
[0005]恶性实体肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤组织中新生血管的形成，肿瘤组织通过肿瘤血管获取营养物质、排泄代谢产物并向宿主输入肿瘤细胞，肿瘤血管与肿瘤生长、侵袭及转移密切相关，而CD
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又参与血管生成，是新生血管标志。由此可以预见CD
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在人类恶性肿瘤的诊断、预后、治疗方面发挥重要的作用。CD
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又名endoglin，为内皮细胞细胞膜表达的糖蛋白，是转化生长因子β受体复合物的成分之一，但能独立存在于细胞表面。CD
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endoglin通过参与TGF—β受体的信号转导，调节内皮.间质的信号传递，参与血管生成，在
肿瘤血管生成过程中发挥重要作用。肿瘤血管生长是肿瘤发生、生长及浸润转移的重要条件。CD
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endoglin为抗肿瘤血管治疗提供新的治疗靶点。抑制肿瘤血管生成或选择性破坏肿瘤血管的靶向治疗，是一种继传统手术、化疗、放疗后新的理想的肿瘤治疗方法。在小鼠实验中表明，以CD
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endoglin为作用靶点、抗CD
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endoglin抗体为载体，化疗药物、生物毒素、放射性核素等与之结合的复合物能够特异性导向肿瘤部位，直接杀伤肿瘤细胞，具有显著抑瘤效果，而无明显不良作用。在最近的CD
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为靶点的抗肿瘤血管的研究中，通过口服疫苗诱导CD8+细胞介导的免疫反应，有效地抑制了癌细胞系乳腺癌的肺转移，预示了抗肿瘤血管靶向治疗在将来乳腺癌治疗中的作用。由于抗血管生成治疗具有高效性、特异性、不易产生耐药和毒副作用小等优点，因而应用CD
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endoglin单克隆抗体联合化疗药物、生物毒素、放射性核素进行抗肿瘤治疗具有广阔的前景。
[0006]但是目前，针对endoglin单克隆抗体的研究还不够多，研究也不够充分，有待于进一步的开发相应的药物。

技术实现思路

[0007]本专利技术克服现有技术的缺陷，提供了一种治疗大肠癌的新方法。
[0008]一方面，本专利技术提供一种特异性针对endoglin的单克隆抗体。
[0009]一方面，本专利技术提供了针对endoglin的单克隆抗体F15，轻链可变区的氨基酸序列：
[0010]DLVMTQTAPSVPVTPGESVSISCRSTVCREMYDAWLWLYWFLQRPGQSPQLLIYQHCNLASGVPDRFSGSGSGTAFTLRISRVEAEDVGVYYCATGICLNGYFGSGTKLEIK
[0011]重链可变区的氨基酸序列：
[0012]VKPGGSLKLSCAASQSHDPMPRMSWVRQTPDKRLEWVAITIACYLGKYYPDSVKGRFTISRDQDKQTLYLQMSSLKSEDTAMYYCWGTKGICFVEEWGQGTTVTVS
[0013]本专利技术的另外一个方面，提供了针对endoglin的单克隆抗体在制备用于治疗大肠癌的药物组合物中的用途。
[0014]进一步的，所述大肠癌是人结直肠癌细胞系HCT116导致的。
[0015]人血清白蛋白(HSA)是人体内源性物质，又是疏水性分子的天然载体，而且HSA具特殊的转运机制，能大大提高与其结合的药物在肿瘤细胞的浓度。因此另外一方面，本专利技术还提供了白蛋白紫杉醇纳米粒子。
[0016]该纳米例子是将紫杉醇溶于丙酮，取一定量人白蛋白溶于水，药载比(药物/白蛋白摩尔比)设为10:1，搅拌条件下将紫杉醇丙酮溶液逐滴加入白蛋白水溶液中，继续搅拌6min后，旋蒸除去丙酮，加水定容后，高压均质即得白蛋白紫杉醇纳米粒子溶液。
[0017]另外一方面，本专利技术还提供了针对endoglin的单克隆抗体和白蛋白紫杉醇纳米粒子在制备用于治疗大肠癌的药物组合物中的用途。
[0018]进一步的，所述大肠癌是人结直肠癌细胞系HCT116导致的。
[0019]进一步的，白蛋白紫杉醇纳米粒子也可以采用本领域其他的常规制备方法来制备获得。
[0020]在一些实施方案中，所述药物组合物，其中所述抗体包含如下氨基酸序列：与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列有至少80％(例如81％、82％、83％、84％、85％、
86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同源性的可变区序列。
[0021]本专利技术的药物组合物，可用于向有需要的受试者施用。特别地，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种针对endoglin的单克隆抗体F15，其特征在于轻链可变区的氨基酸序列为：DLVMTQTAPSVPVTPGESVSISCRSTVCREMYDAWLWLYWFLQRPGQSPQLLIYQHCNLASGVPDRFSGSGSGTAFTLRISRVEAEDVGVYYCATGICLNGYFGSGTKLEIK重链可变区的氨基酸序列为：VKPGGSLKLSCAASQSHDPMPRMSWVRQTPDKRLEWVAITIACYLGKYYPDSVKGRFTISRDQDKQTLYLQMSSLKSEDTAMYYCWGTKGICFVEEWGQGTTVTVS。2.如权利要求1所述的endoglin的单克隆抗体F15在制备用于治疗结直肠癌的药物组...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹立烜，熊建勋，
申请(专利权)人：北京仁立竞合生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：