一种包含猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的融合蛋白及二联亚单位疫苗制造技术

本发明专利技术提供了一种包含猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的融合蛋白及二联亚单位疫苗，涉及兽用生物制品技术领域。本发明专利技术将E2、Fc和Cap蛋白融合表达，并在融合蛋白中加入TEV蛋白酶酶切基序。本发明专利技术还提供了包含所述融合蛋白的重组载体以及表达所述融合蛋白的重组细胞系，可利用一次表达过程，同时生产两种病毒的亚单位疫苗，纯化过程简单，利用商品化proteinA填料纯化蛋白，不需要蛋白复性、离子交换层析等复杂工艺。利用本发明专利技术所述融合蛋白形成的二联亚单位疫苗，猪瘟E2以二聚体形式存在，猪圆环病毒2型Cap蛋白以VLPs形式组成存在。在。在。

【技术实现步骤摘要】
一种包含猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的融合蛋白及二联亚单位疫苗


[0001]本专利技术属于兽用生物制品
，具体涉及一种包含猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的融合蛋白及二联亚单位疫苗。

技术介绍

[0002]猪瘟病毒(Swine fevervirus，CSFV)为有囊膜病毒，40～60nm，单股正链RNA。CSFV基因组长约123kb，仅含有一个大的开放性阅读框架(ORF)，此ORF翻译成含3898个氨基酸残基，分子量约438kDa的多聚蛋白，并进一步在病毒和宿主细胞蛋白酶的作用下加工为成熟蛋白。在结构蛋白中，最具有免疫防治研究价值的是E0和E2，尤其是E2蛋白是目前亚单位疫苗首选蛋白。
[0003]E2蛋白为囊膜糖蛋白，是病毒主要的抗原蛋白，也是三个病毒糖蛋白中保守性最低、最易变异的分子。E2蛋白常以100kDa的同源二聚体形式存在于病毒粒子及猪瘟病毒感染的细胞表面。E2蛋白可诱导产生抗病毒的中和抗体，Hulst用E2双相油包水乳剂免疫猪，能抵抗100LD50 CSFVBrescia毒株强毒的攻击。E2蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包含猪瘟病毒E2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的结构从N端到C端包括：信号肽、去掉C端胞内区的猪瘟病毒E2蛋白、Fc、TEV酶切基序和猪圆环病毒2型Cap蛋白。2.根据权利要求1所述融合蛋白，其特征在于，所述信号肽的来源包括小鼠IgG kappa链信号肽和/或家蚕免疫球蛋白信号肽；所述Fc的来源包括猪IgG Fc。3.一种利用CHO细胞表达的权利要求1或2所述融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的结构从N端到C端包括：小鼠IgG kappa链信号肽、去掉C端胞内区的猪瘟病毒E2蛋白、猪IgG Fc、TEV酶切基序和猪圆环病毒2型Cap蛋白；所述小鼠IgG kappa链信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述去掉C端胞内区的猪瘟病毒E2蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述猪IgG Fc的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述TEV酶切基序的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述猪圆环病毒2型Cap蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。4.一种利用昆虫细胞表达的权利要求1或2所述融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的结构从N端到C端包括：家蚕免疫球...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雪峰，康斌，武玉梅，董鹏，张金龙，赵炳武，李少丽，王家福，
申请(专利权)人：金河佑本生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：