【技术实现步骤摘要】
一种用于强化光合细菌产氢的纳米硒生物制剂及其应用
[0001]本专利技术属于生物制剂
,特别涉及一种用于强化光合细菌产氢的纳米硒生物制剂及其应用。
技术介绍
[0002]氢能源作为未来的主要环保型能源,已经引起人们的高度重视。作为氢能源的制备方法之一,生物制氢技术由于其具有制氢原料易得、与废水、废弃物处理项目相结合等优点受到广泛地关注。
[0003]然而,生物制氢通常在大规模工艺水平上受限制,这影响了其商业应用。因此,研究者们研究了各种加强工艺,例如:改进反应条件以提高有机底物的利用度、优化工艺参数以提高制氢速率、应用合成生物学和基因工程方法提高氢气产量。然而上述方法是费力耗时的,并且增加了制氢成本。
技术实现思路
[0004]为解决上述技术问题,本专利技术提供了一种用于强化光合细菌产氢的纳米硒生物制剂及其应用,以达到提高氢气产量,降低成本的目的。
[0005]为达到上述目的,本专利技术的技术方案如下:
[0006]一种用于强化光合细菌产氢的纳米硒生物制剂,所述纳米硒生物制剂是由 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于强化光合细菌产氢的纳米硒生物制剂,其特征在于,所述纳米硒生物制剂是由大肠杆菌MG1655和亚硒酸钠通过生物法制得的纳米硒SeNPs,或者由纳米硒SeNPs经过壳聚糖改性的改性纳米硒Ch
‑
SeNPs,或者由纳米硒SeNPs经过维生素E改性的改性纳米硒Ve
‑
SeNPs。2.根据权利要求1所述的一种用于强化光合细菌产氢的纳米硒生物制剂,其特征在于,生物法制备纳米硒SeNPs的方法如下:(1)在锥形瓶中加入灭菌后的LB培养基,然后将300~500mmol L
‑1亚硒酸钠过0.22um膜添加到锥形瓶中,在无菌操作台中接种1%的大肠杆菌MG1655,然后将锥形瓶放置在温度为30
±
2℃,转速为150
‑
300转/分钟的摇床培养箱中好氧培养0.5~7d,以8000~10000rpm离心培养物10~20分钟,重复3次,所得沉淀为大肠杆菌MG1655与其产物生物硒的混合物;(2)用0.1M PBS溶液洗涤沉淀并重悬;然后在研钵中加入悬浮液并用液氮速冻,反复杵打使其破碎,重复该步骤3次;然后再以100
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300W条件下超声处理10~20分钟经液氮研磨后的悬浮液,使得菌体破碎释放出纳米硒,且纳米硒粒径达到200nm以下,继续以转速8000~10000rpm离心破碎后的混合物5~10min;用0.1M含1%SDS的Tis
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HCl缓冲液洗涤沉淀并在10000rmp转速下离心5~10min,重复3次;将沉淀物悬浮于去离子水中,即得到含有纳米硒和细胞碎片的混合悬浮液;(3)上述悬浮液转移到分液漏斗中,并加入正辛醇,悬浮液与正辛醇的体积比为1:2~2:1,在4℃下静置过夜,随后出现分层:上层为正辛醇,中间为菌体细胞碎片,下层为硒纳米颗粒悬浊液;分离出下层的硒纳米颗粒悬浊液,5000rmp转速下离心10min;依次用氯仿、乙醇、去离子水分别洗涤3次至完全去除菌细胞碎片,得到纯净的纳米硒SeNPs;(4)用去离子水重悬纯净的纳米硒SeNPs,得到纳米硒SeNPs溶液,储存在4℃备用。3.根据权利要求1所述的一种用于...
【专利技术属性】
技术研发人员:闫震,李思瑗,罗雅馨,石志睿,陈佳哲,
申请(专利权)人:山东大学苏州研究院,
类型:发明
国别省市:
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