一种维兰特罗中间体的酶催化制备方法技术

本发明专利技术公开了一种维兰特罗中间体的酶催化制备方法，所述维兰特罗中间体为(R)

【技术实现步骤摘要】
一种维兰特罗中间体的酶催化制备方法


[0001]本专利技术属于制药工业生物合成
，具体涉及一种维兰特罗中间体——(R)
‑
叔丁基(2
‑
(2,2
‑
二甲基
‑
4H
‑
苯并[D] [1,3]二噁英
‑6‑
基)
‑2‑
羟乙基)的酶催化制备方法。

技术介绍

[0002]（R）
‑
叔丁基(2
‑
(2,2
‑
二甲基
‑
4H
‑
苯并[D] [1,3]二噁英
‑6‑
基)
‑2‑
羟乙基)，英文名称：CarbaMicacid,[(2R)
‑2‑
(2,2
‑
diMethyl
‑
4H
‑
1,3
‑
benzodioxin
‑6‑ꢀ
yl)
‑2‑
hydroxyethyl]‑
,1,1<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种羰基还原酶Esp，其特征在于：所述羰基还原酶Esp为由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的多肽。2.一种编码权利要求1所述羰基还原酶Esp的核酸，其特征在于：所述核酸为由SEQ ID NO: 1所示的DNA序列组成。3.一种重组羰基还原酶Esp的宿主菌株，其特征在于，通过发酵培养制备获得权利要求1所述的羰基还原酶Esp。4.根据权利要求1所述羰基还原酶Esp的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）将羰基还原酶Esp的宿主菌株涂布在含有50 μg/mL氨苄的LB平板上，37℃过夜培养后，从中挑选阳性菌落接种到50 mL液体LB培养基中进行培养；培养4 h后，吸取10 mL种子液转入1 L新鲜的LB液体培养基；（b）当培养的浓度达到OD
600
0.6
‑
1.0时，加入终浓度为0.05~1.0 mmol/L的异丙基
‑
β
‑
D
‑
硫代吡喃半乳糖苷进行诱导，诱导温度为16
‑
35 ℃，诱导培养为8
‑
16 h，诱导培养后通过离心或浓缩得到更高浓度的湿菌体，经过超声波破碎或者高压均质机破碎后离心收集上清液，即为羰基还原酶Esp的酶液。5.一种(R)
‑
叔丁基(2
‑
(2,2
‑
二甲基
‑
4H
‑
苯并[D] [1,3]二噁英
‑6‑
基)
‑2‑
羟乙基) TM6的酶催化制备方法，其特征在于：将缓冲液、葡萄糖、粗酶液、辅酶因子NADP
+
、底物TM5：N
‑
(2
...

【专利技术属性】
技术研发人员：阮班锋，许坤，王红磊，高大舟，
申请(专利权)人：合肥学院，
类型：发明
国别省市：