二苯醚类化合物在制备β-葡萄糖醛酸苷酶抑制剂中应用制造技术

本发明专利技术公开一种二苯醚类化合物在制备β

【技术实现步骤摘要】
二苯醚类化合物在制备
β
‑
葡萄糖醛酸苷酶抑制剂中应用
(一)

[0001]本专利技术属于生物医药
，特别涉及一种从真菌Aspergillus versicolor ZJUTE2中分离得到二苯醚类化合物7
‑
羟基
‑
二聚苔黑酚在抑制大肠杆菌来源的β
‑
葡萄糖醛酸苷酶活性方面的应用。
(二)
技术介绍

[0002]葡萄糖醛酸化是人体最重要的解毒过程之一，大多数内源性物质和药物经葡萄糖醛酸化之后可以通过单管运输到十二指肠，被肠道菌群分泌的β
‑
葡萄糖醛酸苷酶水解形成苷元，游离苷元再经肝肠循环被重新吸收到血液循环系统中。肠道菌β
‑
葡萄糖醛酸苷酶在内源性物质和药物的葡萄糖醛酸化过程中发挥着重要作用，与药物的胃肠道毒性高度相关。
[0003]伊立替康是转移性结直肠癌、胃癌、非小细胞肺癌等疾病的临床治疗药物。注射给药后，伊立替康首先被肝脏羧酸酯酶水解释放出活性代谢产物SN
‑
38；然后，SN
‑
38经UDP
‑
葡萄糖醛酸基转移酶转化为葡萄糖醛酸化产物SN38G失活，经胆汁进入胃肠道。在肠道菌β
‑
葡萄糖醛酸苷酶的作用下，SN
‑
38G被水解再次生成SN
‑
38，SN
‑
38的强细胞毒性引发肠上皮细胞损伤，进而导致腹泻，限制伊立替康的临床应用。因此，肠道菌β
‑
葡萄糖醛酸苷酶被认为是治疗伊立替康诱发的药源性腹泻的重要靶点之一。此外，肠道菌β
‑
葡萄糖醛酸苷酶还与酮洛芬、双氯芬酸等非甾体类抗炎药引起的胃肠道毒性有直接联系。
[0004]7‑
羟基
‑
二聚苔黑酚(7
‑
hydroxy
‑
diorcinol)为二苯醚类化合物，无色固体，分子式为C
14
H
14
O4，分子量为246，该化合物易溶于甲醇，可从真菌Aspergillus versicolor ZJUTE2中分离获得，化学结构如式(I)所示：
[0005][0006]目前，关于上述化合物是否具有β
‑
葡萄糖醛酸苷酶抑制活性的研究，尚未见相关文献报道；也就是说，能否将所述化合物开发成为β
‑
葡萄糖醛酸苷酶抑制剂，在本领域中尚属研究空白地带。
(三)
技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于解决现有技术问题的不足，提供一种从真菌Aspergillus versicolor ZJUTE2中分离得到的二苯醚类化合物在制备β
‑
葡萄糖醛酸苷酶抑制剂中应用，可为新型β
‑
葡萄糖醛酸苷酶抑制剂的研发提供先导结构。
[0008]为实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0009]本专利技术提供一种二苯醚类化合物在制备β
‑
葡萄糖醛酸苷酶抑制剂中应用，所述二
苯醚类化合物为式(I)所示7
‑
羟基
‑
二聚苔黑酚，分子式为C
14
H
14
O4；
[0010][0011]优选的，所述β
‑
葡萄糖醛酸苷酶为大肠杆菌来源。
[0012]本专利技术还提供一种所述二苯醚类化合物在制备治疗伊立替康或非甾体类抗炎药引起的药源性腹泻药物中的应用。
[0013]本专利技术所述7
‑
羟基
‑
二聚苔黑酚按如下方法制备：
[0014](1)将花斑曲霉(Aspergillus versicolor)ZJUTE2接种至大米固体培养基，在20
‑
30℃条件下暗培养15
‑
30天，获得大米发酵产物；所述花斑曲霉ZJUTE2，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2022年1月13日，保藏编号为CCTCCNO:M2022064，地址为中国，武汉，武汉大学，已在专利申请CN114806888A中公开；所述大米固体培养基为大米和蒸馏水的混合物，其中蒸馏水用量以大米质量计为1
‑
5mL/g(优选1.35mL/g)；
[0015](2)将大米发酵产物(优选捣碎)中加入有机溶剂，室温(25
‑
30℃)浸提，提取液浓缩至无液体流出，获得粗提物浸膏；
[0016](3)将步骤(2)粗提物浸膏用水悬浮，以有机溶剂萃取，收集有机相，减压浓缩至干，得到萃取物浸膏；
[0017](4)将步骤(3)萃取物浸膏用甲醇溶解后进行MCI CHP20P柱层析，依次以体积比为30
‑
100:70
‑
0的甲醇/水混合溶剂为洗脱剂进行梯度洗脱，每一梯度洗脱2～5个(优选2个)柱体积，流速10
‑
20mL/min(优选15mL/min)；收集体积比45:55
‑
55:45的甲醇
‑
水洗脱部位，减压浓缩至干，得浓缩物；将浓缩物用甲醇溶解，室温下进行重结晶，过滤，得到式(Ⅰ)所示7
‑
羟基
‑
二聚苔黑酚。
[0018]优选的，步骤(1)所述花斑曲霉ZJUTE2接种至大米固体培养基前，先进行活化培养，再将活化后的菌悬液以体积浓度0.1
‑
1％(优选1％)的接种量接种大米固体培养基，所述活化是指将花斑曲霉ZJUTE2接种至马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基，28℃培养7天，使菌株活化，将活化后的菌株用含体积浓度2％吐温80的无菌水重悬，得到菌悬液；所述菌悬液中菌体浓度为1
×
105‑1×
108个/mL，优选1
×
106个/mL；所述PDA培养基组成为马铃薯200g/L、葡萄糖20g/L、琼脂18g/L，溶剂为蒸馏水，pH自然。
[0019]优选的，步骤(1)中发酵培养条件为：28℃条件下暗培养20天。
[0020]优选的，步骤(2)中所述有机溶剂为95％乙醇、甲醇或丙酮；所述有机溶剂体积用量以大米固体培养基中大米干重计为2～8mL/g(优选5
‑
6mL/g)；所述浸提至少进行3次，每次提取时间为3～5天，每次浸提用的有机溶剂体积用量以大米固体培养基中大米干重计为4mL/g。
[0021]优选的，步骤(3)中所述水体积用量以粗提物浸膏重量计为2
‑
5mL/g(优选3.1mL/g)；所述有机溶剂为乙酸乙酯，所述有机溶剂与水的体积比为1:0.5
‑
3；萃取3
‑
5次，每次萃取用的有机溶剂与水体积比优选1:1。
[0022]优选的，步骤(4)方法为：1)萃取物浸膏以甲醇溶解后进行MCI CHP20P柱层析，依
次以体积比为30:70、40:60、50:本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种式(I)所示的二苯醚类化合物在制备β
‑
葡萄糖醛酸苷酶抑制剂中的应用，2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑制剂为治疗伊立替康或非甾体类抗炎药引起的药源性腹泻的药物。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于β
‑
葡萄糖醛酸苷酶为大肠杆菌来源。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述二苯醚类化合物按如下步骤制备：(1)将花斑曲霉(Aspergillusversicolor)CCTCC NO:M2022064接种至大米固体培养基，在20
‑
30℃条件下暗培养15
‑
30天，获得大米发酵产物；所述大米固体培养基为大米和蒸馏水的混合物；(2)将大米发酵产物中加入有机溶剂，室温浸提，提取液浓缩至无液体流出，获得粗提物浸膏；(3)将步骤(2)粗提物浸膏用水悬浮，以有机溶剂萃取，收集有机相，减压浓缩至干，得到萃取物浸膏；(4)将步骤(3)萃取物浸膏用甲醇溶解后进行MCI CHP20P柱层析，依次以体积比为30
‑
100:70
‑
0的甲醇/水混合溶剂为洗脱剂进行梯度洗脱，每一梯度洗脱2～5个柱体积，流速10
‑
20mL/min；收集体积比45:55
‑
55:45的甲醇
‑
水洗脱部位，减压浓缩至干，得浓缩物；将浓缩物用甲醇溶解，室温下进行重结晶，过滤，得到式(Ⅰ)所示二苯醚类化合物。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤(1)所述花斑曲霉CCTCC NO:M2022064接种至大米固体培养基前，先进行活化培养，再将活化后的菌悬液以体积浓度0.1
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：应优敏，冉坤，单伟光，
申请(专利权)人：浙江工业大学台州研究院，
类型：发明
国别省市：