一种暗黑橄榄链霉菌及其在茄科蔬菜根腐病防控上的应用制造技术

本发明专利技术提供了一株暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus，于2022年03月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24482。该菌株耐寒、耐旱、在茄科蔬菜及其根围土壤中能稳定定殖，其有酯酸类、香豆素类等种类丰富的发酵液活性物质，通过破坏病原菌细胞膜稳定性和抑制病原菌菌体细胞保护酶活性，加剧细胞脂质过氧化程度而达到抑菌目的，同时激活茄科蔬菜抗逆系统，提高其抗病原浸染和抗逆境胁迫能力。该菌株发酵液对致病镰刀菌属、疫霉和腐霉等多种病原菌有抑制活性，对其引发的茄科蔬菜根腐病有很强防控效果。根腐病有很强防控效果。根腐病有很强防控效果。

【技术实现步骤摘要】
一种暗黑橄榄链霉菌及其在茄科蔬菜根腐病防控上的应用


[0001]本专利技术属于植物保护
，涉及一种暗黑橄榄链霉菌及其在茄科蔬菜根腐病防控中的应用。

技术介绍

[0002]茄科蔬菜主要有西红柿、茄子、辣椒和马铃薯等，是人们日常餐桌的主要食材，市场销量和产量均居蔬菜之首。需求量大使得种植面积剧增，由于种植年限长、种植品种单一、连作现象严重、轮作倒茬困难，其病害发生频繁、种类杂多，但各地普遍发生，常年危害，危害损失在15%以上，对现用农药容易产生抗药性、防治相对困难的是致病单胞菌、镰孢菌、疫霉、腐霉等各种植物病原菌引发的根腐病，其病原菌绝大多数习居土壤条件成熟其通过气孔、表皮和根茎直接侵入引起初侵染，病株上产生孢子囊迁移进行多次再侵染容易引起病害大流行，损失严重，幼苗和成株均可发病，是茄科蔬菜的癌症类病害之一。由于茄科蔬菜生产周期较短，病害种类多、为害重，化学农药防治仍是最主要的病害防治方法。但是化学农药的无节制使用造成病害抗药性剧增、防治成本不断增加、严重污染生态环境、伤害天敌的恶性循环。为了有效防控茄科蔬菜根腐病、实现化肥农药“双减”又能显著提高蔬菜品质、保障蔬菜产品和环境安全，生物防控技术就成为首选的替代技术。生物防治是利用生物或生物代谢及生物技术获得的生物产物来治理有害生物。包括天敌（蛙类、昆虫、鸟类等）的保护利用和繁殖释放，生物农药的应用，利用植物自身的相生相克，抗虫优良品种的研究与培育等。其中生物农药尤其微生物源农药是生物防治中重要的方式之一。其具有持效期相对较长、害虫不易产生抗药性、对自然天敌无害、不污染环境等特点，在绿色无公害蔬菜生产中具有显著优势。链霉菌是土壤放线菌的主要类群，也是天然活性物质的重要来源，其是研究最早并且成功应用于植物病害防治的重要微生物之一，富含多种抗生素、酶类及其发酵液活性物质，且具有抑制大分子化合物合成或破坏细胞膜结构或抑制病原微生物的代谢过程和有丝分裂或影响病原菌的形态结构或竞争营养和生存空间等多种抑菌机理，在植物病害的生物防治方面有着重要的应用价值和开发潜力。本专利技术从具有杀虫抑菌活性的特殊生境毒杂草中分离优选对茄科蔬菜根腐病具高活性、高抗逆的优良链霉菌菌株，为茄科蔬菜根腐病的生物防治提供优秀菌种资源和基础理论支撑。

技术实现思路

[0003]本专利技术的第一个目的是提供一种暗黑橄榄链霉菌，该暗黑橄榄链霉菌具有耐旱、耐寒、在番茄根内及其根围土壤能稳定定殖，通过遏制病原真菌细胞膜麦角甾醇生物合成，破坏细胞膜结构及其稳定性；抑制病原菌细胞保护酶活性，加剧细胞脂质过氧化程度，达到抑菌目的。
[0004]本专利技术的第二个目的是提供上述暗黑橄榄链霉菌及其发酵液在茄科蔬菜根腐病防控上的应用，暗黑橄榄链霉菌及其发酵液能增强茄科蔬菜光合和碳同化作用，激活茄科蔬菜抗逆系统，使其抗病防御酶活性大幅度提高，细胞内丙二醛含量降低，从而提高了茄科
蔬菜抗病原浸染能力和抗逆境胁迫能力。
[0005]为解决上述问题，本专利技术首先提供了一种暗黑橄榄链霉菌，该暗黑橄榄链霉菌是2022年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus，保藏编号为CGMCC No.24482。
[0006]所述暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus从甘肃省玛曲县海拔3900米草场毒杂草黄帚橐吾根茎中分离纯化的高活性拮抗菌株STRA
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2518，经过形态观察、生理生化鉴定和16S r DNA分子鉴定最终确定该菌株为暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus。
[0007]所述暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus耐寒耐旱，在温度5℃～20℃能繁殖生长；能耐受模拟环境的重度干旱，即PGE6000浓度为150～270g/L能生长繁殖。
[0008]所述暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus在番茄根内和根围土壤能稳定定殖且定殖能力强，20天内定殖菌数维持在104cfu/ml～105cfu/ml ，在番茄叶和茎内也可定殖，但较弱，定殖菌数在103cfu/ml左右。
[0009]所述暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus的抑菌机理 ：抑制真菌病原菌菌丝生长和孢子萌发；遏制病原真菌细胞膜麦角甾醇生物合成，破坏细胞膜结构及其稳定性，使细胞内容物外渗导致病原菌生长发育受阻或死亡；抑制病原菌菌体PAL、SOD、CAT等细胞保护酶活性，加剧细胞脂质过氧化程度，使病原菌细胞快速衰亡，达到抑菌目的。
[0010]所述暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus活菌与发酵液活性物质共同作用，其主要抑菌谱为致病镰刀菌属、立枯丝核菌 、疫霉、瓜果腐霉、拟茎点霉、枝孢菌、致病单胞菌等植物病原菌。
[0011]暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus的发酵液制备时的发酵培养基配方为小米20g，葡萄糖10g，蛋白胨 5.0g，磷酸氢二钾 1.2g，硫酸镁 0.8g，硫酸亚铁 0.01g，蒸馏水 1000mL ，pH 7.4。该发酵培养基提高了暗黑橄榄链霉菌的产孢量及其发酵液的抑菌活性。
[0012]所述暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus的发酵液活性物质种类丰富，特有、土木香内酯、雄酮单硫酸酯、鼠尾草苦内酯、呋喃基四氢吡咯、氨基三甲基咪唑并喹啉、甲基喹啉、乙氧基甲基香豆素、槟榔次碱、嘧菌环胺、异锁链素、异茴芹灵、异烟酸、原薯蓣皂甙、豆蔻酯酸等活性化合物，还有氨基酸和植物激素，协同活性化合物激活植物抗性系统，增强抗逆能力。
[0013]本专利技术的目的之二是上述菌株及其发酵液在茄科蔬菜根腐病防控中的应用。
[0014]所述暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus的发酵液活性物质可有效增强番茄光合和碳同化作用，其叶绿素含量增长16.27%；激活番茄抗逆系统，使其POD、SOD、CAT、PAL及β
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葡聚糖酶等抗病防御酶活性大幅度提高，植物细胞丙二醛含量降低，从而提高了植物抗病原浸染能力和抗逆境胁迫能力，植物染病和受损风险大幅下降。
[0015]本专利技术提供的暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus及其发酵液对由致病镰刀菌属、立枯丝核菌 、疫霉、瓜果腐霉、拟茎点霉、致病单胞菌和枝孢菌等植物病原菌引发的茄科蔬菜根腐病有特效，平均防治效果在86%～95%，效果较好，均与对照农药在0.05水平上不存在显著性差异P≥0.05。
附图说明
[0016]图1为本专利技术暗黑橄榄链霉菌STRA
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2518菌落形态；图2为本专利技术暗黑橄榄链霉菌STRA
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2518发酵液处理的尖孢镰刀菌菌丝形态；图3为未用本专利技术暗黑橄榄链霉菌STRA
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2518发酵液处理的尖本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株暗黑橄榄链霉菌，该暗黑橄榄链霉菌是2022年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的暗黑橄榄链霉菌Streptomyces atroolivaceus，保藏编号为CGMCC No.24482。2.如权利要求1所述的暗黑橄榄链霉菌在茄科蔬菜根腐病防控中的应用。3.如权利要求1所述的暗黑橄榄链霉菌的发酵液在茄科蔬菜根腐病防控中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述发酵液制备时的发酵培养基配方为：小米20g，葡萄糖10g，蛋白胨 5.0g，磷酸氢二钾 1.2g，硫酸镁 0.8g，硫酸亚铁 0....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘锦霞，李晶，李娜，付麟雲，丁品，张建军，武建荣，
申请(专利权)人：甘肃省科学院生物研究所，
类型：发明
国别省市：