藜麦原生质体、制备方法以及梭梭耐逆基因瞬时表达体系技术

本发明专利技术公开了一种藜麦原生质体、制备方法以及梭梭耐逆基因瞬时表达体系。本发明专利技术通过将预处理的藜麦幼嫩子叶切取成0.5～1mm宽的细长条后置于酶解液中，25℃恒温条件下避光酶解10.5h，50rpm

【技术实现步骤摘要】
藜麦原生质体、制备方法以及梭梭耐逆基因瞬时表达体系


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及一种藜麦原生质体及其制备方法，以及基于该藜麦原生质体的梭梭耐逆基因瞬时表达体系。

技术介绍

[0002]植物原生质体是指完全消除细胞壁的植株活细胞，其继续保持活体细胞一般的生长、分裂等生物活力，在特定的生长环境下，依然能够具有继续形成出新的植物能力的细胞。植物原生质体技术目前已被广泛应用于植物基因组定位、启动子活性、蛋白相互作用和植物育种技术等方面的研究，而基于植物原生质体的相关技术开发也已经成为了植物分子生物学科研的主要技术手段，原生质体瞬时分析系统已被广泛用于利用细胞和生化方法对基因进行快速功能分析。尽管对某些模式的植物原生质体的酶解分离技术已相当完善，但是几乎全部的研究资料都已经指出，对于不同的植物类型，或者同种植物不同的被试细胞材料，其对原生质体的分离能力也有着巨大差别。酶解液配合浓度、渗透剂浓度和酶解时间对酶解法制备原生质体有着及其重要的影响。
[0003]制备成熟的原生质体体系已在拟南芥(Arabidopsis thalian本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种采用藜麦幼嫩叶片制备藜麦原生质体的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)将预处理的藜麦幼嫩子叶切取成0.5～1mm宽的细长条后置于酶解液中，25℃恒温条件下避光酶解10.5h，50rpm
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min
‑1震荡1.5h，得到酶解液；其中，所述酶解液pH为5.7、酶解液组成为0.3％MacerozymeR
‑
10+1.2％Cellulase
‑
R10+0.6mol
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L
‑1甘露醇+20mmol
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L
‑1MES+20mmol
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L
‑1KCl+10mmol
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‑1CaCl2+0.5％PVP+1g
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L
‑1BSA；(2)往所述酶解液中添加等体积的W...

【专利技术属性】
技术研发人员：王波，马洲洋，潘绒，任文静，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：