【技术实现步骤摘要】
用于金钱白花蛇药材、标准汤剂及中药配方颗粒多重STR分型的引物及其应用、鉴别方法
[0001]本专利技术涉及中药鉴别
，尤其涉及一种用于金钱白花蛇药材、标准汤剂及中药配方颗粒多重STR分型的引物及其应用、鉴别方法。
技术介绍
[0002]我国蛇类物种约有两百余种，其中有20余种为常见蛇类，包括蕲蛇Agkistrodon acutus、乌梢蛇Zaocys dhumnades、金钱白花蛇Bungarus multicinctus、金环蛇Bungarus fasciatus、滑鼠蛇Ptyas mucosus、圆斑蝰Daboia russelii、眼镜蛇Naja naja、赤链蛇Lycodon rufozonatus、王锦蛇Elaphe carinata、灰鼠蛇Ptyas korros、短尾蝮蛇Gloydius brevicaudus、黑眉锦蛇Elaphe taeniura、百花锦蛇Elaphe moellendorffi等，其多数不具有临床药效。由于多种蛇类形态近似，药材鉴别困难，特别是加工处理时剖去内脏后，要进行干燥熏黑处...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于金钱白花蛇药材、标准汤剂及中药配方颗粒多重STR分型的引物，其特征在于，包括第一引物对、第二引物对和第三引物对；其中，所述第一引物对的上游引物的序列如SEQ ID NO：1所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO：2所示；所述第二引物对的上游引物的序列如SEQ ID NO：3所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO：4所示；所述第三引物对的上游引物的序列如SEQ ID NO：5所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO：6所示。2.如权利要求1所述的引物在(1)或(2)中的应用：(1)鉴别待测样品是否为金钱白花蛇、赤链蛇和/或金环蛇；(2)制备用于鉴别金钱白花蛇、赤链蛇和/或金环蛇的试剂盒。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述金钱白花蛇为药材、标准汤剂或中药配方颗粒；所述赤链蛇为药材、标准汤剂或中药配方颗粒；所述金环蛇为药材、标准汤剂或中药配方颗粒。4.如权利要求1所述的引物在(1)或(2)中的应用：(1)鉴别待测样品是否含有金钱白花蛇、赤链蛇和/或金环蛇；(2)制备用于鉴别待检测样品是否含有金钱白花蛇、赤链蛇和/或金环蛇的试剂盒。5.一种试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求1所述的引物。6.一种基于如权利要求1所述的引物的鉴别方法，其特征在于，包括：提取待检测样品的基因组DNA；以所述基因组DNA为模板，采用如权利要求1所述的引物进行PCR扩增，若扩增产物中含有158
‑
160bp的DNA特征峰，则待检测样品含有金钱白花蛇药材、金钱白花蛇标准汤剂和/或金钱白花蛇中药配方颗粒；若扩增产物中含有205
‑
210bp的DNA特征峰，则待检测样品含有赤链蛇药材、赤链蛇标准汤剂和/或赤链蛇中药配方颗粒；若扩增产物中含有180
‑
185p的DNA特征峰，则待检测样品含有金环蛇药材、金环蛇标准汤剂和/或金环蛇中药配方颗粒。7.如权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于，提取待检测样品的基因组DNA的方法如下：取待检测样品，加入CTAB沉淀液、蛋白酶K沉淀提取2～3次；取沉淀物加入CTAB提取液、β
‑
巯基乙醇提取，然后加入氯仿
‑
异戊醇萃取2～3次；取萃取后上清液，加入异丙醇或异丙醇
‑
乙酸钠沉淀提取，沉淀物经洗涤、孵育后用水溶解，即得待检测样品的基因组DNA。8.如权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于，提取待检测样品的基因组DNA的方法如下：取待检测样品0.3～0.8g，研磨成粉末，置离心管中，加入1～1.8mL的CTAB沉淀液、15～25μL蛋白酶K，混合均匀，在50～60℃下加热45～65min，冷却至室温后离心，弃去上清液；加入800～1000μL CTAB沉淀液、15～25μL蛋白酶K，混合均匀，在50～60℃下加热45～65min，冷却至室温后离心，弃去上清液；取沉淀加入800～1000μL CTAB提取液，5～15μLβ
‑
巯基乙
醇，混合均匀，在60～70℃加热100～150min，冷却至室温后取上清液，加入等体积的氯仿
...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏梅，李国卫，罗宇琴，范耀耀，钟春琳，宋叶，黄上书，陈向东，程学仁，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。