一种基于荧光蛋白cCFP和nVenus植物双荧光互补系统及应用技术方案

本发明专利技术公开了一种基于荧光蛋白CFP片段和Venus片段植物双荧光互补系统及应用。基于荧光蛋白CFP片断和Venus片段的融合蛋白组，所述的融合蛋白组为(1)和(2)组成：(1)由10

【技术实现步骤摘要】
一种基于荧光蛋白cCFP和nVenus植物双荧光互补系统及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种基于荧光蛋白cCFP和nVenus植物双荧光互补系统及应用。

技术介绍

[0002]基于蛋白间的相互作用是研究细胞中信号通道及信号转导的基础。双分子荧光互补技术(Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC)是用于观察目标蛋白在植物活细胞中的相互作用较为普遍的方法。其原理是在YFP的两个β片层之间的环结构(loop)上有许多特异位点可以插入外源蛋白而不影响GFP的荧光活性，将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段，形成不发荧光的N和C端2个多肽)，再分别与两个目标蛋白连接。当两个片段分别融合于相互作用的两个蛋白时，在相互作用蛋白的辅助下能重新组建成完整的荧光蛋白，被激发可产生荧光。反之，若蛋白质之间没有相互作用，则不能被激发产生荧光。在荧光显微镜下，就能直接观察到两目标蛋白是否具有相互作用，并且在最接近活细胞生理状态的条件下观察到其相互作用发生的时间、位置、强弱、所形成蛋白复合物的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于荧光蛋白CFP片断和Venus片段的融合蛋白组，其特征在于：所述的融合蛋白组为(1)和(2)组成：(1)由10
×
Ala、待测蛋白A、荧光蛋白CFP片段和3
×
Flag组成的融合蛋白；(2)由10
×
Ala、待测蛋白B、荧光蛋白Venus片段和3
×
Myc组成的融合蛋白。2.根据权利要求1所述的基于荧光蛋白CFP片断和Venus片段的融合蛋白组，其特征在于：所述的待测蛋白A和待测蛋白B是待检测是否相互作用的两个蛋白；所述的荧光蛋白CFP片段的氨基酸序列为SEQ NO:8所示，荧光蛋白Venus片段的氨基酸序列为SEQ NO:9所示。3.一种核酸分子，其编码权利要求1或2所述的融合蛋白。4.根据权利要求3所述的核酸分子，其核苷酸序列如SEQ ID No.10和SEQ ID No.11所示。5.权利要求1所述的融合蛋白的编码基因的重组表达载体、重组菌、转基因细胞系或表达盒。6.权利要求1所述的基于荧光蛋白cCFP和nVenus植物双荧光互补系统，其特征在于：融合蛋白中10
×
Ala、待测蛋白A、荧光蛋白CFP片段(155
‑
238)和3
×
Flag依次顺序连接；融合蛋白可以10
×
Ala、荧光蛋白CFP片段(155
‑
238)待测蛋白A和3
×
Flag依次顺序连接；待测蛋白A、10
×
Ala、荧光蛋白CFP片...

【专利技术属性】
技术研发人员：王斌，孙广芳，栾明达，兰文智，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：