一种检测2,6-二氧杂螺[4,5]癸烷类化合物或其盐中杂质的方法技术

本发明专利技术提供了一种检测式（I）所示2,6

【技术实现步骤摘要】
一种检测2,6
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二氧杂螺[4,5]癸烷类化合物或其盐中杂质的方法


[0001]本专利技术属于药物分析领域，具体涉及采用高效液相色谱方法检测2,6
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二氧杂螺[4,5]癸烷类化合物或其盐中杂质的方法。

技术介绍

[0002]阿片受体是一类以阿片样肽为配体的G蛋白偶联受体，μ、κ和δ受体是经典的三类阿片受体。阿片受体在体内分布广泛，但在神经系统的分布不均匀。在脑内、丘脑内侧、脑室及导水管周围灰质阿片受体密度较高，这些结构与痛觉的整合及感受有关。阿片类药物是目前临床上最有效的镇痛药物，但通常容易引起一些与靶点相关的副作用，如：呼吸抑制，便秘等。阿片类GPCR受体与配体结合后可以同时影响多条下游信号通路，包括Gi蛋白信号通路及β
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Arrestin信号通路。目前研究表明，阿片类药物的镇痛作用来源于μ受体的Gi蛋白信号通路，而相关的副作用，如：呼吸抑制，便秘等，则与μ受体下游的β
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Arrestin信号通路相关。与野生型小鼠相比，在β
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Arrestin
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2基因敲除的小鼠上注射吗啡后镇痛作用增强，且药效时间延长，而相关不良反应减弱。因此，Gi蛋白偏向性μ受体激动剂可以选择性激活Gi信号通路，而对β
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Arrestin通路没有影响，或影响较小。因此，可以预期Gi蛋白偏向性μ受体激动剂在临床上有更好的镇痛作用，而阿片类相关不良反应则大大减少。
[0003]中国专利技术专利CN111148515 B公开了一系列Gi蛋白偏向性μ受体激动剂，其中包括式（I）所示的2,6
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二氧杂螺[4,5]癸烷类化合物。
[0004][0005]按照CN111148515B公开的制备方法得到的式（I）化合物含有多种杂质，且结构类似，因此大大增加了同时检测原料药中多种杂质的难度。而药物中含有杂质会降低其疗效和影响其稳定性，甚至对人体健康有害或产生其他副作用。因此，对杂质进行检测，控制药物纯度，以控制药物质量至关重要。
[0006]为了有效控制式（I）化合物及其盐的杂质含量，提高药物安全性，有必要开发一种专属性好、分离度高的检测方法。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供了一种检测式（I）化合物或其盐中杂质的方法。
[0008]本专利技术采用的技术方案如下。
[0009]采用高效液相色谱技术，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A为辛烷磺酸钠及磷酸二氢钾的缓冲盐溶液，流动相B为乙腈。
[0010][0011]在一些实施方式中，所述杂质包括杂质A、B、C、D、E、F、G和/或H，其结构式如下所示：
[0012]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的色谱柱为Waters Symmetry Shield RP18或Inertsil ODS
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2，优选为Waters Symmetry Shield RP18。
[0013]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的流动相A中还含有三乙胺。
[0014]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的流动相A中含有0.0025 mol/L辛烷磺酸、0.01 mol/L磷酸二氢钾、0.1%三乙胺。
[0015]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的流动相A的pH为2.5
ꢀ±ꢀ
0.05，优选以磷酸调节pH。
[0016]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的流动相采用等度洗脱，流动相A与流动相B比例为76:24。
[0017]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的流动相采用梯度洗脱，梯度条件如下：
[0018]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的流动相A的制备方法包括：称取辛烷磺酸钠、磷酸二氢溶于水中，加入三乙胺，用磷酸调节pH至2.5
±
0.05，混匀，超声过滤脱气，即得。
[0019]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的流动相流速为0.9 ~ 1.1 mL/min，优选为1.0 mL/min。
[0020]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的色谱柱的柱温为33 ~ 37 ℃，优选为35 ℃。
[0021]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法所述的盐为马来酸盐、盐酸盐、硫酸盐、醋酸盐、酒石酸盐、磷酸盐、硫酸盐、苹果酸盐、富马酸盐或柠檬酸盐。所述盐可采用本领域技术人员常规的方法进行制备，例如在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与式（I）化合物接触的方式获得酸加成盐。
[0022]在本专利技术的一个方面中，所述检测方法，包括如下步骤：（1）制备稀释剂。
[0023]（2）制备供试品溶液：称定式（I）化合物或其盐，用稀释剂进行溶解，配制成供试品溶液。
[0024]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法中，所述稀释剂含有乙腈和水，乙腈与水的体积比为1:1 ~ 1:4。
[0025]在一些实施方式中，上述任意一种检测方法中，采用面积归一化法或外标法计算杂质含量。
[0026]杂质A~G可按照常规方法进行制备，例如杂质A~E和杂质G可参照CN111148515B的制备方法进行制备，杂质H可采取以下方法制备：。
[0027]本专利技术具有如下的优点及有益效果：1. 具有优异的专属性，可以对多种结构类似的杂质实现有效分离；主成分与相邻杂质、各杂质之间的分离度均大于1.5。
[0028]2. 能同时检测多种杂质，效率更高，成本更低。
[0029]3. 灵敏度高，检测限和定量限低，能够对痕量的的杂质进行检测和定量分析。
附图说明
[0030] 图1为实施例2中三氟乙酸体系下色谱柱UltimateC18的色谱图。
[0031]图2为实施例2中三氟乙酸体系下色谱柱YMC
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PackProC18RS的色谱图。
[0032]图3为实施例2中三氟乙酸体系下色谱柱ACEC18
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PFP的色谱图。
[0033]图4为实施例2中乙酸铵体系下流动相A的pH为6.7的色谱图。
[0034]图5为实施例2中乙酸铵体系下流动相A的pH为9.0的色谱图。
[0035]图6为实施例2中乙酸铵体系下流动相A的pH为4.2的色谱图。
[0036]图7为实施例2中磷酸体系下色谱柱ACEExcel2C18的色谱图。
[0037]图8为实施例2中磷酸体系下色谱柱YMCTriartC18的色谱图。
[0038]图9为实施例2中辛烷磺酸钠
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磷酸二氢钾体系下的色谱图。
[0039]图10为实施例3色谱柱研究的色谱图。
[0040]图11为实施例5中梯度1的色谱图。
[0041]图12为实施例5中梯度2的色谱图。
[0042]图13为实施例6杂质混合液的色谱图。
具体实施方式
[0043]以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测式（I）化合物或其盐中杂质的方法，其特征在于，采用高效液相色谱技术，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A为辛烷磺酸钠及磷酸二氢钾的缓冲盐溶液，流动相B为乙腈，。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述杂质包含具有下述结构式的杂质A、B、C、D、E、F、G和/或H，G和/或H，G和/或H，G和/或H，G和/或H，G和/或H，G和/或H，G和/或H，。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的盐为马来酸盐、盐酸盐、硫酸盐、醋酸盐、酒石酸盐、磷酸盐、硫酸盐、苹果酸盐、富马酸盐或柠檬酸盐。4.根据权利要求1至3任意一项所述的方法，其特征在于，所述色谱柱为Waters Smmetry Shield RP18或Inertsil ODS
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2。5.根据权利要求1至3任意一项所述的方法，其特征在于，流动相A中含有0.0025mol/L辛烷磺酸、0.01 mol/L磷酸二氢钾、0.1%三乙胺。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述流动相采用等度洗脱，流动相A与流动相B比例为76:24。7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述流动相采用梯度洗脱，梯度条件如下：...

【专利技术属性】
技术研发人员：王淑萍，张连庆，薛英，徐志红，周凤梅，
申请(专利权)人：山东绿叶制药有限公司，
类型：发明
国别省市：