一种猪传染性胸膜肺炎-猪多杀性巴氏杆菌病二联亚单位疫苗制造技术

本发明专利技术公开了一种猪传染性胸膜肺炎

【技术实现步骤摘要】
一种猪传染性胸膜肺炎
‑
猪多杀性巴氏杆菌病二联亚单位疫苗


[0001]本专利技术涉及兽用疫苗领域，具体涉及一种猪传染性胸膜肺炎
‑
猪多杀性巴氏杆菌病二联亚单位疫苗。

技术介绍

[0002]猪传染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染引起的，以急性出血性纤维素性胸膜肺炎和慢性纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征的一种急性、接触传染性疾病(陈溥言.兽医传染病学[M].第五版.北京:中国农业出版社:2011:262
‑
265.)。各年龄段猪只均能感染该病原菌，其中尤以种猪和保育猪最为易感。APP急性感染死亡率极高，常造成猪只无预兆性的突然死亡，慢性感染造成猪只生长受阻，饲料转化率降低，且易继发其他病原感染而死亡，给养猪业造成了极大的经济损失(Nahar N,Turni C,Tram G,Blackall PJ,Atack JM.Actinobacillus pleuropneumoniae:The molecular determinants of virulence and pathogenesis.Adv Microb Physiol.2021；78:179
‑
216.)。
[0003]猪胸膜肺炎放线杆菌属于巴氏杆菌科、放线杆菌属，是一种革兰氏阴性小球杆菌。依据细菌荚膜和脂多糖抗原的不同，目前APP被划分为19个血清型，各血清型之间毒力不同，且缺乏交叉保护性。我国不同地区间APP的流行血清型各不相同，而1、3、5、7型为优势血清型，在我国北方大部分地区主要流行5型和7型，而福建、广东等南方地区则以1、3、7型为主(朱秀高,李艳青.猪胸膜肺炎放线杆菌感染和血清型分布[J].动物医学进展,2017,38(10):111
‑
113.)。Apx毒素是APP主要的毒力因子，包括ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ、ApxⅣ，其毒性强弱各不相同，但在APP的发病过程中均扮演至关重要的角色，其中ApxⅣ在各种APP血清型中均存在，除此之外血清型1、5、9、11还分泌ApxⅠ、ApxⅡ，血清型2、3、6、8分泌ApxⅡ、ApxⅢ，10型分泌ApxⅠ，7、12型分泌ApxⅡ(ITO H,SUEYOSHI M.The genetic organization of the capsular polysaccharide biosynthesis region of Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 15[J].Journal of Veterinary Medical Science,2015,77(4):483
‑
486.)。市场上销售的亚单位疫苗抗原成分较多，在一定程度上赋予所有血清型的交叉保护作用(Sassu EL,Tobias TJ,Gottschalk M,Langford PR,Hennig
‑
Pauka I.Update on Actinobacillus pleuropneumoniae
‑
knowledge,gaps and challenges.Transboundary&Emerging Diseases,2017.)。默沙东生产的亚单位疫苗(爱普克)，其抗原包含3个外毒素(ApxI、ApxII、ApxIII)和一个外膜蛋白(OMPs)，高纯度的OMPs会与毒素产生协同保护作用，且具有提高交叉保护力的功能。Ceva公司生产的Coglapix，可以对APP所有血清型提供保护，其抗原成分包含ApxI、ApxII、ApxIII。诺华公司生产的商品化亚单位疫苗(Porcilis APP)包含rApxII、rOmlA、rTbpB、rCysL。
[0004]多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)属于巴氏杆菌科，巴氏杆菌属，是巴氏杆菌属20多种细菌中最重要的畜禽致病菌。该菌是一种两端钝圆的短杆菌或球杆菌，
是无鞭毛，不运动，不形成芽孢的革兰氏阴性菌，兼性厌氧。根据荚膜多糖(K抗原)和脂多糖成分的不同，多杀性巴氏杆菌可以分为五个血清群，即A、B、D、E、F和16个血清型(陆承平.兽医微生物学[M].4版.北京:中国农业出版社,2007:136
‑
137.)。其中A型主要引起禽霍乱，B、E型主要引起出血性败血症，D型主要引起猪萎缩性鼻炎。感染了Pm的动物常呈现败血症、出血性炎症或皮下结缔组织、关节以及各脏器的化脓性病灶。此菌可感染多种宿主，感染后不同种类的动物表现的症状也不一样。猪感染Pm后引起的疾病为猪肺疫和猪传染性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis，PAR)；人类也可以由动物抓伤或咬伤而感染(Al
‑
Allaf AK,Harvey TC,Cunnington AR.Pericardial tamponade caused by Pasteurella multocida infection after a cat bite.Postgrad Med J,2001,77:199
‑
200.)。此外，Pm在增加由其他病原引起的原发性肺损伤的严重程度方面也发挥重要作用。
[0005]多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白在机体感染细菌导致疾病发展的过程中发挥着关键的作用。PlpE(Pasteurellalipoprotein E)蛋白属于多杀性巴氏杆菌外膜蛋白中的脂蛋白，现已证实PlpE蛋白能够诱导小鼠体内产生较高水平的特异性抗体，具有一定的免疫保护性(Wu JR,Shien JH,Shieh HK,Chen CF,Chang PC.Protective immunity conferred by recombinant Pasteurella multocida lipoprotein E(PlpE).Vaccine,2007,25:4140
‑
4148.)。我国学者分别对猪多杀性巴氏杆菌和牛多杀性巴氏杆菌的PlpE蛋白进行研究，结果表明PlpE蛋白具有良好的抗原性和免疫保护力。VacJ是Pm菌株中高度保守和广泛分布的外膜脂蛋白，许多相关研究表明脂蛋白也可以诱导机体产生较高水平的抗体(Sathish Bhadravati S,Abhinendra K,Revanaiah Y,Viswas KN.Immunogenicity of highly conserved recombinant VacJ outer membrane lipoprotein of Pasteurella multocida.Vaccine,2014,32:290
‑
296.)。除此之外，外膜蛋白OmpA、OmpH、Omp87、OmpW等也具有一定免疫保护力(Dabo SM,Taylor本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪胸膜肺炎放线杆菌和猪多杀性巴氏杆菌的抗原蛋白组合，其特征在于：包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1
‑
6所示的蛋白1
‑
6。2.根据权利要求1所述的抗原蛋白组合，其特征在于：编码蛋白1
‑
6的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.7
‑
12所示。3.根据权利要求1所述的抗原蛋白组合，其特征在于：蛋白1
‑
6通过原核表达获得。4.根据权利要求3所述的猪胸膜肺炎放线杆菌和猪多杀性巴氏杆菌的抗原蛋白组合，其特征在于：原核表达的载体为pET
‑
sumo载体，宿主为大肠杆菌。5.权利要求1
‑
4任一项所述的抗原蛋白组合在在制备猪传染性胸膜...

【专利技术属性】
技术研发人员：贝为成，张哲玮，刘迦慧，曹维维，汪最，饶静，甘晶，陈焕春，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：