一种弓形虫弱毒株及其构建方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种弓形虫弱毒株及其构建方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术通过敲除弓形虫中的TgPP6C基因，最终获得TgPP6C基因缺失的弓形虫弱毒株，与野生株相比，TgPP6C基因缺失的弓形虫弱毒株的体外增殖速度显著下降，致病性显著降低，感染小鼠表现出不发病且不死亡现象，对宿主具有较高的安全性。同时，TgPP6C基因缺失的弓形虫弱毒株免疫小鼠后，产生高IgG抗体水平，对高剂量的弓形虫RH、PYS速殖子和Pru包囊再次感染均能够提供显著免疫保护效力，可用于预防弓形虫的再次感染，是具有巨大应用价值的弱毒活疫苗。是具有巨大应用价值的弱毒活疫苗。是具有巨大应用价值的弱毒活疫苗。

【技术实现步骤摘要】
一种弓形虫弱毒株及其构建方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别涉及一种弓形虫弱毒株及其构建方法和应用。

技术介绍

[0002]刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种专性细胞内寄生的机会性致病原虫，可感染包括人在内的几乎所有的温血动物，在世界范围内广泛分布。弓形虫属于机会致病性病原，当人摄取含有弓形虫组织包囊的生肉或被猫粪便中卵囊污染的水之后，卵囊或组织包囊破裂，虫体入侵到肠粘膜细胞，卵囊释放的子孢子或组织包囊释放的缓殖子会转化成速殖子，最终分布到机体的各个部分，造成宿主弓形虫感染。免疫力正常的人感染弓形虫后，在机体免疫系统的作用下，宿主不表现明显的临床症状，但是对于免疫功能低下的病人，比如器官移植病人，艾滋病患者等，弓形虫感染具有很高的风险，甚至导致宿主死亡。现有药物的治疗仅对虫体的速殖子时期起作用，对于包囊内的缓殖子收效甚微，且药物的使用存在一定的毒副作用。
[0003]近年来，国内外学者认为开发疫苗免疫宿主可能是防控弓形虫病有效措施。目前，弓形虫病疫苗的研发主要集中在灭活疫苗、亚单位疫苗、核酸疫苗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种弓形虫弱毒株的构建方法，其特征在于，通过敲除TgPP6C基因来影响弓形虫的胞内增殖和毒力来构建弓形虫弱毒株；所述TgPP6C基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述弓形虫弱毒株的构建方法，其特征在于，所述TgPP6C基因的敲除是利用CRISPR
‑
Cas9技术来敲除。3.根据权利要求2所述的弓形...

【专利技术属性】
技术研发人员：王金磊，梁勤立，王萌，李婷婷，聂兰碧，李雪梅，付宝权，朱兴全，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：