一种双酶偶联催化5-羟甲基糠醛还原合成2,5-呋喃二甲醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种双酶偶联催化5

【技术实现步骤摘要】
一种双酶偶联催化5
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羟甲基糠醛还原合成2,5
‑
呋喃二甲醇的方法
(一)

[0001]本专利技术属于生物催化领域，涉及一种以5
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羟甲基糠醛为底物双酶偶联催化5
‑
羟甲基糠醛还原合成2,5
‑
呋喃二甲醇的方法。
(二)
技术介绍

[0002]2,5
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呋喃二甲醇作为一种高附加值的二醇，在合成树脂及药物的多杂环化合物的制备研究中具有重要应用。随着化石资源的日益缩减，由可再生的生物质基平台分子5
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羟甲基糠醛催化制备2,5
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呋喃二甲醇引起人们的广泛关注，是实现生物质资源高值化利用的研究重点之一。
[0003]目前，用化学催化剂催化5
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羟甲基糠醛氢化制备2,5
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呋喃二甲醇仍占主导地位，然而，化学法需要高温、高压等苛刻的反应条件，涉及有机溶剂和有毒化学品，剧毒、腐蚀性的废渣难以处理，造成严重的环境问题。另外，在5
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羟甲基糠醛氢化制备2,5...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双酶偶联催化5
‑
羟甲基糠醛还原合成2,5
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呋喃二甲醇的方法，其特征在于，所述方法为：将醇脱氢酶基因工程菌和葡萄糖脱氢酶基因工程菌各自经诱导表达获得的菌体冻干，获得的醇脱氢酶冻干菌粉与葡萄糖脱氢酶冻干菌粉混合后作为催化剂，以5
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羟甲基糠醛为底物，以葡萄糖为辅底物，以NADP
+
为辅酶，以pH 4～9的缓冲液为反应介质构成反应体系，在温度为20～50℃，400rpm条件下反应完全后，反应液分离纯化，获得2,5
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呋喃二甲醇。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述醇脱氢酶基因工程菌是将醇脱氢酶基因导入大肠杆菌构建获得的；所述醇脱氢酶基因包括但不限于核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的醇脱氢酶YsADH、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的醇脱氢酶AdhP、核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的醇脱氢酶YahK、核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的醇脱氢酶YjgB。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述葡萄糖脱氢酶基因工程菌是将葡萄糖脱氢酶基因导入大肠杆菌构建获得的；所述葡萄糖脱氢酶基因包括但不限于葡萄糖脱氢酶BmGDH
M6
，核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所示醇脱氢酶冻干菌粉与葡萄糖脱氢酶冻干菌粉以质量比0.2～5:1混合。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述反应体系中，催化剂加入量为20～40g/L；所述底物加入终浓度为500～1300mM，所述底物与葡萄糖加入浓度比为1:0.5～2.5；所述辅酶加入终浓度为0～0.5mM。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述反应温度为30℃，反应介质为pH 7.0的50mM Tris
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HCl缓冲液。7.如权利要求5所...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩梦阁，刘训，章银军，周雪婷，唐裔，华禹豪，张飞龙，肖延铭，应向贤，
申请(专利权)人：浙江英沃迪生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：