一种太白茶HPLC指纹图谱的建立方法技术

本发明专利技术提供一种太白茶HPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：S1、供试品溶液的制备：取太白茶样品粉末，加入提取溶剂，超声提取后，过滤，即得；S2、HPLC指纹图谱的建立：对供试品溶液进行HPLC检测，记录色谱图，得到太白茶的HPLC指纹图谱；S3、标准指纹图谱的确定：按照S1～S2的方法，对多批次太白茶建立HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定多批次太白茶样品的HPLC指纹图谱均有8个共有特征峰；8个所述共有特征峰构成太白茶的指纹特征，作为太白茶的标准指纹图谱。本发明专利技术通过建立太白茶的HPLC指纹图谱，以期为太白茶的质量综合评价提供可行方法，并为该药材后续药效物质基础研究奠定基础。础。础。

【技术实现步骤摘要】
一种太白茶HPLC指纹图谱的建立方法


[0001]本专利技术涉及太白茶质量检测领域，具体涉及一种太白茶HPLC指纹图谱的建立方法。

技术介绍

[0002]太白茶，为雪地茶Thamnolia subuliformis(Ehrh.)W.Culb.或地茶Tham nolia vermicularis(Sw.)Ach.ex Schaer.的干燥地衣体，具有清热解毒、安神养心、清心明目等功效。太白茶主要生长在高寒地带，如陕西太白山、云南、西藏等地。现代研究表明，太白茶是一类独特的由共生菌和共生藻组成的复合生物有机共生体，其代谢产物主要分为初生代谢物和次生代谢物，其中，初生代谢物主要包括多糖、氨基酸等物质，次生代谢物主要为地衣酸类。太白茶具有抗菌、调节免疫、抗衰老等药理活性，并被用于辅助治疗高血压、阿尔兹海默症、神经衰弱等症，具有很高的药用价值，目前国内外关于太白茶的质量控制方面的研究相对稀缺，因此，有必要对太白茶的质量控制进行研究，为太白茶的质量标准的建立提供参考。
[0003]目前，地方标准中太白茶的质量控制指标仅有性状、检查项，显微鉴别以及对照药材薄层色谱鉴别；而2015年版《陕西省药材标准》并无含量测定项，2010年版《四川省中药材标准》含量测定是以甘氨酸为对照进行总氨基酸测定，目前尚无统一的质量控制标准，无法对其进行有效的质量评价，因此，需要开展质量标准研究。近年来，太白茶的化学成分及药理作用受到广大科研者的重视，并对其进行了大量的研究。有研究采用高效液相色谱分析测定太白茶中松萝酸的量，其色谱条件为：Sepax Sapphire C18色谱柱(250mm
×
4.6mm，5μm)，甲醇
‑
(50mmol磷酸二氢钾
‑
三乙胺缓冲液500：1)(70：30)为流动相，检测波长285nm。但是我们在采用该方法建立太白茶的质量标准时，以该方法无法很好的检测到松萝酸，经质谱鉴定药材中含有松萝酸，但是松萝酸的响应值特别低。HPLC检测出的含量较高的色谱峰，市场上缺少相应的对照品。因此，我们拟通过建立太白茶的HPLC指纹图谱，以期为太白茶的质量评价和新药的开发利用提供参考依据，同时为从民族/民间传统药中开发中药创新资源提供范例。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种太白茶HPLC指纹图谱的建立方法，通过建立太白茶HPLC指纹图谱，用以实现对太白茶的真伪鉴别以及产品地理保护。
[0005]为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下。
[0006]一种太白茶HPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：
[0007]S1、供试品溶液的制备
[0008]取太白茶样品粉末，加入提取溶剂，超声提取后，过滤，即得；
[0009]S2、HPLC指纹图谱的建立
[0010]对S1的供试品溶液进行HPLC检测，记录色谱图，得到太白茶的HPLC指纹图谱；
[0011]S3、标准指纹图谱的确定
[0012]按照S1～S2的方法，对多批次太白茶建立HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定多批次太白茶样品的HPLC指纹图谱均有8个共有特征峰；8个所述共有特征峰构成太白茶的指纹特征，作为太白茶的标准指纹图谱。
[0013]进一步，S1中，提取溶剂为甲醇。
[0014]更进一步，S1中，太白茶样品粉末与甲醇的用量比为0.5g：25～50mL。
[0015]进一步，S1中，超声提取时间为30～60min。
[0016]进一步，S2中，HPLC的色谱条件如下：
[0017]C18色谱柱，250
×
4.6mm，5μm；柱温为30℃；
[0018]流动相A为甲醇，流动相B为0.1％磷酸水溶液；
[0019]梯度洗脱程序为0～10min，30％～45％流动相A；10～80min，45％～80％流动相A；80
‑
90min，80％～95％流动相A；
[0020]流速为1.0mL
·
min
‑1；检测波长为254nm；进样量为10μL。
[0021]进一步，S3中，8个所述共有特征峰的保留时间分别为11.3，18.755，37.402，53.487，60.492，67.328，75.132，84.588。
[0022]本专利技术的有益效果：
[0023]1、本专利技术通过建立太白茶的HPLC指纹图谱，并采用UHPLC
‑
Q
‑
E
×
activ e Focus
‑
MS/MS技术对其共有峰成分进行定性分析，以期为太白茶的质量综合评价提供可行方法，并为该药材后续药效物质基础研究奠定基础。
[0024]2、本专利技术通过对多批次太白茶建立HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定多批次太白茶样品的HPLC指纹图谱均有8个共有特征峰；8个所述共有特征峰构成太白茶的指纹特征，作为太白茶的标准指纹图谱。该方法操作简便，结果稳定可靠，且重复性好，可用于综合评价太白茶药材的整体质量。
附图说明
[0025]图1是采用不同检测色谱柱检测的太白茶指纹图谱。其中，A表示菲罗门；B表示Diamonsil；C表示Aglient。
[0026]图2是不同检测波长的太白茶指纹图谱。
[0027]图3是不同检测流动相的太白茶指纹图谱。
[0028]图4是不同检测柱温的太白茶指纹图谱。
[0029]图5是不同检测提取溶剂的太白茶指纹图谱。
[0030]图6是不同检测提取溶剂比例的太白茶指纹图谱。
[0031]图7是不同检测提取方式的太白茶指纹图谱。
[0032]图8是不同检测提取时间的太白茶指纹图谱。
[0033]图9是10批样品的HPLC叠加图谱(S1～S10)及对照图谱R。
具体实施方式
[0034]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于
限定本专利技术。
[0035]基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0036]下述各实施例中所述实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可在市场上购买得到。
[0037]实施例1
[0038]太白茶HPLC指纹图谱的建立方法如下：
[0039]1、供试样品
[0040]10批太白茶样品来源信息见表1，经鉴定为雪地茶Thamnolia subuliformis(Ehrh.)W.Culb.或地茶Thamnolia vermicularis(Sw.)Ach.ex Schaer.的干燥枝状体。
[0041]表1太白茶供试样品来源信息
[0042][0043]2、实验方法<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种太白茶HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、供试品溶液的制备取太白茶样品粉末，加入提取溶剂，超声提取后，过滤，即得；S2、HPLC指纹图谱的建立对S1的供试品溶液进行HPLC检测，记录色谱图，得到太白茶的HPLC指纹图谱；S3、标准指纹图谱的确定按照S1～S2的方法，对多批次太白茶建立HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定多批次太白茶样品的HPLC指纹图谱均有8个共有特征峰；8个所述共有特征峰构成太白茶的指纹特征，作为太白茶的标准指纹图谱。2.根据权利要求1所述的太白茶HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，S1中，提取溶剂为甲醇。3.根据权利要求2所述的太白茶HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，S1中，太白茶样品粉末与甲醇的用量比为0.5g：25～50mL。4.根据权利要求1所述的太白茶HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，S1中，超声...

【专利技术属性】
技术研发人员：李莎莎，李凡，毛阿娟，李芳，王卫锋，
申请(专利权)人：陕西省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：