本发明专利技术提供了一种拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌RM9及其应用。本发明专利技术的绿木霉菌RM9，保藏号CCTCC M 20221442。本发明专利技术的绿木霉RM9分离自茉莉植株根际，根际定植能力强，对茉莉白绢病防治效果好，防治效果达到83.34％，且对茉莉幼苗植株具有促生作用；而且培养条件相对简单，开发为固体菌剂有利于提升茉莉的产量和经济效益。济效益。
【技术实现步骤摘要】
拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌菌株RM9及其应用
[0001]本专利技术属于农业微生物
，具体的说，特别涉及拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌菌株RM9及其应用。
技术介绍
[0002]木霉(Trichoderma spp.)属于半知菌类的丝孢纲丛梗孢目丛梗孢科，是一种重要的生防真菌，已经广泛用于多种植物病害的生物防治。木霉菌作为国际公认的生防菌之一，近年来已成为一大热点，据报道其对立枯丝核菌、齐整小核菌、镰刀菌、疫霉菌等引起的土传病害具有较好的防治作用，同时还对果蔬、林木以及花卉等幼苗具有促生作用。
[0003]茉莉白绢病是由齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)引起的一种茉莉土传病害，发生部位在近地面的茎基部，在茉莉种植区普遍发生，可造成茉莉植株大面积枯死，茉莉花产量锐减，从而造成严重的经济损失。该病病原菌寄主范围广泛，除了危害茉莉以外，还危及花生、油菜、向日葵等粮油作物，辣椒、魔芋、苹果等果蔬，以及太子参、草珊瑚、紫菀等药用植物。目前，对茉莉白绢病的防治主要依靠化学药剂，化学药剂的滥用对环境造成污染，也危害人类的身体健康，寻找高效防控茉莉白绢病的木霉菌株资源非常重要。
技术实现思路
[0004]针对上述要求，本专利技术的目的是提供一种具有拮抗茉莉白绢病作用的绿木霉菌(Trichoderma virens)菌株RM9及其应用，对茉莉白绢病抑制作用强，对茉莉植株具有较好的促生效果。
[0005]为了实现本专利技术目的，专利技术人从采集的茉莉植株根际中分离纯化得到一株具有拮抗茉莉白绢病病原菌作用的真菌菌株RM9，根据菌株RM9的形态特征及rDNA
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ITS测序结果(SEQ ID NO:1)，将其鉴定为绿木霉(Trichoderma virens)。菌株RM9已于2022年9月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 20221442，地址：中国，武汉，武汉大学。
[0006]第一方面，本专利技术提供绿木霉菌(Trichoderma virens)菌株RM9，保藏号CCTCC M 20221442。
[0007]本专利技术的另一个目的提供拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌菌株RM9在防治茉莉白绢病中的应用或者在促进茉莉植株生长中的应用。
[0008]第二方面，本专利技术提供一种防治茉莉白绢病的制剂，其包括拮抗茉莉白绢病病原菌齐整小核菌(Sclerotium rolfsii)的绿木霉菌菌株RM9固体菌剂。
[0009]所述绿木霉菌菌株RM9固体菌剂为将所述的绿木霉菌菌株RM9经菌种活化、种子培养、固体发酵工序制备获得的固体菌剂。
[0010]其采用以下步骤制备得到：
[0011]步骤S1:将所述绿木霉菌菌株RM9活化，得到菌种；
[0012]步骤S2:将活化的菌种通过液体发酵得到种子；
[0013]步骤S3:将所述种子进行固体培养发酵，制备固体菌剂；
[0014]所述固体菌剂中，绿木霉菌菌株RM9每克固体培养基中含绿木霉孢子数为3.28
×
108个。
[0015]本专利技术的另一个目的，提供所述的制剂在防治茉莉白绢病或促进茉莉植株生长中的应用。
[0016]与现有的技术相比，本专利技术的有益效果在于：第一，本专利技术的绿木霉RM9，由于该菌株从茉莉根际处分离，对茉莉白绢病病原菌的拮抗能力强；第二，本专利技术以绿木霉RM9制备的固体菌剂，对茉莉白绢病的防治效果达到83.34％；第三，本专利技术以绿木霉RM9制备的固体菌剂，对茉莉促生作用效果较明显，对冠幅、根长、叶片数量、花数量、茎叶鲜重、根鲜重、总鲜重、根干重、茎叶干重和总干重等各项指标的促生率为37.14％～161.04％。
[0017]绿木霉菌(Trichoderma virens)菌株RM9保藏信息：
[0018]菌种分类命名：绿木霉菌(Trichoderma virens)
[0019]菌种保藏号：CCTCC M 20221442
[0020]保藏地址：中国，武汉，武汉大学中国典型培养物保藏中心
[0021]保藏日期：2022年9月16日
附图说明
[0022]图1为实施例1中绿木霉菌株RM9与茉莉白绢病病原菌JR29
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1对峙培养的菌落图片(A：对峙培养第5天，绿木霉菌株RM9对JR29
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1的营养竞争作用，B：对照)；
[0023]图2为实施例1中筛选得到的绿木霉菌株RM9菌落形态图与孢子形态图(比例尺＝10μm)；
[0024]图3为实施例2中制备的绿木霉RM9固体菌剂对茉莉白绢病的防病效果；
[0025]图4为实施例2中制备的绿木霉RM9固体菌剂对茉莉植株的促生效果。
具体实施方式
[0026]以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
[0027]下述菌株在本申请人的实验室均有保存，可以对外发放。
[0028]实施例1绿木霉RM9的分离、筛选与鉴定
[0029]1、绿木霉菌菌株的分离
[0030]从16个距离3公里以上的连年种植10年以上的茉莉种植基地采集健康的茉莉植株，取根际部组织，进行表面消毒。用已灭菌的小剪刀将组织剪为3
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1mm的样品，样品用75％酒精浸泡10秒，10％次氯酸钠溶液浸泡2分钟，然后用灭菌超纯水漂洗3次，将消毒好的样品放置在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上，于28℃下黑暗培养。培养期间定期观察，对外观形态颜色明显差异的木霉菌落进行纯化，共分离得到16株木霉菌，保存备用。
[0031]PDA培养基配方：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000ml。
[0032]2、生防木霉菌的筛选
[0033]2.1对峙培养：用灭菌的打孔器(直径为5mm)分别在茉莉白绢病病原菌(齐整小核菌Sclerotium rolfsii)与不同木霉的菌落边缘打孔，取菌饼接种于新鲜的90mmPDA平板的左右两侧，菌饼间距离5.5厘米，以只接种病原菌的平板为对照，每处理重复3次，置于28℃
进行黑暗培养。待对照菌落长满平板时，用十字交叉法分别测量菌落直径，以只接种病原菌作对照，计算抑菌率。
[0034]计算公式：抑菌率(％)＝(对照菌落半径
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处理菌落半径)/对照菌落半径
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100％
[0035]在对峙培养中，16个木霉菌菌株对茉莉白绢病病原菌显示出不同的抑制作用(表1)，其中RM9抑菌率最高。在对峙培养过程中观察发现，木霉RM9的菌落生长速率普遍比病原菌的菌落生长速率快，能够在短时间内迅速占据生长空间，对茉莉白绢病病原菌JR29
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1的生长产生抑制作用(图1)，当木霉菌丝与病原菌菌丝相接时，木霉逐步包围病原菌菌落，直至病原菌菌落完全萎缩，被木霉菌落覆盖。对峙培养结果说明，木霉菌株RM本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌(Trichoderma virens)菌株RM9，保藏号为CCTCC M.20221442。2.根据权利要求1所述的拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌菌株RM9，所述绿木霉菌RM9的rDNA
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ITS核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.根据权利要求1或2所述的拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌菌株RM9在防治茉莉白绢病中的应用或者在促进茉莉植株生长中的应用。4.一种防治茉莉白绢病的制剂，其特征在于：其包括权利要求1或2所述的拮抗茉莉白绢病的绿木霉菌菌株RM9的固体菌剂。5.根据权利要求4所述的防治茉莉白绢病的制剂，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙明艳，刘可丹，李春牛，卜朝阳，喇燕菲，李先民，苏源，覃耿敏，陶大燕，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院，
类型：发明
国别省市：
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