一种解淀粉芽孢杆菌T-11及其菌剂制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一株解淀粉芽孢杆菌T

【技术实现步骤摘要】
一种解淀粉芽孢杆菌T
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11及其菌剂制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)发酵优化及其在低产桃园改造和桃树根腐病生物防治上的应用，属于微生物


技术介绍

[0002]我国是桃的生产大国，长期以来，我国的桃种植面积和总产量均稳居世界第一。但是由于长期连作种植桃树，果园栽植种类单一，再加上管理技术相对落后、农药化肥的滥用，导致许多果园土传病害频繁发生，严重威胁到了果农的经济收入。在众多桃园土传病害中，桃树根腐病在某些地区尤其严重。造成桃树根腐病病害的病原菌是一些土壤习居菌，主要有腐皮镰刀菌、尖孢镰刀菌、弯角镰刀菌等。
[0003]目前国内对于桃树根腐病的防治措施，主要还是采用传统的化学农药防治并结合相关农艺措施的方法，在生物防治方面研究甚少，尤其对于桃树根腐病生防菌的研究则更是少之又少。
[0004]一直以来，化学防治由于其防效高、速度快、杀虫抗菌谱广、使用简单等特点，成为了我国防治农业病虫害的重要手段。但是，由于长期过度使用各种农药化肥，导致许多的病虫害都产生了抗药性。与此同时，也导致了土壤板结退化、环境污染、江河湖泊富营养化、温室气体大量排放等问题的出现。与传统的防治手段相比，生物防治具有不污染环境、对人和其它动物安全、防治作用持久等优点。特别是近年来随着人们环境保护意识的增强，绿色有机食品需求量的增加，以及对保护生物多样性与生态农业可持续发展的大力倡导，使得生物防治再次成为了世界农业的热点话题。<br/>[0005]解淀粉芽孢杆菌是一种作物根际促生菌，可以通过多种机制促进植物生长；同时，解淀粉芽孢杆菌既可以通过自身表达改善植物外界环境，也可以通过调控植物本身代谢途径增强“植物系统抗性”，使植物能够在适当刺激下增强自身的防御能力，产生多种酶以及大量的二次代谢产物，通过体内合成途径产生芽孢霉素、风霉素、聚酮类药物和芽孢杆菌素、细菌素等抗菌物质，抗病效果显著。解淀粉芽孢杆菌在各个领域均有较好的应用前景，但在实际生产中仍然存在发酵菌数不能满足生产需求，功能菌与相关产品衔接不力尤其是专用产品缺乏，功能菌产品具体使用方式方法有待探索等关键技术问题亟需解决。

技术实现思路

[0006]本专利技术针对现有技术手段的不足，提供一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，可应用于低产桃园改造和桃树根腐病的生物防治。
[0007]一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)T
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11，于2022年10月20日经形态学、BIOLOG生理生化、16SrRNA及看家基因系统鉴定，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2022年10月26日，保藏编号：CGMCC No.25968，分类命名：Bacillus amyloliquefaciens。
[0008]所述菌株解淀粉芽孢杆菌T
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11从根际土壤中分离得到，简称T
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11，主要生物学特
性为：细胞革兰氏阳性，杆状，芽孢椭圆形，中生或端生，胞囊不膨大。菌落白色或浅黄色，中间有嵴状凸起，湿润无光泽，边缘不规则。适宜生长温度为20
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50℃，适宜pH为4
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7，10％盐浓度生长。能水解酪蛋白、明胶、淀粉、果胶，不水解纤维素、尿素。能利用纤维二糖、葡萄糖、甘油、麦芽糖、甘露糖、棉子糖、山梨醇、蔗糖和海藻糖等。过氧化氢酶反应、淀粉水解反应、硝酸还原反应、精氨酸双水解反应、葡糖糖发酵反应、蔗糖发酵反应、MR反应、V
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P反应呈阳性；吲哚反应、硫化氢反应呈阴性。部分结果见表1。
[0009]表1T
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11菌株的Biolog及生理生化鉴定部分结果
[0010][0011]16S rRNA序列：
[0012]GGGGGTGCCTAATACATGCAGTCGAGCGGACAGATGGGAGCTTGCTCCCTGATGTTAG
[0013]CGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGG
[0014]AAACCGGGGCTAATACCGGATGCTTGTTTGAACCGCATGGTTCAGACATAAAAGGTGG
[0015]CTTCGGCTACCACTTACAGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGC
[0016]TCACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTG
[0017]AGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGA
[0018]AAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGT
[0019]TGTTAGGGAAGAACAAGTGCCGTTCAAATAGGGCGGCACCTTGACGGTACCTAACCAG
[0020]AAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGT
[0021]CCGGAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCC
[0022]CCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGGAG
[0023]AGTGGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCG
[0024]AAGGCGACTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACA
[0025]GGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGGGGGTTT
[0026]CCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCA
[0027]AGACTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTT
[0028]AATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAATCCTAGAG
[0029]ATAGGACGTCCCCTTCGGGGGCAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGT
[0030]GTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTG本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种解淀粉芽孢杆菌T
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11，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2022年10月26日，保藏编号：CGMCC No.25968，分类命名：Bacillus amyloliquefaciens。2.一种解淀粉芽孢杆菌T
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11菌剂制备方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)将解淀粉芽孢杆菌T
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11划线接种于LB固体培养基平板上活化培养，制得活化菌株；(2)将步骤(1)制得的活化菌株接种于LB液体培养基中，进行种子培养，制得种子液；(3)将步骤(2)制得的种子液按体积百分比3.7％的接种量接种到发酵培养基中，进行发酵培养，制得发酵液。3.如权利要求2所述解淀粉芽孢杆菌T
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11菌剂制备方法，其特征在于，所述步骤(1)接种于LB固体培养基平板，于37℃培养24h。4.如权利要求2所述解淀粉芽孢杆菌T
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11菌剂制备方法，其特征在于，所述步骤(2)接种后的LB液体培养基于37℃，180rpm培养12h。5.如权利要求2所述解淀粉芽孢杆菌T
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11菌剂制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，发酵培养基每升组分如下：麸皮14.9g；...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑伟伟，王冰，要雅倩，徐志瑶，成娜娜，周波，张升祥，高淼，
申请(专利权)人：泗洪县瑞龙农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：