野生型爪哇虫草菌生防菌株CJ01及其应用制造技术

一株野生型爪哇虫草菌生防菌株CJ01，从罹病死亡的烟粉虱虫体上分离得到，分类命名为爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)CJ01，保藏编号为CCTCC NO：M20221721。本菌株CJ01对烟粉虱、蚜虫和蓟马等重大农业害虫具有高效、特异和稳定的杀虫活性，且制备成本低、环境污染小，有望研发为微生物杀虫剂，用于防治烟粉虱、蚜虫和蓟马等重大农业害虫引起的虫害，满足我国对害虫绿色可持续综合防控的重要需求。虫绿色可持续综合防控的重要需求。

【技术实现步骤摘要】
野生型爪哇虫草菌生防菌株CJ01及其应用


[0001]本专利技术属于微生物和生物防治领域，涉及一株爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)生防菌株CJ01，同时涉及该菌株的高效杀虫活性。

技术介绍

[0002]害虫是世界各国现代农业发展过程中所面临的重大问题。每年因虫害所造成的农业损失数以亿计，采用有效手段减少病虫害的发生并提高农作物的产量是植保工作者所关心的重要议题。烟粉虱、蚜虫和蓟马因其危害的寄主范围广泛，且能传播多种植物病毒病，给作物生长带来严重危害，造成巨大经济损失，已成为当前农业生产中不容轻视的重大害虫。长期以来，国内外农业工作者防治虫害主要依赖化学农药。然而，随着化学农药滥用、不合理施用，造成天敌昆虫大量死亡，农药残留对土壤、水体等环境所造成的污染问题突出，同时也在一定程度上直接导致害虫抗药性的产生。因此，探索新型环境友好的非化学防治手段已迫在眉睫。与人工合成的化学农药相比，运用天然病原菌开发而来的微生物杀虫剂对靶标害虫进行生物防治，具有杀虫特异性强、绿色环保、研发成本低等特点，是害虫绿色防控领域的重要方式，具备巨大的应用潜力。
[0003]在应用于害虫防治的病原微生物中，虫生真菌因其种类繁多、代谢类型复杂、安全有效、量产容易、环境污染小等优点，具备巨大的开发潜力和应用推广价值，是种植绿色、安全、高产农作物的首选。目前全世界已报道的虫生真菌共有约100属，800余种。在这些虫生真菌中，已开发利用的主要包括两大类，一是属于半知菌亚门的丝孢菌类(Hyphomyctes)，包括许多已经广泛应用的种类，如白僵菌(Beauveria spp.)、绿僵菌(Metarhizium spp.)、拟青霉(Paecilamyces spp.)和轮枝菌(Verticillium spp.)等；二是属于接合菌亚门的虫霉真菌(Entomophthorales)，包含许多经常引发高强度害虫流行病的种类，如虫疠霉(Pandora spp.)、虫疫霉(Erynia spp.)、虫霉(Entomophthora spp.)等。然而，在已公布的昆虫病原真菌中，仅有少量物种资源被开发为真菌杀虫剂，大量现存的物种应用潜力仍亟待发掘，导致了现有可用的虫生真菌生防制剂物种单一、种类十分匮乏、害虫防控范围有限。同时，当前的物种资源库，进一步制约了虫生真菌生防制剂的研发速度及已有制剂优化改良，对当前绿色农业的发展极为不利。因此，亟需不断从野外分离出更多有效虫生菌株来补充现有虫生真菌资源库，筛选并分离出新的高毒力虫生真菌，丰富杀虫真菌资源库，为作物可持续绿色防控与工程菌株商业化提供新的物种来源。因此，寻找并挖掘新的可用虫生真菌资源对我国的绿色农业生物防治有着十分重要的意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于，针对上述现有技术中存在的问题，提供一株对烟粉虱、蚜虫和蓟马等重大农业害虫有高效杀虫活性且兼具绿色环保型的野生型生防菌株
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爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)菌株。
[0005]上述提及的野生型生防菌株，是从寄生于扶桑花叶片上罹病死亡的烟粉虱成虫虫
体上进行菌株的分离与筛选得到，经鉴定该菌株为爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)，命名为爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)CJ01，于2022年11月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M20221721，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
[0006]本专利技术菌株CJ01具有如下特性：
[0007]1.培养学特征
[0008]在28℃、12L:12D光照培养箱中培养10d条件下，本菌株CJ01在SDA培养基上生长速度最快，在PPDA、SMAY、Czapek培养基上生长缓慢；SDA培养基产孢量最大，其次是PDA培养基，但两种培养基产孢量无显著差异；SDA培养的菌株菌落紧密、厚实，具有良好的营养条件。选择SDA培养基作为CJ01菌株生长的最适培养基。本专利技术菌株CJ01在SDA培养基上的最适培养温度为28℃，最佳光周期为24L:0D，最适pH为6
‑
7。
[0009]2.形态学特征：
[0010]本菌株CJ01在SDA培养基上菌丝质地绒状，呈放射性生长，培养早期为白色(图1A)，背面为米白色，成熟菌落为浅棕色(图1B)。分生孢子呈椭圆形、圆形或长卵型(图1C)，产孢细胞端细、基部膨大(图1D)。
[0011]3.生理生化特征
[0012]本专利技术菌株CJ01的葡萄糖发酵、乳糖发酵、蔗糖利用、淀粉水解、纤维二糖水解、油脂水解、尿素试验均显示阳性，适生pH值范围为4
‑
10。
[0013]提取本专利技术菌株CJ01总DNA，以通用引物ITS1/ITS4进行ITS序列检测，并进行同源性比对，构建系统发育树(图2)。由系统进化树可以看出，菌株CJ01与爪哇虫草菌Cordyceps javanica同属一个遗传分枝且有较高支持度。结合培养学特征、形态学特征及生理生化特征，确定本菌株CJ01为爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)，命名为爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)CJ01。
[0014]本专利技术菌株CJ01的孢子悬浮液对农业重大害虫烟粉虱、蚜虫和蓟马均表现出较强烈抑制作用，具有较高侵染杀虫效果。表明，本专利技术菌株CJ01的孢子悬浮液能用于防治重大农业害虫烟粉虱、蚜虫和蓟马。其中，本专利技术菌株CJ01孢子悬浮液的配制按本领域孢子悬浮液的常规配制方法进行。
[0015]鉴于本专利技术菌株CJ01对烟粉虱、蚜虫和蓟马等重大农业害虫的较高侵染杀虫效果，因此，可以将本菌株CJ01制成微生物杀虫剂，用于防治烟粉虱、蚜虫和蓟马等重大农业害虫引起的病害。
[0016]上述微生物杀虫剂是以本专利技术菌株CJ01或其孢子悬浮液为活性成分，可以为固态形式，也可以为液态形式。该微生物杀虫剂还可以包含与本菌株CJ01具有增效作用的其他物质。例如该物质可以是微生物来源诱导植物能够产生抗病的物质，也可以是诱导植物能够产生抗病的化合物，还可以是诱导植物能够产生抗病的其他微生物等等；再如该物质可以是微生物来源抑菌物质，也可以是抑菌化合物，还可以是具有抑菌作用的其他微生物等等。
[0017]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0018](1)本专利技术的爪哇虫草菌菌株CJ01是从扶桑花叶片上罹病死亡的烟粉虱成虫虫体进行菌株分离筛选而得，通过测定其对农业重大害虫烟粉虱、蚜虫和蓟马的毒力，发现本菌株CJ01对上述重大农业害虫具有较高侵染杀虫效果。
[0019](2)本专利技术菌株CJ01是一株在烟粉虱、蚜虫和蓟马等重大农业害虫的防治上具有重要意义的生物防治菌株，可研发成微生物杀虫剂，为烟粉虱、蚜虫和蓟马等重大农业害虫的绿色高效防控提供技术支撑。
附图说明
[0020]图1为本专利技术菌株CJ01的形态图；
[0021]其中，A.培养第4天菌落上表面；B.培养第10天菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.爪哇虫草菌(Cordyceps javanica)CJ01，保藏编号为CCTCC NO：M20221721。2.权利要求1所述的爪哇虫草菌CJ01在防治烟粉虱中的应用。3.权利要求1所述的爪哇虫草菌CJ01在防治蚜虫中的应用。4.权利要求1所述的爪哇虫草菌CJ01在防治蓟马中的应用。5.权利要求1所述爪哇虫草菌CJ01的孢子悬浮液。6...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄国华，张永芳，宁国贵，朱根发，陈琪，刘墨涛，赵景，
申请(专利权)人：华中农业大学广东省农业科学院环境园艺研究所，
类型：发明
国别省市：