一株类肠膜魏斯氏菌MbWp-25及其产品与应用制造技术

本发明专利技术公开了一株类肠膜魏斯氏菌MbWp

【技术实现步骤摘要】
一株类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25及其产品与应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一株类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25及其产品与应用。

技术介绍

[0002]乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的统称。乳酸菌应用范围较广，根据菌种的实际情况，可作为具有辅助治疗肠道疾病、抗生素替代或食品发酵功能的菌类使用，已经成熟的应用于各行各业。相关研究表明，乳酸菌能促进动物生长，调节肠道pH，维持肠道微生态平衡，从而发挥改善胃肠道功能、提高消化率和生物效价、抑制肠道内腐败菌生长、提高机体免疫力等功能。但目前可市售的乳酸菌多数为厌氧生长，对使用环境有一定的要求，且可应用的种属单一，不能满足实际的市场需求。因此，开发一种对使用条件要求低的新乳酸菌菌种对于发酵以及微生物应用领域具有极为重要的意义。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一株类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25及其产品与应用，本专利技术中的类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25具有较好的抗胆盐效果，而且产酸能力强，能够广泛用于各类发酵产品，具有极为广泛的应用范围和实用价值。
[0004]本专利技术的第一个方面，提供一株类肠膜魏斯氏菌，该类肠膜魏斯氏菌为类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides)MbWp
‑r/>25，该类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides)MbWp
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25于2022年2月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC，地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼)，保藏编号为GDMCC No:62252。
[0005]在本专利技术实施例中，所述类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25(Weissella paramesenteroides MbWp
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25)是专利技术人从岭南桑果园自然发酵6～18个月的桑葚果酒分离获得，具有较好的耐酸和耐胆汁酸功能。
[0006]在本专利技术的一些实施方式中，所述类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25的具体选育方法为：
[0007](1)取岭南桑果园无菌采集的自然发酵6～18个月的桑葚果酒，在厌氧条件下进行连续10倍梯度稀释，使用MRS培养基(乳酸菌科选择性培养基倾注平板)在厌氧培养箱中配合厌氧产气包在36.5
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37.5℃培养24
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72h，分离潜在乳酸菌科细菌。
[0008](2)从平板上挑取透明微隆起圆状轮廓小菌落，经过革兰氏染色镜检后，选取革兰氏阳性菌(菌体呈不规则短杆状，两端呈圆形或稍细小，成对或短链排列)，继续划线分离纯化2～3次，直到分离出类肠膜魏斯氏菌纯培养物。
[0009](3)将类肠膜魏斯氏菌纯培养物，在调酸至pH 2.0的MRS平板和含有0.9％胆盐的MRS平板中各培养4
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6h，得到目标类肠膜魏斯氏菌。
[0010](4)将筛选得到的目标类肠膜魏斯氏菌进行菌种鉴定，获得类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25。
[0011]类肠膜魏斯氏菌主要来源于果酒、泡菜等植物，主要用于植物性产品发酵，在本专利技术实施例中，其分离得到的类肠膜魏斯氏菌具有良好的产酸能力，因而也具有较好的抑菌特性，能够抑制病原菌，促进宿主生长发育，从而在抗生素替代物方面具有一定的潜在应用价值。
[0012]在专利技术实施例中，专利技术人所分离得到的类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25具有如下生物学特性：革兰氏阳性菌，无鞭毛、不运动，不形成芽孢，兼性厌氧；菌体形状菌体呈不规则短杆状，两端呈圆形或稍细小，成对或短链排列，其菌落光滑且边缘完整，呈乳白色。最适生长温度为36.5
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37.5℃；最适pH值为5.7～7.0。
[0013]根据本专利技术的第一个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述类肠膜魏斯氏菌的16SrRNA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
[0014]在专利技术实施例中，专利技术人通过对类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25进行系统发育树构建，发现其与现有技术中发现的类肠膜魏斯氏菌存在一定的同源性差异。
[0015]本专利技术的第二个方面，提供一种含有本专利技术第一个方面所述类肠膜魏斯氏菌的产品，所述产品的剂型包括固体粉剂、液体菌剂、颗粒接种菌剂、冷冻菌泥液、琼脂载体菌剂。
[0016]当然，本领域技术人员也可以根据实际使用需求，合理调整其剂型选择，使其获得更高的贮藏存活率或使用效果。
[0017]根据本专利技术的第二个方面，在本专利技术的一些实施方式中，所述产品为类肠膜魏斯氏菌包埋冻干粉。
[0018]在本专利技术实施例中，专利技术人通过采用冻干粉的方式，有效的提高了其贮藏存活率，其相比于正常贮藏，有效活菌数提高了近10000倍。在本专利技术实施例中，该类肠膜魏斯氏菌包埋冻干粉活菌数大于1000亿CFU/g，经25℃贮藏6个月活菌存活率为60％以上。而且，本专利技术实施例中的制备方法是在非严格厌氧环境下进行包埋冻干处理，在冻干处理前分步骤使用多种价格低廉且容易获得的抗氧化成分对类肠膜魏斯氏菌进行微胶囊化包埋处理，有效防止氧气与类肠膜魏斯氏菌细胞膜系统的相互作用，从而阻止损害DNA合成的行为，并且能够清除在菌株冻干前产生的自由基，从而预防干燥过程中的氧化损伤，并使类肠膜魏斯氏菌在常温贮藏条件下不易失活。
[0019]上述方法不仅限于对本专利技术中的类肠膜魏斯氏菌MbWp
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25进行冻干，还适用于对其它兼性厌氧菌的冻干处理，以获得相同或者相似的效果。
[0020]在本专利技术的一些实施方式中，所述类肠膜魏斯氏菌包埋冻干粉的制备原料包括本专利技术第一个方面所述的类肠膜魏斯氏菌、海藻酸钠、碳酸钙、乳粉、大豆油、醋酸盐和辅剂。
[0021]当然，本领域技术人员可以根据实际使用需求，合理添加其他用于包埋或提高包埋效果的材料，包括但不限于海藻酸钠、碳酸钙、乳粉、大豆油。
[0022]在本专利技术的一些实施方式中，所述大豆油中添加有冰乙酸或吐温。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述大豆油为含0.3～0.7％(v/v)冰乙酸的大豆油。
[0024]在本专利技术的一些实施方式中，所述大豆油为含0.5％(v/v)冰乙酸的大豆油。
[0025]在本专利技术的一些实施方式中，所述大豆油为含1～2％(v/v)吐温的大豆油。
[0026]在本专利技术的一些实施方式中，所述大豆油为含1.5％(v/v)吐温的大豆油。
[0027]在本专利技术的一些实施方式中，所述海藻酸钠、碳酸钙、乳粉均为其与水配置而成的
水溶液。
[0028]在本专利技术的一些实施方式中，海藻酸钠水溶液、碳酸钙水溶液、类肠膜魏斯氏菌菌液、醋酸盐水溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株类肠膜魏斯氏菌，其特征在于，所述类肠膜魏斯氏菌为类肠膜魏斯氏菌(Weissellaparamesenteroides)MbWp
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25，所述类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides)MbWp
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25于2022年2月11日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCCNo:62252。2.根据权利要求1所述的类肠膜魏斯氏菌，其特征在于，所述类肠膜魏斯氏菌的16S rRNA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。3.一种含有权利要求1或2中所述类肠膜魏斯氏菌的产品，其特征在于，所述产品的剂型包括固体粉剂、液体菌剂、颗粒接种菌剂、冷冻菌泥液、琼脂载体菌剂。4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述产品为类肠膜魏斯氏菌包埋...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄娟，金庭飞，黄燕燕，黎旭，
申请(专利权)人：广东益可维生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：