靶向清除细菌耐药性的方法技术

本发明专利技术公开了一种靶向清除细菌耐药性的方法，该方法包括以下步骤：将靶向抗生素抗性基因的核酸分子与带有锋利边缘的纳米载体组装，得到靶向复合体，核酸分子包括编码CRISPR相关核酸酶的第一序列和生成靶向抗生素抗性基因的sgRNA的第二序列；将靶向复合体与细菌接触，通过纳米载体的物理穿刺作用将核酸分子递送到细菌内，敲除细菌的所述抗生素抗性基因。考虑到细菌细胞壁的刚性要弱于植物细胞壁的刚性，因此采用带有锋利边缘的纳米颗粒作为载体对细菌的细胞壁和细胞膜进行物理穿刺，实现外源核酸分子在细菌上的跨膜转运，从而实现外源CRISPR系统的递送，通过这种方式递呈ARG

【技术实现步骤摘要】
靶向清除细菌耐药性的方法


[0001]本申请涉及抗性基因
，尤其是涉及靶向清除细菌耐药性的方法。

技术介绍

[0002]抗生素在抑制细菌感染方面具有重要作用，但其广泛使用也引起了细菌的抗生素选择压力，诱导了大量的抗生素耐药细菌(Antibiotics Resistance Bacterias，ARBs)和抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes，ARGs)。细菌(尤其是致病菌)的耐药性增加，ARGs也在人类致病菌间传播扩散，造成了全球性的健康问题。与传统化学污染物不同，ARGs不仅会在不同环境介质中持续残留、转移和扩散(易获得，难去除)，而且具有暴发性的特征，一旦失控，将严重威胁公共安全。因此，寻找遏制耐药性传播的方法已成为目前国内外的热点问题。目前去除ARGs的方法包括生物、化学、物理以及结合处理等几类，如电离辐射、低温热处理、高级氧化、消毒、好氧堆肥、厌氧消化等广谱杀菌方法，这些方法虽然能大幅降低群落整体的ARGs丰度水平，但由于其缺乏对耐药菌的针对性，并不能完全杀灭耐药菌，甚至会因为其对有益微生物的灭杀本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.靶向清除细菌耐药性的方法，其特征在于，包括以下步骤：将靶向抗生素抗性基因的核酸分子与带有锋利边缘的纳米载体组装，得到靶向复合体，所述核酸分子包括编码CRISPR相关核酸酶的第一序列和生成靶向所述抗生素抗性基因的sgRNA的第二序列；将所述靶向复合体与细菌接触，通过所述纳米载体的物理穿刺作用将所述核酸分子递送到所述细菌内，敲除所述细菌的所述抗生素抗性基因；优选地，所述锋利边缘满足所述纳米载体的边缘具有向外的1～100层的原子层。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述纳米载体选自碳纳米管、碳点、石墨烯中的至少一种。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组装为所述纳米载体与所述核酸分子在静电作用力下发生组装。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组装包括以下步骤：对所述纳米载体的表面进行活化，然后连接上阳离子材料，得到阳离子化的纳米载体；将所述阳离子化的纳米载体与所述核酸分子混合孵育，在静电作用力下使所述核酸分子组装到所述阳离子化的纳米载体上，得到靶向复合体；优选地，所述活化采用EDC和NHS进行羧基活化处理。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述阳离子材料选自聚乙烯亚胺、聚丙烯亚胺、精胺、亚精胺、聚组氨酸、聚精氨酸、聚赖氨酸、壳聚糖、咪唑鎓中的至少一种。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述CRISPR相关核酸酶选自Cas、Csa、Csb、Csc、Cse、Csf、Csm、Csn、Csx、Csy、Cmr中的至少一种。7.根据权利要求1所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏雨，于凯强，
申请(专利权)人：南方科技大学，
类型：发明
国别省市：